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Articolo metodologico

Benefici della terapia di risincronizzazione cardiaca in un modello asincrono insufficienza cardiaca indotta da ablazione di ramo di pacco di sinistra e cadenza veloce

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DOI:

10.3791/56439

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11 dicembre 2017

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1Department of Cardiology, Shanghai Institute of Cardiovascular Diseases, Zhongshan Hospital, Fudan University, 2Department of Echocardiography, Shanghai Institute of Medical imaging, Shanghai Institute of Cardiovascular Diseases, Zhongshan Hospital, Fudan University, 3Department of Cardiac surgery, Shanghai Institute of Cardiovascular Diseases, Zhongshan Hospital, Fudan University

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

L'istituzione di un modello di infarto cronico asincrona (HF) dalla cadenza rapida combinato con ablazione di ramo di pacco di sinistra è presentato. Bidimensionale speckle imaging e aortica integrale di tempo velocità di rilevamento vengono applicate per convalidare questo modello HF stabile con asincronia ventricolare sinistro e i benefici della terapia di risincronizzazione cardiaca.

Abstract

Ora è riconosciuto bene che pazienti con scompenso cardiaco (HF) con blocco di branca sinistro (BBS) derivano benefici clinici sostanziali dalla terapia di resincronizzazione cardiaca (CRT), e blocco di branca sinistra è diventato uno dei predittori importanti per la risposta alla CRT. Il modello convenzionale di HF tachypacing-indotta ha diversi limiti principali, tra cui l'assenza di blocco di branca sinistra stabile e rapida inversione di disfunzione ventricolare di sinistra (LV) dopo la cessazione della stimolazione. Quindi, è essenziale per stabilire un modello ottimale di HF cronica con blocco di branca sinistra isolato per studiare i benefici CRT. Nello studio presente, è stabilito un modello canino di HF asincrona indotta dall'ablazione del ramo (LBB) di pacco di sinistra e 4 settimane di rapida (RV) stimolazione ventricolare destra. Il camper e atriale di destra elettrodi di stimolazione (RA) tramite l'approccio della vena giugulare, insieme a un LV dell'epicardio stimolazione elettrodo, sono stati impiantati per prestazioni di CRT. Sono presentati qui i protocolli dettagliati di ablazione del catetere di radiofrequenza (RF), stimolazione conduce l'impianto e la strategia di stimolazione rapida. Gli elettrogrammi intracardiaci e superfici durante il funzionamento sono stati forniti anche per una migliore comprensione dell'ablazione LBB. La formazione immagine bidimensionale speckle tracking e velocità aortica tempo integrale (aVTI) sono stati acquisiti per convalidare il modello HF stabile cronico con LV asincronia e benefici di CRT. Coordinando la contrazione e l'attivazione ventricolare, CRT in uniforme il lavoro meccanico di LV e ripristinato la funzione di pompa di LV, che è stata seguita dall'inversione della dilatazione di LV. Inoltre, lo studio istopatologico ha rivelato un significativo restauro del cardiomyocyte diametro e collagene frazione di volume (CVF) dopo prestazioni CRT, che indica un istologico e cellulare inverso rimodellamento suscitata da CRT. In questo rapporto, abbiamo descritto un metodo fattibile e valido per sviluppare un modello asincrono cronico di HF, che era adatto per lo studio strutturale e biologico inversa CRT seguente che ritocca.

Introduzione

HF cronica avanzata è delle cause principali di mortalità per varie malattie cardiovascolari. Un sottogruppo di pazienti con insufficienza cardiaca congestizia (CHF) anche sviluppare coordinazione di conduzione ventricolare che aggrava i sintomi e la prognosi. CRT, noto anche come stimolazione biventricolare, è stata introdotta come terapia alternativa per questi pazienti per oltre 20 anni1,2. Purtroppo, circa il 20-40% dei pazienti mostrano scarsa risposta alla CRT. Da allora, molti studi effettuati al fine di massimizzare la CRT risposta3. Ora è riconosciuto bene che pazienti con blocco di branca sinistra potrebbero beneficiare più CRT rispetto a quelli con non-LBBB4, dal momento che un modello di blocco di branca sinistra provoca un ordine di grandezza maggiore di dissincronia cardiaca a causa di asimmetria nella libertà di movimento della parete tra le pareti del setto e laterali . Nel frattempo gli studi recenti hanno cominciato a esplorare i cambiamenti nell'espressione genica e rimodellamento molecolare connesso con CRT5. Che accompagna il rimodellamento strutturale inversa indotta da CRT, cellulari e molecolari reversione ad un livello normale è di grande interesse6. Quindi, è essenziale per stabilire un modello ottimale di CHF con blocco di branca sinistra isolato per studiare i benefici CRT.

Cronica, stimolazione ventricolare rapida veniva utilizzata per produrre CHF in un modello canino. RV stimolazione senza dubbio potrebbe produrre in ritardo LV contrazione come modello del modello BBS-come contrazione. Tuttavia, questo tipo di asincronia funzionale con un sistema di conduzione intatta non può emulare LBBB anatomico e non è considerato un modello appropriato per lo studio delle prestazioni di CRT, la cui essenza è quello di coordinare alterata attivazione elettrica e contrazione del miocardio. Ripristino rapido della contrattilità LV e parziale recupero delle dimensioni di LV dopo cessazione della stimolazione sono stati anche segnalati7.

Studi sperimentali hanno indotto LBBB cronica tramite ablazione RF per stabilire la contrazione ventricolare asincrona8. Una combinazione di riduzione in funzione della pompa globale e regionale lavoro meccanico non valido potrebbe esacerbare CHF generando inefficienza cardiaca così come rimodellamento cardiaco presso il tessuto, i livelli cellulari e molecolari. Nei cuori di BBS, carico di lavoro è più basso nel setto e più alto nella parete laterale di LV. Di conseguenza, il rimodellamento cardiaco è più pronunciato nel muro laterale9. Lo scopo del presente studio è: (i) per avanzare un modello HF stabile e cronico con asincronia meccanico interventricolare ed intraventricolare mediante RV cadenza veloce in combinazione con ablazione LBB; (ii) per confermare dyssynchronous HF nel nostro modello e benefici di CRT nel coordinare la contrazione da bidimensionale speckle tracking ecocardiografia e aVTI; e (iii) per esplorare preliminarmente inversa di rimodellamento cellulare suscitata da CRT.

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Protocollo

Quindici cani di razza beagle maschio (12-18 mesi, Peso circa 10,0-12,0 kg) sono stati acquistati e sottoposti ad esperimenti. Tutte le procedure sono state eseguite in conformità con la guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio pubblicato da la US National Institutes of Health (pubblicazione n. 85-23, riveduta 1996) e sono state approvate dal comitato di cura degli animali in ospedale Zhongshan, Fudan Università. La figura 1 Mostra il flusso di lavoro schematico per tutti i passaggi di protocollo.

1. pre-chirurgia preparazione e raccolta dei dati Baseline

  1. Radersi i capelli di un arto posteriore per venipuntura. Stabilire un accesso venoso attraverso il ramo laterale della piccola safena di cani di razza beagle sperimentale utilizzando un catetere venoso (22 G, 0,9 mm x 25 mm). Iniettare lentamente sodio pentobarbital (30 mg/kg) attraverso il catetere venoso per indurre l'anestesia, che è confermata dalla perdita del riflesso di ciglia. Dare ulteriori sodio pentobarbital al dosaggio di 10 mg/kg in caso di ripristino di anestesia durante l'intervento chirurgico.
  2. Proteggere gli arti per la tabella di funzionamento con la corda grossa e mantenere l'animale in posizione supina.
  3. Tagliare i capelli delle estremità degli arti e torace. Incollare gli elettrodi di piombo arto alle estremità degli arti e gli elettrodi precordiali piombo in sei sedi designate sulla parete di cassa. Registrare l'elettrocardiogramma basale (ECG).
  4. Valutazione ecocardiografica
    1. Incollare gli elettrodi di piombo di ecocardiografo agli arti dell'animale.
    2. Ad un esame ecocardiografico standard. Da quattro apicale convenzionale alloggiamento (A4C) e due apicale (A2C) vista da camera, ottenere il volume end-diastolic LV (LVEDV), il volume telesistolico LV (LVESV) e la frazione di espulsione di LV (LVEF) calcolata utilizzando il metodo di Simpson biplano.
    3. Valutare la deformazione longitudinale LV bidimensionale speckle imaging di rilevamento. Eseguire speckle tracking sul A4C, A2C e visualizzazione dell'asse lungo apicale (APLAX).
    4. Ottenere le curve di deformazione longitudinale dalle tre viste apicale sopra ai livelli basali e metà di-ventricolare apicale in ogni parete (A4C: setto e la parete laterale; A2c: parete anteriore e parete inferiore; APLAX: parete setto anteriore e posteriore). Il software integrerà automaticamente questi dati per produrre una mappa di occhio di bue di 17-segmento, tra cui 6 segmenti a livello basale (setto, parete laterale, parete anteriore, parete inferiore, anteriore del setto e parete posteriore), 6 segmenti presso il metà di-ventricolare livello (setto, parete laterale, parete anteriore, parete inferiore, anteriore del setto e parete posteriore), 4 segmenti a livello apicale (setto, parete laterale, parete anteriore, parete inferiore) e un cappuccio apicale.
    5. Tempo per la tensione di picco (TTP) è definito come l'intervallo di tempo dall'inizio del complesso QRS al punto più basso della curva di deformazione, che indica la massima deformazione longitudinale. Calcolare la deviazione standard di 17-segmento TTP (PSD) per valutare il sincronismo meccanico di LV.
    6. Registrare le velocità di flusso di Doppler transaortica nella vista cinque camera apicale. Misurare e media aVTI in 3-4 battiti consecutivi.
  5. Intubazione orotracheale e ventilazione meccanica
    1. Delicatamente tirare fuori la linguetta e mantenere estensione della linguetta in preparazione per l'intubazione orotracheal. Posizionare l'animale in una posizione di "sniffing".
    2. Far avanzare lentamente la lama del laringoscopio curva fino a quando la punta della lama posizionata tra la base della lingua e l'epiglottide. Sollevare il laringoscopio verso l'alto per esporre le corde vocali. Inserire un tubo endotracheale nella bocca e passare il tubo oltre le corde vocali. Fissare il tubo per la testa dell'animale con del nastro adesivo.
    3. Auscultare entrambi i polmoni per confermare il corretto inserimento del tubo endotracheale come testimoniano i suoni respiratori bilaterali e simmetrici durante la ventilazione di positivo-pressione.
    4. Collegare l'estremità esterna del tubo endotracheale a un respiratore di volume pedalato. Avviare e mantenere ausiliaria ventilazione meccanica con l'aria ambiente. Impostare la frequenza di respirazione alle 8 - 20 volte al minuto con un volume di corrente a 8-15 mL/kg. Impostare i parametri secondo SpO2 misurata dall'impulso oximetry.

2. dell'epicardio LV l'impianto di elettrodi di stimolazione

  1. Collegare i fili di piombo Defibrillatore/monitor cardiaco per gli elettrodi di pelle, che sono attaccati agli arti. Pre-Medicare l'animale con il levofloxacin 0,3 g per via endovenosa guttae.
  2. Dopo la rasatura dei capelli del collo e del torace, sterilizzare la regione toracica anteriore e la regione cervicale di sinistra con iodophor e spianare le lenzuola sterili.
  3. Toracotomia
    1. Eseguire la toracotomia muscolo-con parsimonia in una posizione di decubito laterale di destra. Dopo la somministrazione di fentanil da un'infusione continua tasso (0,01 mg/kg/hr) per via endovenosa, incise la pelle trasversalmente dalla linea parasternale sinistra al quarto spazio intercostale.
    2. Dopo dissezione smussa i 3 strati del muscolo toracico (pectoralis major, pettorale minore, intercostali), aprire la cavità pleurica sinistra presso il quarto spazio intercostale (tra i 4th e 5th nervature) tramite la dissezione tagliente. Posto un riavvolgitore di costola nello spazio intercostale. Confezione di garza sterile immerso nello 0,9% NaCl intorno i lobi del polmone per proteggere i polmoni e per mantenere un campo di visione chiara.
    3. Accuratamente incise il pericardio laterale usando l'elettrocauterio. Aperto il pericardio per esporre completamente la parete laterale di LV con soggiorno suture (0-sutura).
  4. L'impianto di elettrodi di stimolazione di LV
    1. Suturare il LV unipolare elettrodo di stimolazione al miocardio sulla parete laterale di LV con un punto utilizzando una sutura 4-0. Fare un nodo delicato sulla sutura per evitare di lacerare i tessuti del miocardio.
    2. Collegare il terminale perno metallico del cavo di cadenza su un cavo ponte testare i parametri del piombo. Dopo il piombo soddisfacente parametri si ottengono con la soglia di stimolazione < 2.0 V a 0,48 ms e piombo impedenza < Ω 2.000, leggermente tirare il cavo dell'elettrodo per garantire una fissazione costante.
  5. Rimuovere le suture di soggiorno ed esaminare attentamente l'area di intervento chirurgico per eliminare sanguinamento attivo.
  6. Chiudere il pericardio con due punti di sutura con punti di sutura 2-0/T. Rimuovere la garza ripiena e il riavvolgitore della nervatura.
  7. Utilizzare due suture pericostal (0-sutura) per approssimare il 4th e 5th nervature. Chiudere la fascia intercostale con diversi punti di sutura con punti di sutura 2-0/T. Gonfiare i polmoni adeguatamente utilizzando un palloncino ausiliario tramite intubazione orotracheal prima l'ultima sutura. Guardare attraverso gli intercostali per confermare la normale espansione dei polmoni.
  8. Riposizionare gli strati muscolari a posto con nessun punti di sutura. Il conduttore penetra il pericardio e la fascia intercostale strati muscolari successivamente attraverso il divario tra i nodi di chirurgia.
  9. Incidere la pelle della regione cervicale sinistra e sezionare il tessuto sottocutaneo fino a raggiungere la fascia profonda utilizzando un morsetto curvo. Costruire un tunnel sottocutaneo sopra la plancia profonda dall'area precordiale alla regione cervicale sinistra con una pinza diritta.
  10. Tirare il perno terminale del piombo attraverso il tunnel nella regione cervicale sinistro utilizzando una pinza diritta. Coprire il perno terminale con un manicotto isolante, che è legato a 2-0/T suture. Sutura il cavo attorno al manicotto alla fascia e localmente incorporare il piombo sul lato sinistro del collo.
  11. Chiudere il tessuto sottocutaneo e la pelle di entrambe le incisioni, toraciche e cervicale 0-suture.
  12. Interrompere l'induzione di anestesia, quando l'animale sta prendendo gli atti respiratori spontanei, scollegare il tubo endotracheale dal ventilatore. Dopo l'animale recupera dall'anestesia, rimuovere l'intubazione tracheale e catetere venoso. Tenere l'animale sotto osservazione fino al recupero completo.
  13. Iniettare per via intramuscolare 800.000 U di penicillina ogni 12 h per 2 settimane dopo l'operazione.

3. RA e RV l'impianto di elettrodi di stimolazione

  1. Dell'impianto RA e RV stimolazione elettrodi 2 settimane dopo l'impianto di elettrodi di LV, quando l'animale recupera dalla toracotomia. Effettuare l'operazione in sala operatoria cateterizzazione cardiaca dotata di un apparato di radioscopia.
  2. Inducono anestesia come al punto 1.1. Gli arti per la tabella di funzionamento di fissare e mantenere l'animale in posizione supina. Pre-Medicare l'animale con il levofloxacin 0,3 g per via endovenosa guttae.
  3. Tagliare i capelli delle estremità degli arti. Collegare i fili di piombo di monitor ECG agli elettrodi pelle e incollare gli elettrodi di pelle alle estremità degli arti. Accendere il monitor ECG e seleziona piombo II per il monitoraggio intra-procedurali.
  4. Dopo la rasatura dei capelli del collo, sterilizzare la regione cervicale sinistra con iodophor e drappeggio il foglio sterile. Fentanil per amministrare un infusione a velocità costante (0,01 mg/kg/hr) per via endovenosa durante l'intera procedura.
  5. Approccio venoso
    1. Praticare una piccola incisione verticale vicino al precedente ferita sul lato sinistro della zona cervicale. Mediante dissezione smussa, separare la fascia per esporre la vena giugulare esterna sinistra. Separare la vena da tessuti connettivi attentamente con un morsetto di zanzara.
    2. Delicatamente tirare la vena utilizzando un morsetto curvo e far passare due 2-0/T suture sotto la vena. Legare la sutura distale.
    3. Sollevare delicatamente la sutura distale e tagliare un piccolo buco proprio al centro delle due suture con forbici iris. Usando un plettro di vena, inserire passiva a forma di J RA piombo e piombo RV attivo nella vena giugulare esterna sinistra.
  6. Impianto di piombo di RV
    1. Una volta che il piombo di RV è stato avanzato per l'atrio di destra basso o la vena cava inferiore sotto fluoroscopia, ritirare il mandrino dritto dal piombo RV. Una forma di J alla parte distale del mandrino e inserire di nuovo attraverso il cavo di RV.
    2. Con l'aiuto del mandrino curvo, introdurre il cavo attraverso la valvola tricuspide e nel tratto di uscita. Estrarre lentamente il piombo sia il mandrino, permettendo la punta di piombo per prolasso verso l'apice di RV.
    3. Sostituire il mandrino di curvato con un dritto. Avanzare il cavo verso l'apice.
    4. Verificare i parametri di piombo con il mandrino ritirato circa a metà strada. Soddisfacenti parametri includono una soglia di stimolazione < 1.0 V a 0,48 ms, ampiezza onda R > 5,0 mV e piombo impedenza < 2.000 Ω. Una volta ottenuti parametri elettrici accettabili, estendere la helix attiva, rimuovere il mandrino e misurare nuovamente i parametri.
  7. Impianto di piombo di RA
    1. Mantenendo il piombo RA diretto verso l'alto atrio anteriore, estrarre lentamente il mandrino dritto, permettendo di ritrazione del piombo a forma di J preformato con la sua punta entrando l'annesso. Un movimento di va e vieni caratteristico dell'elettrodo con attività atriale può essere osservato.
    2. Soddisfacenti parametri includono una soglia di stimolazione < 1, 0V a 0,48 ms, P-fluttua l'ampiezza > 2,0 mV e piombo impedenza < 2.000 Ω. Analogamente, quando si ottengono parametri accettabili, regolare il lasco di piombo e rimuovere il mandrino.
  8. Dopo aver controllato la stabilità di entrambi i cavi, stringere la sutura prossimale per la venotomia. Tie giù entrambi conduce alla fascia profonda sottostante con due o tre suture 2-0/T intorno alle maniche di sutura. Ricontrollare i parametri elettrici e la posizione di entrambi i cavi sotto fluoroscopia dopo la sutura.
  9. Fare una tasca del generatore di impulsi vicino l'accesso venoso e in un piano appena sopra lo strato fascia e sotto il grasso sottocutaneo. Creare la tasca mediante dissezione smussa con un morsetto curvo. Dovrebbe essere solo grande abbastanza per ospitare sia il generatore e conduce ridondanti.
  10. Pulire e asciugare i perni di piombo. Coprire il perno terminale del cavo atriale con un manicotto isolante e suturare il piombo al piano della tasca. Inserire il cavo ventricolare in un generatore di impulsi del pacemaker e fissarla con il perno di connettore distale oltre set-viti del generatore.
  11. Collocare il generatore nella tasca con i cavi ridondanti che arrotola sotto il dispositivo. Legare il generatore giù per la fascia con una 2-0/T sutura attraverso il foro di fissaggio nell'intestazione del generatore. Eseguire l'esame fluoroscopico dell'intero sistema.
  12. Dopo aver controllato l'emostasi, chiudere la tasca e la fascia superficiale in strati usando i suturare 2-0/T. Infine approssimare i bordi di pelle con 0-suture e programmare il pacemaker a una modalità OVO utilizzando una bacchetta di telemetria.
  13. Per gli animali del gruppo finto, impiantare il LV, RV e RA conduce in modo simile, ma con alcun inserimento di generatore.

4. LBB ablazione

  1. Eseguire l'ablazione del catetere sotto la Guida di radioscopia immediatamente dopo la RV e RA condurre l'impianto. Radere i peli del torace, schiena e giusta regione inguinal. Mantenere l'animale in posizione supina.
  2. Preparare un registratore elettrofisiologico multicanale per simultaneo elettrogramma intracardiaco e superficie di registrazione, con le impostazioni del filtro di 30-400 kHz (bipolare) o 0.05-500 kHz (unipolare) e un'amplificazione del segnale di 5.000 piega. Collegare l'elettrodo di ritorno senza filo sul retro, e gli elettrodi di 12 derivazioni standard agli arti e al torace. Collegare tutti i cavi al registratore elettrofisiologico e registrare l'elettrocardiogramma ad una velocità di sweep 100 mm/s.
  3. Approccio venoso e arterioso
    1. Dopo la disinfezione di routine e festoni nella regione inguinale destra, praticare una piccola incisione verticalmente attraverso la pelle. Mediante dissezione smussa, separare la fascia per identificare la vena femorale di destra e dell'arteria femorale.
    2. Delicatamente tirare la vena femorale e posizionare due suture di soggiorno (2-0/T sutura) sotto la vena. Legare la vena all'estremità distale. Eseguire la stessa manovra sull'arteria femorale.
    3. Leggermente pick up la vena femorale e introdurre un ago micropuntura prossimalmente nella vena tra i due punti di sutura. Tenere l'ago e inserire una punta flessibile (disco floppy a forma di J) filo guida attraverso l'ago.
    4. Quando è stato passato abbastanza filo guida nella vena, ritirare l'ago e avanzare un dilatatore e guaina combinazione (6-Fr) sopra il filo guida nella vena femorale. Rimuovere il filo guida e il dilatatore con la guaina restanti per introduzione di un catetere. Legare una sutura allentata intorno alla vena prossimale per la venotomy con la guaina venosa in luogo.
    5. Allo stesso modo, è possibile inserire una guaina 7-Fr nell'arteria femorale. Consegnare un bolo di eparina diluita in soluzione fisiologica di 100 U/kg nell'introduttore arterioso per impedire la coagulazione.
  4. Mappatura di destra-parteggiato suo potenziale bundle
    1. Anticipo un catetere quadripolar steerable 6-Fr nella vena femorale tramite la guaina venosa. Collegare l'estremità del catetere al registratore elettrofisiologico multicanale tramite il modulo di ingresso del catetere da cavi.
    2. Far passare il catetere nell'atrio destro e attraverso la valvola tricuspid finché è chiaramente nel ventricolo di destra. In un anteriore di destra vista obliqua di radioscopia del 30° (RAO), ritirare il catetere attraverso l'orifizio tricuspidale finché non viene visualizzato un potenziale atriale diventa più grande. Una leggera coppia di torsione in senso orario aiuta a mantenere gli elettrodi a contatto con il setto. Quando i potenziali atriali e ventricolari sono circa uguali nelle dimensioni, una deflessione bifasica o trifasica appare tra di loro, che rappresenta la destra-parteggiata suo pacco potenziale.
  5. Ablazione e mappatura di pacco di sinistra ramo potenziale (LBP)
    1. Introdurre un catetere da ablazione steerable 7-Fr 4 mm-punta nell'arteria femorale tramite la guaina arteriosa. Collegare l'estremità del catetere ablazione al generatore RF e multi-canale elettrofisiologici registratore di cavi.
    2. Passare il catetere arterioso retrogradely attraverso la valvola aortica e l'anticipo al LV in una vista del 30° RAO. Deviare la punta del catetere verso il setto interventricolare. Tenere l'elettrodo in stretto contatto con il setto.
    3. In un sinistro anteriore (LAO) 45° fluoroscopia vista obliqua, estrarre lentamente il catetere lungo il setto fino a sinistra-parteggiato che suo potenziale bundle è registrato tra elettrogramma atriale e ventricolare, appena sotto la valvola aortica. Poi lentamente avanzare il catetere lungo il setto e manipolare la punta per identificare un LBP discreti, che è registrato sotto l'aortica valvola, in genere 1-1.5 cm inferiore di sinistra-parteggiato suo pacco sito di registrazione.
    4. Quando l'intervallo di potenziale--ventricolare elettrogramma è di circa 10 ms più l'intervallo HV e una A breve / rapporto tra elettrogramma V < 01:10 è osservato, LBP è identificato. LBP all'intervallo elettrogramma ventricolare più in anticipo (LBP-V) è solitamente inferiore a 20 ms, che potrebbe ridurre al minimo il rischio di blocco A-V completo.
    5. Una volta ottenuta una soddisfacente posizione di LBP, iniziare l'ablazione del catetere con un generatore RF, generando energia onda sinusoidale non modulata 500kHz (potere gamma 30-40 W). Regolare la potenza di raggiungere una temperatura di 60 ° C all'interfaccia elettrodo-tessuto. Se la temperatura non sale sopra 50 ° C entro 15 s, interrompere l'erogazione di energia, regolare la punta del catetere e ricominciare da capo.
    6. Monitorare l'impedenza continuamente durante l'applicazione di energia. Una goccia di impedenza maggiore di 6-8 Ω durante l'erogazione di energia è considerata un segno di contatto con il tessuto buono e riscaldamento adeguato.
    7. Tipico BBS è definito da: un prolungamento della durata del QRS; QRS positivo in cavi I, II, V5, V6 con dentellato onda R e negativo in cavi aVR, V1; e una perdita di LBP elettrogramma. Se non c'è alcun cambiamento nella morfologia di QRS dopo 10 s, interrompere l'erogazione di energia e regolare il catetere per trovare una nuova destinazione LBP. Quando viene visualizzata la finestra di una tipica morfologia di QRS LBBB sull'elettrocardiogramma di superficie, continuare l'applicazione di energia per 60-90 s o fino a quando un improvviso aumento di impedenza.
    8. Interrompere l'erogazione di energia immediatamente in caso di blocco atrioventricolare completo(grado 3) o fibrillazione ventricolare (VF). Implementare rapidamente defibrillazione elettrica ogni volta che si verifica VF.
    9. Quando viene raggiunta una morfologia di QRS LBBB, osservare l'elettrocardiogramma di superficie per un periodo di stabilizzazione di 30 min. Se si ripresenta una morfologia QRS normale, ripetere la procedura di ablazione di cui sopra.
  6. Una volta completata la procedura di ablazione del catetere, rimuovere entrambi i cateteri. Rimuovere la guaina venosa e arteriosa e fare nodi stretto rapidamente sulle suture prossimale per prevenire l'emorragia.
  7. Dopo un attento esame per escludere sanguinamento attivo, chiudere la fascia in strati usando i suturare 2-0/T. Infine chiudere la pelle con 0-punti di sutura.
  8. Scollegare tutti gli elettrodi dall'animale e monitorare l'animale frequentemente fino al completo recupero dall'anestesia. Iniettare per via intramuscolare 800.000 U di penicillina ogni 12 h per 1 settimana dopo l'operazione.
  9. LBB ablazione non è realizzata per il gruppo finto.

5. rapida cadenza per induzione HF

  1. Quando l'animale recupera dall'operazione, record la superficie ECG per confermare una presenza permanente di BBS più successivamente 1 settimana. Quindi programmare il pacemaker a una modalità VVI a 260 battiti al minuto (bpm), utilizzando una bacchetta di telemetria.
  2. Indurre l'anestesia (come al punto 1.1) e programmare il pacemaker alla modalità OVO dopo 4 settimane di cadenza veloce.
  3. Eseguire l'ecocardiografia per valutare LVEF (con riferimento al punto 1.4). Se la LVEF si riduce sotto il 35%, preparare l'animale per prestazioni di CRT. Se la LVEF è ancora superiore al 35%, inviare l'animale a RV rapida cadenza nuovamente riprogrammando il pacemaker alla modalità VVI a 260 bpm.
  4. Eseguire l'ecocardiografia ogni 2 settimane fino a quando la LVEF è inferiore al 35%. Una volta che il raggiungimento dell'obiettivo LVEF, terminare cadenza veloce RV e preparare per la strategia di CRT.
  5. Gli animali del gruppo finto non sono sottoposti alla cadenza veloce.

6. prestazioni di terapia di risincronizzazione cardiaca

  1. Dividere gli animali con HF nel gruppo di controllo e gruppo CRT in modo casuale. Per il gruppo di controllo di HF, lasciare che l'animale sopravvivere un altro 8 settimane senza alcun intervento. Per gruppo di CRT, avviare prestazioni CRT tramite stimolazione biventricolare.
  2. Dopo induzione di anestesia (come al punto 1.1), è necessario mantenere l'animale in posizione supina proteggendo gli arti a una tabella di funzionamento. Pre-Medicare l'animale con il levofloxacin 0,3 g per via endovenosa guttae. Radere i peli del collo, sterilizzare la regione cervicale sinistra e drappo il foglio sterile.
  3. Dopo la somministrazione di fentanil da un'infusione continua tasso (0,01 mg/kg/hr) per via endovenosa, praticare una piccola incisione verticale immediatamente accanto alla precedente ferita sul lato sinistro del collo. Mediante dissezione smussa, separare la fascia per isolare il generatore di impulsi e la cadenza conduce (compresi i fili, RV, LV e RA) senza la ferita.
  4. Sganciare il perno terminale di piombo RV dall'intestazione del generatore svitando le viti. Accuratamente tagliare le suture serrate sui cavi BT e RA e stappare i perni terminali. Pulire i perni di tutte le derivazioni immergendo in etanolo e utilizzando successivamente garza asciutta.
  5. Inserire i cavi di RA, RV e LV correttamente l'intestazione di un generatore di impulsi di CRT e serrare le viti. Ingrandire la tasca mediante dissezione smussa per essere in forma per il generatore di nuovo. Collocare il generatore nella tasca e legare il generatore fino al pavimento della tasca con una sutura di 2-0/T.
  6. Verifica la tasca per il hemostasis. Chiudere la tasca e la fascia superficiale in strati usando i suturare 2-0/T. Quindi chiudere la pelle con 0-punti di sutura.
  7. Programma il pacemaker a una modalità DDD con ritardo di atrioventricolare (AV) impostato su un valore di 70 ms ed interventricolare (VV) ritardo di 0 ms. esaminare l'animale frequentemente fino al recupero dall'anestesia. Iniettare 800.000 U di penicillina per via intramuscolare ogni 12 h per 1 settimana.
  8. Dopo 8 settimane di prestazioni CRT, eseguire di nuovo l'ecocardiografia transthoracic sugli animali di tutti i gruppi (come descritto al punto 1.4).

7. sacrificare gli animali e l'analisi istologica

  1. Fissare gli arti dell'animale alla tabella operazione in anestesia generale. Iniettare 100 mg/kg del pentobarbital endovenosi per eseguire il sacrificio animale. Garantire la morte animale per assenza di battito cardiaco e la respirazione movimento.
  2. Incidere la pelle della regione cervicale di sinistra. Con una combinazione di dissezione tagliente e smussata, gratis il generatore e i cavi. Scollegare tutti i cavi dal generatore svitando le viti.
  3. Gratis i cavi dal tessuto sottocutaneo gradualmente e li traccia fino al punto di accesso venoso. Identificare le maniche di sutura e tagliare tutte le suture di ritenzione. Ritrarre l'elica di fissazione attiva del piombo RV per facilitare la rimozione.
  4. Fare un'incisione trasversale al quarto spazio intercostale dalla linea sternale alla linea emiclaveare sinistra. Libero il piombo di LV alla fascia precordiale, lungo il tunnel sottocutaneo, fino alla regione cervicale sinistra, con una pinza diritta.
  5. Dopo dissezione smussa dei muscoli toracici, aprire la cavità pleurica sinistra. Posto un riavvolgitore di costola nello spazio intercostale. Aprire completamente il pericardio.
  6. Tagliare la sutura dell'elettrodo di piombo di LV dell'epicardio. Separare l'elettrodo dal cuore di tagliare un piccolo pezzo di tessuto del miocardio wrapping intorno all'elettrodo.
  7. Tagliare gli alloggiamenti giusti insieme con il setto. Staccare gli elettrodi RA e RV dal miocardio mediante dissezione sia tagliente e smussata. Solitamente le punte dell'elettrodo sono incapsulate dai tessuti fibrosi e del miocardio. Tagliare i tessuti circostanti dal cuore se necessario.
  8. Passare uno stiletto dritto fino alla punta di ogni piombo attraverso il perno terminale. Estrarre i cavi RV e RA dall'accesso venoso e rimuovere il cavo di LV dal tunnel sottocutaneo. Se la porta non può essere districata a causa di aderenze fibrose, spogliare le aderenze fibrose lungo i cavi con la dissezione smussa.
  9. Tirare delicatamente il cuore e clip attraverso il tessuto del cuore vicino all'aorta per asportare il cuore. Mettere il cuore in un recipiente sterile e risciacquare più volte con soluzione fisiologica. Affettare il miocardio transmurale dalla parete laterale LV per l'analisi istologica.
  10. Difficoltà tessuti miocardici con formalina tamponata, poi disidratare e incorporare in paraffina. Dopo il taglio in sezioni spesse di 5 µm, deparaffinizzare i campioni e macchia con ematossilina ed eosina (lui) e Masson tricromica.
  11. Misurare i diametri cellulari dalle sezioni longitudinali macchiate con lui. CVF si esprime come percentuale dell'area di collagene-macchiato diviso per l'area totale del tessuto in sezioni trichrome-macchiate di Masson. Selezionare e contare cinque campi ad alta potenza (400 x) in modo casuale per ogni sezione. Scattare fotografie digitali e analizzare utilizzando un sistema di analisi di immagine digitale ad alta risoluzione.

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Risultati

LBB riuscita ablazione:

Figura 2 rappresenta un tipico elettrogramma intracardiaco e di superficie nel corso di ablazione del catetere. Il valore medio misurato LBP-V è 18,8 ±2.8 ms, che era minore dell'intervallo di riferimento H-V di circa 10 ms (28,8 ±2.6 ms, p < 0.01). La durata del QRS prolungata da 59,2 ±6.8 ms a 94,2 ±8.6 ms (p < 0,01) dopo ablazione LBB. La perdita dell'...

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Discussione

Cardiomiopatia dilatativa costituisce delle principali cause di CHF, che è caratterizzata da dilatazione ventricolare, disfunzione sistolica con LVEF ridotta e le anomalie di riempimento diastolico11. Poiché la tachicardia cronica-mediata HF è una condizione clinica riconosciuta, cadenza veloce di atrio o ventricolo per almeno 3-4 settimane serve come un modello animale frequentemente usato per indurre CHF11. I cambiamenti emodinamici verificano appena 24 h dopo la cadenza ...

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Dichiarazioni

Gli autori dichiarano di non avere nessun concorrenti interessi finanziari.

Ringraziamenti

Questo lavoro è finanziato dalla Fondazione nazionale di scienze naturali della Cina (81671685) e Commissione di salute di Shanghai e pianificazione familiare (No. 201440538)

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Sistema di catetere endovenoso chiuso (0,9 mm&volte; 25mm)Becton Dickinson Medical5264442Utilizzato come ago di ritenzione venosa
Pentobarbital di sodioSigma-Aldrich Company130205Per anestesia
Pet clipperWuhan Shernbao pet supplies Co., Ltd.PGC-660Per la rasatura dei capelli
ElettrocardiografoShanghai strumento elettronico medico fotoelettrico Co., Ltd.ECG-6511Per la registrazione dell'elettrocardiogramma
EcocardiografoGE-Vingmed Ultrasound CompanyVIVID E9Per la valutazione ecocardiografica
SoftwareEchoPAC GE healthcareVersione201Analisi offline
LaringoscopioShanghai Medical Instrument Co., LtdIntubazione orotracheale
Tubo endotrachealeSIMS Portex Inc, Regno Unito274093Intubazione orotracheale Respiratore
a ciclo volumetricoNewport CorporationC100Ventilazione artificiale
Defibrillatore/monitor HeartStart XLMedical SystemsM4735AMonitor per elettrocardiogramma durante il funzionamento
Tintura di bromuro di benzalconioShanghai Yunjia Pharmaceutical Co., Ltd.H31022694Utilizzato per la disinfezione della pelle
Divaricatore delle costoleShanghai Medical Instrument Co., Ltd.Per la sutura toracotomia
4-0Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LTD.24L1005Sutura dell'elettrodo epicardico LV
2-0/T suturaShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LTD.11M0505Sutura di elettrocateteri di stimolazione, fascia, vasi, ecc.
0-suturaShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LTD.11P0501Polvere di penicillina per sutura
cutanea North China Pharmaceutical Co., Ltd.
Macchina a raggi X F6034105 DSAPhilipsAllura Xper FD10Radiografia per fluoroscopia
Elettrodo di stimolazione LVMedtronic, Inc.LBT 4965
Elettrodo di stimolazione RVSt. Jude MedicalTendril 1888
Elettrodo di stimolazione RASt. Jude MedicalIsoFlex 1642T
Generatore di impulsi per pacemakerMedtronic, Inc.Enpulse E2DR01Per la stimolazione rapida del camper
Generatore di impulsi CRTSt. Jude MedicalAnthem PM 3212Per le prestazioni CRT
Registratore elettrofisiologico multicanaleGE Medical Systems2003232-004Per elettrogramma di superficie e intracardiaco
Modulo di ingresso catetereGE Medical Systems301-00202-08Interruttori multipolari per stimolazione o registrazione
Generatore di radiofrequenzaJohnson-Johnson CompanyST-4460Per l'erogazione di corrente RF
Elettrodo di ritorno senza filiCovidienE7509Per la formazione di circuiti
di corrente Guaina Cordis 6-FrJohnson-Johnson Company504-606XAccesso per catetere di mappatura
Guaina Cordis 7-FrJohnson-Johnson Company504-607XAccesso per catetere di mappatura e ablazione
catetere quadripolare 6-FrJohnson-Johnson CompanyF6QRA005RTCatetere per mappatura
Catetere per ablazione orientabile 7-Fr con punta da 4 mmSt. Jude Medical402823Catetere per mappatura e ablazione
Prucka Cardio-Lab® 2000GE Medical Systems6.9.00.000Pacchetto software per la registrazione dell'elettrogramma
HeparinHaitong Pharmaceutical Co., Ltd160505Anticoagulante durante l'ablazione transcatetere
Sistema digitale di analisi delle immaginiLeica MicrosystemsQwin V3Per analisi istologiche
Philips

Riferimenti

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