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Articolo metodologico

Utilizzando l'analisi filogenetica di indagare l'origine genica negli eucarioti

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DOI:

10.3791/56684

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14 agosto 2018

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* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

È descritto un metodo per costruire un albero filogenetico basato su omologia di sequenza di dolci da eucarioti e SemiSWEETs da procarioti. L'analisi filogenetica è uno strumento utile per spiegare la parentela evolutiva tra proteine omologhe o geni da gruppi di organismi diversi.

Abstract

L'analisi filogenetica utilizza del nucleotide o sequenze aminoacidiche o altri parametri, quali sequenze di dominio e struttura tridimensionale, per costruire un albero per mostrare le relazioni evolutive tra diversi taxa (unità di classificazione) presso il molecolare livello. L'analisi filogenetica può essere utilizzata anche per indagare le relazioni di dominio nell'ambito di un singolo taxon, particolarmente per organismi che hanno subito un sostanziale cambiamento nella morfologia e fisiologia, ma per cui i ricercatori mancano prove fossili a causa della degli organismi lunga storia evolutiva o scarsità di fossilizzazione.

In questo testo, un protocollo dettagliato è descritto con il metodo filogenetico, compreso l'allineamento di sequenza dell'amminoacido usando la costruzione albero filogenetico successive utilizzando entrambi probabilità massima (ML) di genetica molecolare evolutiva e Clustal Omega Analisi (MEGA) e inferenza bayesiana tramite MrBayes. Per indagare l'origine di geni eucariotici Zuccheri sarà alla fine essere esportati i trasportatori (dolce), 228 dolci tra cui 35 dolce da eucarioti unicellulari e semidolce 57 proteine da procarioti sono stati analizzati. Interessante, SemiSWEETs sono stati trovati nei procarioti, ma dolci sono stati trovati negli eucarioti. Due alberi filogenetici costruiti utilizzando metodi teoricamente distinti costantemente hanno suggerito che il primo gene eucariotico dolce potrebbe derivano dalla fusione di un gene batterico semidolce e un gene semidolce degli Archaea. Vale la pena notare che uno dovrebbe essere prudente per trarre una conclusione basata esclusivamente sull'analisi filogenetica, anche se è utile spiegare il rapporto sottostante tra taxa diversi, che è difficile o addirittura impossibile discernere attraverso mezzi sperimentali .

Introduzione

Sequenze di DNA o RNA trasportano informazioni genetiche per i fenotipi sottostanti che può essere analizzato attraverso metodi fisiologici e biochimici o osservato attraverso prove morfologiche e fossili. In un certo senso, è più affidabile di valutazione esterni fenotipi perché il primo è la base per quest'ultima informazione genetica. In studio evolutivo, prova fossile è molto diretta e convincente. Tuttavia, molti organismi, quali microrganismi, hanno poche possibilità di formare un fossile durante Età geologiche lungo. Pertanto, informazioni molecolari quali sequenze nucleotidiche e sequenze dell'amminoacido da organismi esistenti correlati sono di valore per esp....

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Protocollo

1. sequenza di allineamento

  1. Raccogliere le sequenze dell'amminoacido di dolce eucariotici e procariotico passato in documenti separati e li elenco in formato FASTA. Scaricare sequenze dal centro nazionale per Biotechnology Information (NCBI), European Molecular Biology Laboratory (EMBL) e la banca dati del DNA dei database Japan (DDBJ) ricerca di similitudine con lo strumento di base locale allineamento Cerca strumento (BLAST).
    1. Nei file d'esempio, raccogliere 228 sequenze della proteina presunta dolce che possiede due domini MtN3/saliva (7 eliche transmembrane) di 57 sequenze di proteine semidolce che possiedono un singolo dominio....

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Risultati

Alberi filogenetici mostrano che tutti i domini di MtN3/saliva primi delle sequenze dolce 35 cluster come un clade e i domini di MtN3/saliva secondo delle sequenze dolce cluster come un altro clade. Inoltre, risultati di allineamento delle dolci e SemiSWEETs mostrano che alcuni SemiSWEETs da α-Proteobacteria allineato con il primo dominio di MtN3/saliva delle sequenze dolce, considerando che SemiSWEETs da Metanobatteri (archaea) allineato con la seconda MtN3/saliva dominio delle sequenze .......

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Discussione

Sta diventando sempre più popolare nella ricerca biologica per fare un albero filogenetico basato su nucleotide o dell'amminoacido sequenze8. In generale, ci sono tre fasi critiche della pratica compreso l'allineamento di sequenza, valutazione delle sequenze allineate con l'algoritmo o il metodo corretto e la visualizzazione del risultato computazionale come un albero filogenetico. Nello studio presentato, sono state condotte tre turni di allineamento di sequenza: in primo luogo, le sequenze di pr.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato supportato da National Natural Science Foundation of China (31371596), centro di ricerca Bio-tecnologia, Università di Cina tre gole (2016KBC04) e la Fondazione di scienze naturali della provincia di Jiangsu, Cina (BK20151424).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Adobe Illustrationuno strumento grafico sviluppato da Adobe Systems Software Ireland Ltd. Copyright © 2017
BioEditun editor di allineamento di sequenze biologiche scritto per Windows 95/98/NT/2000/XP/7. Diritti d'autore e copia; Tom Hall
Clustal Omegaun pacchetto per creare allineamenti multipli di sequenze di amminoacidi o nucleotidi. 
http://www.clustal.org/ CorelDRAWun software di progettazione grafica. Diritti d'autore e copia; 2017 Corel Corporation
FigTree, un visualizzatore grafico di alberi filogenetici progettato dall'Università di Edimburgo
MEGAMolecularEvolutionary Genetics Analysis versione6.0 http://www.megasoftware.net/home
MrBayes,uno strumento di inferenza filogenetica bayesiana
NVIDIAun'azienda progetta unità di elaborazione grafica (GPU) per i mercati dei giochi e professionali. Copyright e copia della società; 2017
PAUPAnalisi filogenetica utilizzando la parsimonia. Il programma di David Swofford implementa il metodo della massima verosimiglianza in una serie di modelli nucleotidici.
Photoshopun editor di grafica raster sviluppato e pubblicato da Adobe Systems Software Ireland Ltd. Copyright © 2017
RHYTHMuna previsione basata sulla conoscenza dei contatti hekix. Caritatevole; Berlino – Protein Formatics Group - Copyright 2007-2009
TMHMMuno strumento per la previsione delle eliche transmembrana nelle proteine. http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/
Compter4 GB di memoria, Core 2 o superiore CPU. Windows 7, Windows 10

Riferimenti

  1. Nei, M., Kumar, S. Molecular Evolution and Phylogenetics. , Oxford University Press. Oxford. (2000).
  2. Foth, B. J. Phylogenetic analysis to uncover organellar origins of nuclear-encoded genes. Methods Mol Biol. 390, 467-488 (2007).
  3. Baldauf, S. L.

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Ristampe e permessi

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