Presentiamo un protocollo per utilizzare il Madagascar sibilo scarafaggio come modello alternativo non mammiferi animali fare virulenza batterica, patogenesi, tossicità dei farmaci, l'efficacia dei farmaci e studi di risposta immunitaria innata.
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Articolo metodologico
Il Madagascar sibilo scarafaggio come modello alternativo Non mammiferi animali per studiare la virulenza, patogenesi e l'efficacia dei farmaci
In questo articolo
Sommario
Abstract
Molti aspetti dell'immunità innata sono conservati tra mammiferi e insetti. Un insetto, il Madagascar sibilo scarafaggio dal genere Gromphadorhina, può essere utilizzato come modello animale alternativo per lo studio della virulenza, interazione ospite-patogeno, risposta immunitaria innata e l'efficacia dei farmaci. Dettagli per l'allevamento, cura e allevamento di blatta di sibilo sono forniti. Abbiamo anche illustrare come si può essere infettati con batteri come gli agenti patogeni intracellulari Burkholderia mallei, pseudomallei del b. e b. thailandensis. Uso della blatta di sibilo è poco costoso e risolve problemi normativi a che fare con l'uso dei mammiferi nella ricerca. Inoltre, risultati trovati utilizzando il modello di scarafaggio sibilante sono riproducibili e simili a quelli ottenuti utilizzando modelli mammiferi. Così, la blatta di sibilo del Madagascar rappresenta un host surrogato attraente che dovrebbe essere esplorato lo svolgimento di studi sugli animali.
Introduzione
L'uso degli insetti come alternative non mammiferi di modelli animali per studiare la patogenesi batterica e difesa innata ospite è stato guadagnando slancio negli ultimi anni. Logisticamente, ciò è dovuto il loro costo relativamente economico e la facilità di ottenimento, alla gestione e cura per gli insetti rispetto ai mammiferi. Non c'è anche nessuna politica di regolamentazione che disciplina l'uso degli insetti nella ricerca; non è soggetto alla competenza o limitazioni imposte da qualsiasi animale utilizzano Comitato o agenzia governativa. Gli insetti come modelli animali surrogati sono particolarmente suscettibili agli studi di screening completo per fattori di....
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Protocollo
1. preparati per il mantenimento di una colonia di scarafaggio sibilante
- Preparare le gabbie per gli scarafaggi sibilante a vivere in. Applicare un sottile strato di vaselina, circa 20 a 30 mm di larghezza, alla circonferenza delle pareti interne nella parte superiore della gabbia per evitare i sibilanti scarafaggi da arrampicata fuori dalla gabbia e fuggire.
Nota: Sibilo scarafaggi possa essere alloggiato in una varietà di contenitori che hanno una grande superficie, sono di altezza sufficiente e hanno palpebre. Utilizzare il mouse gabbia (~ 43 x 23 cm x 20 cm). Per le gabbie destinate a 37 ° C, non applicare vaselina. - Includono una scatola di ....
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Risultati
Questa sezione illustra i risultati che sono stati ottenuti quando le blatte di sibilo del Madagascar sono stati infettati con b. mallei, b. pseudomallei, o b. thailandensis; i risultati mostrano che questo insetto è un modello animale trattabile per diverse specie di Burkholderia nello studio della virulenza, tossicità dei farmaci e l'efficacia dei farmaci contro l'infezione batterica. Altri scarafaggi sibilanti è sopravvissuto in gruppi che sono stati infettat.......
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Discussione
Condizioni sperimentali ottimali iniziano con una colonia di scarafaggio sibilante sano, che richiede un minimo ma impegno costante di tempo. Anche se sibilo scarafaggi può andare per un periodo di tempo relativamente lungo (~ settimane) senza cibo e acqua, manutenzione settimanale o bi-settimanale gabbia dovrà essere fornite. Ciò comprende il controllo il cibo e la fornitura di acqua e assicurando che la gabbia sia asciutta. Mantenere le condizioni di vita asciutto è particolarmente importante durante l'acclimatazione e.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
J. Chua, N.A. Fisher, D. DeShaze e A.M. Friedlander progettato le procedure descritte nel manoscritto. J. Chua, N.A. Fisher, S.D. Falcinelli e D. DeShaze eseguito gli esperimenti. J. Chua ha scritto il manoscritto.
Gli autori ringraziano Steven A. Tobery per l'eccellente assistenza tecnica e Joshua J. W. Roan, Nora D. Doyle, David P. Fetterer, Nicholas R. Carter e Steven J. Kern per l'analisi statistica.
Il lavoro è stato supportato dalla Defense minaccia riduzione Agenzia proposta n #CBCALL12-THRB1-1-0270 A.M.F e #CBS. MEDBIO.02.10.Rd.034 a D.D.
Opinioni, interpretazioni, conclusioni ....
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| scarafaggio sibilante del Madagascar | Carolina Biological Supply Co, Burlington, Carolina del Nord | ||
| crocchette e pezzi, qualsiasi gusto | Big Heart Pet Brands, San Francisco, CA | UPC #079100519378 | |
| Aggancia contenitori di plastica usa e getta o equivalenti | Rubbermaid, Huntersville, NC | UPC #FG7F71RETCHIL | |
| Avvita su contenitori di plastica usa e getta o equivalenti | Rubbermaid, Huntersville, NC | UPC #FG7J0000TCHIL | |
| Tridak serie STEPPER ripetitivo pipetta | Dymax Corporation www.dymax.com | Siringa T15469 | |
| (1 mL) | Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ | 309659 | |
| Ago (26 o 27G x 1/2) | Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ | 305109, 305111 | |
| Clorochina difosfato | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO | C6628 | |
| Soluzione salina tamponata con fosfato | Gibco/ Thermo Fisher Scientific, Gaithersburg, MD | 10010023 | |
| Difco Luria- Bertani (Lennox) | Becton Dickinson, Scintille, MD | 240230 | |
| Agar | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO | A1296 | |
| Glicerolo | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO | G6279 |
Riferimenti
- Sifri, C. D., Ausubel, F. M. Cellular Microbiology. Boquet, P., Cossart, P., Normark, S., Rappuoli, R. , ASM Press. 543-563 (2004).
- Silcock, S. Is your experiment really necessary? New Sci. 134 (1817), 32-34 (1992).
- Muller, U., Vogel, P., Alber, G., Schaub, G. A.
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Ristampe e permessi
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