Qui, presentiamo un'idrolisi efficiente e successiva protezione Fmoc di un amminoacido isolato da un complesso Ni-Schiff-base. condizioni di idrolisi qui presentati sono adatti per l'uso quando è richiesta la ritenzione di gruppi protettivi acido-labile catena laterale. Questa tecnica può essere adattabile ad una varietà di substrati amminoacidi innaturali.
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Articolo metodologico
Idrolisi di un Ni-Schiff-Base complessi utilizzando le condizioni adatte per la conservazione di acido-labile gruppi protettori
In questo articolo
Sommario
Abstract
aminoacidi non naturali, aminoacidi contenenti funzionalità in catena laterale non comunemente visto in natura, sono sempre trovati in sequenze peptidiche sintetiche. Sintesi di alcuni aminoacidi non naturali spesso include l'uso di un precursore costituito da una base di Schiff-stabilizzato da un catione nichel. Unnatural catene laterali possono essere installati su un backbone aminoacido che si trova in questo complesso Schiff-base. L'amminoacido non naturale risultante può essere isolato da questo complesso mediante idrolisi della Schiff-base, tipicamente impiegando riflusso in soluzione fortemente acida. Queste condizioni fortemente acide possono rimuovere l'acido-labile catena laterale gruppi protettori necessario per gli amminoacidi non naturali da utilizzare nella sintesi peptidica in fase solida di micro-onde. In questo lavoro, presentiamo un'idrolisi efficiente e successiva protezione Fmoc di un amminoacido isolato da un complesso di base Ni-Schiff. condizioni di idrolisi presentati in questo lavoro sono adatti per la conservazione di s acido-labileide-catena gruppi protettori e può essere adattabili ad una varietà di substrati amminoacidi innaturali.
Introduzione
amminoacidi non naturali catene laterali cuscinetto (di SAU) che variano da quelli dei venti naturali amminoacidi presenti in natura hanno trovato utilità in un'ampia gamma di applicazioni. Sintesi di questi SAU, tuttavia, può essere difficile a seconda della struttura delle catene laterali e la stereochimica della spina dorsale aminoacido. Attivazione del legame CH di glicina nel contesto di un complesso Schiff-base di nichel è stato utilizzato per produrre una varietà di derivati di amminoacidi compreso α, acidi p-diammino 1 e il cuscinetto di SAU fluorurato 2 o eterociclici catene laterali. 3
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Protocollo
1. L'idrolisi del Complesso Ni-Schiff-Base
- Sciogliere 1 mmoli del complesso Ni-PBP-Schiff-base in 40 ml di N, N-dimetilformammide (DMF) sotto agitazione in un pallone da 250 ml a fondo tondo a temperatura ambiente.
- Aggiungere 60 ml di soluzione 0,2 M EDTA acquosa, a pH 4,5.
- Utilizzando una barra di agitazione magnetica e mescolare piastra, agitare la soluzione combinata notte. Come il complesso Schiff-base viene idrolizzato, il colore si sposterà da un rosso intenso al bianco.
- Dopo il completamento della reazione, come indicato dall'assenza di qualsiasi colorazione rossa, trasferire la reazione in un ....
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Risultati
Abbiamo ipotizzato che la rimozione del Ni 2+ dal complesso Ni-PBP-Gly potrebbe consentire un'idrolisi acquosa efficiente del Schiff-base senza la necessità di condizioni di pH dure. Come EDTA è un agente chelante poco costoso e ben studiato, 10 ipotizziamo che l'aggiunta di EDTA ad una soluzione di Ni-PBP-Gly faciliterebbe chelazione di ioni Ni 2+, promuovendo così idrolisi del complesso.
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Discussione
Il protocollo descritto sopra è utile nella sua capacità di facilitare l'isolamento di una dorsale amminoacido da un complesso Ni-Schiff-base in condizioni di pH blande e successiva protezione Fmoc di questo aminoacido isolato attraverso due passaggi critici. Il primo passo consiste nel mescolare una soluzione in DMF / acqua contenente EDTA per facilitare il distacco del aminoacido dal complesso. Residui sottoprodotti organici complessi o possono essere facilmente rimossi con estrazione. Il secondo passo di questo p.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Il finanziamento fornito da Slippery Rock University. Vorremmo ringraziare T. Boron III (Slippery Rock University) e C. Haney (University of Pennsylvania) per le loro intuizioni.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Ni-PBP-Gly | Sintetizzato dal protocollo pubblicato | ||
| DMF | Fisher | D119-4 | |
| EDTA | Fisher | S311-100 | |
| Diclorometano | Acros | AC610050040 | |
| Bicarbonato di sodio | Fisher | S233-500 | |
| Fmoc-OSu | Chem-Impex | "00147" | |
| Diossano | Fisher | D111-500 | |
| Acido cloridrico | Fisher | A144-500 | |
| Acetato di etile | Acros | AC610060040 | |
| Solfato di magnesio | Fisher | M65-500 | |
| ZEOPrep 60ECO Gel di silice | ZEOChem | ||
| Hexanes | Fisher | 3200250.650.443 | |
| per cromatografia | |||
| Strisce reattive per pH Evaporatore | |||
| rotante | |||
| 250 mL Imbuto | |||
| 250 mL Pallone | |||
| Barra di agitazione Piastra | |||
| agitazione |
Riferimenti
- Wang, J., Shi, T., Deng, G., Jiang, H., Liu, H. Highly Enantio- and Diastereoselective Mannich Reactions of Chiral Ni(II) Glycinates with amino sulfones. Efficient asymmetric synthesis of aromatic α,β-diamino acids. J. Org. Chem. 73 (21), 8563-8570 (2011).
- Wang, J., Lin, D., Zhou, S., Ding, X., Soloshonok, V. A., Liu, H.
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Ristampe e permessi
