Nuovo metodo di analisi per Cold nocicezione in<em&gt; Drosophila</em&gt; Le larve

Heather N. Turner; Christian Landry; Michael J. Galko

doi:10.3791/55568

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Articolo metodologico

Nuovo metodo di analisi per Cold nocicezione in

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DOI:

10.3791/55568

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3 aprile 2017

Heather N. Turner¹^,²^,⁵ , Christian Landry³ , Michael J. Galko¹^,²^,⁴

¹Department of Genetics, UT MD Anderson Cancer Center, ²Neuroscience Program, Graduate School of Biomedical Sciences at Houston, ³ProDev Engineering, ⁴Genes and Development Program, Graduate School of Biomedical Sciences at Houston, ⁵Section of Neurobiology, University of Southern California

In questo articolo

Sommario

Qui mostriamo un nuovo metodo di analisi per studiare nocicezione freddo in Drosophila larve. Questo dosaggio utilizza una sonda custom-built Peltier in grado di applicare una focale stimolo freddo nociva e si traduce in comportamenti specifici a freddo quantificabili. Questa tecnica consentirà un'ulteriore dissezione cellulari e molecolari della nocicezione freddo.

Abstract

Come gli organismi di percepire e reagire a temperature nocivi è ancora poco conosciuta. Inoltre, i meccanismi sottostanti sensibilizzazione della macchina sensoriale, come nei pazienti con neuropatia periferica o sensibilizzazione lesioni indotte, non sono ben caratterizzati. Il modello Drosophila geneticamente trattabili è stato utilizzato per studiare le cellule e geni necessari per il rilevamento calore nocive, che ha dato più geni conservati di interesse. Poco si sa tuttavia sulle cellule e recettori importanti per il rilevamento freddo nocivi. Anche se, Drosophila non sopravvive l'esposizione prolungata a temperature fredde (≤10 ° C), ed eviterà fresco, preferendo le temperature più calde in saggi preferenze comportamentali, come essi percepiscono e possibilmente evitare stimoli freddi nocivi è stato recentemente indagato solo.

Qui si descrive e caratterizzare i primi freddi nocive (≤10 ° C) del test comportamentaleDrosophila. Con questo strumento e il dosaggio, mostriamo un investigatore come valutare qualitativamente e quantitativamente i comportamenti nocicettivi freddi. Questo può essere fatto in condizioni di coltura normali / sane, o presumibilmente nel contesto della malattia, infortunio o sensibilizzazione. Inoltre, questo test può essere applicato a larve selezionato per genotipi desiderati, che potrebbero avere un impatto thermosensation, dolore, o sensibilizzazione nocicettiva. Dato che il dolore è un processo altamente conservato, da questo test per studiare ulteriormente nocicezione termica sarà probabilmente raccogliere importanti comprensione dei processi di dolore in altre specie, tra cui vertebrati.

Introduzione

Drosophila ha dimostrato di essere molto utile per l'identificazione di nuovi geni conservati e circuiti neuronali che sottendono comportamenti complessi. Mosche forniscono un sofisticato toolkit genetico e un sistema nervoso semplificato che permettono precisa manipolazione genetica e neuronale ^{^1,} ^{^2,} ^{^3,} ⁴ per sezionare le basi cellulari e molecolari della nocicezione ^{^5,} ^{^6,} ^7. Larve sono particolarmente utili per queste analisi, dato c....