Questo manoscritto descrive l'installazione di romanzo e procedura di una microscopia fotoacustico e il sistema di doppia modalità di tomografia ottica di coerenza per l'imaging non invasivo, privo di etichetta corioretinica di animali più grandi, come i conigli operativa.
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Articolo metodologico
Romanzo fotoacustico microscopia e tomografia a coerenza ottica doppia modalità coroidoretinica Imaging in vita gli occhi dei conigli
In questo articolo
Sommario
Abstract
Fotoacustico oculare imaging è un'emergente oftalmiche tecnologia non invadente può visualizzare tessuto oculare convertendo l'energia luminosa in onde sonore, che è attualmente sotto indagine intensiva di imaging. Tuttavia, la maggior parte segnalati lavoro fino ad oggi si concentra sull'imaging del segmento posteriore degli occhi di piccoli animali, come ratti e topi, che pone sfide per la traduzione clinica umana a causa di dimensioni piccole del bulbo oculare. Questo manoscritto descrive un romanzo fotoacustico microscopia (PAM) e il sistema di doppia modalità tomografia a coerenza ottica per l'imaging di segmento posteriore degli occhi di animali più grandi, come i conigli. La configurazione del sistema, sistema di allineamento, preparazione degli animali e doppia modalità protocolli sperimentali per in vivo, non invasivo, privo di etichetta coroidoretinica imaging in conigli sono dettagliati. L'efficacia del metodo è dimostrato attraverso rappresentante risultati sperimentali, tra cui il sistema vascolare retinico e coroideale, ottenuti da PAM e OCT. Questo manoscritto fornisce una guida pratica per riprodurre i risultati di imaging in conigli e avanzando fotoacustico imaging oculare in animali più grandi.
Introduzione
Ultimi decenni hanno testimoniato lo sviluppo esplosivo del campo di fotoacustico biomedical imaging1,2,3,4,5,6,7 ,8. Basato sulla conversione di energia della luce in suono, l'imaging fotoacustico emergenti può visualizzare campioni biologici a scale da organelli, cellule, tessuti e organi al corpo intero di piccoli animali e può rivelare suo anatomiche, funzionali, molecolari, genetici, e informazioni....
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Protocollo
I conigli sono che un United States Department of Agriculture (USDA) coperto specie. Suo uso nella ricerca biomedica deve seguire regole severe. Tutti coniglio esperimenti sono stati eseguiti in conformità con la dichiarazione di ARVO (associazione per la ricerca in Oftalmologia e la visione) per l'uso degli animali in oftalmica e Vision Research, dopo l'approvazione del protocollo di animali di laboratorio dall'Università Comitato per l'uso e cura degli animali (UCUCA) dell'Università del Michigan (protocollo PRO00006486, PI Yannis Paulus).
1. configurazione del sistema
- Fotoacustico microscopia (PAM)
- Uso un oscillatore pa....
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Risultati
Il sistema di doppia modalità di imaging e protocollo sperimentale sono stati testati con successo in laboratorio degli autori utilizzando quattro conigli bianchi della Nuova Zelanda. Il seguente mette in mostra alcuni risultati rappresentativi.
Figura 1 Mostra lo schema del sistema di imaging doppia modalità PAM e SD-OCT. È composto dai seguenti moduli: fotoacustico luce sorgente, attenuatore varia.......
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Discussione
Un film lacrimale integro e regolare è essenziale per immagini di alta qualità del fondo. Un film di usura irregolare e deteriorato può degradare significativamente immagine qualità42. Per preservare l'integrità del film lacrimale ed evitare corneale keratopathy punctate superficiale, è fondamentale per lubrificare la cornea utilizzando collirio molto frequentemente, ogni due minuti circa. Se ci sono eventuali preoccupazioni per quanto riguarda l'opacità dell'occhio, utilizzare una lampada a fessu.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dal generoso sostegno del 4K12EY022299 National Eye Institute (YMP), lotta per Vista-International retinica Research Foundation FFS GIA16002 (YMP), illimitato supporto dipartimentale dalla ricerca per prevenire la cecità e il Università del Michigan, dipartimento di oftalmologia e scienze visive. Questo lavoro utilizzata il Core Center per visione ricerca finanziata dal P30 EY007003 dal National Eye Institute.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sistema di imaging a doppia modalità | |||
| OPO laser | Ekspla (Vilnius, Lituania) | NT-242 | |
| Attenuatore di fascio | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | AHWP10M-600 | |
| Stadio di rotazione motorizzato | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | PRM1/MZ8 | |
| Controllore | dello stadio di rotazione motorizzatoThorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | TDC001 | |
| Lente di messa a fuoco | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | AC254-250-B | |
| Pinhole | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | P50S | |
| Lente di collimazione | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | AC127-030-B | |
| Fotodiodo | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | PDA36A | |
| Otturatore laser | Vincent Associates Inc. (Toronto, Canada) | LS6S2T0 | |
| Driver per otturatore laser | Vincent Associates Inc. (Toronto, Canada) | VCM-D1 | |
| Specchio dicroico | Semrock, Inc. (Rochester, NY, USA) | Di03-R785-t3-25× 36 | |
| Lente di scansione | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | OCT-LK3-BB | |
| Lente oftalmica | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | AC080-010-B-ML | |
| Trasduttore a ultrasuoni | Optosonic Inc. (Arcadia, CA, USA) | Amplificatore personalizzato | |
| L3 Narda-MITEQ (Hauppauge, NY, USA) | AU-1647 | ||
| Filtro passa-banda | Mini-Circuiti (Brooklyn, NY, Stati Uniti) | BLP-30+ | |
| Digitalizzatore | DynamicSignals LLC (Lockport, IL, USA) | PX1500-4 | |
| Elettronica di sincronizzazione | National Instruments Corporation (Austin, TX, USA) | USB-6353 | |
| Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | Ganimede-II-HR | ||
| Vetro di compensazione della dispersione | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | LSM03DC | |
| Luce LED di illuminazione | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | MCWHF2 | |
| Misuratore di potenza | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | S121C | |
| Interfaccia del misuratore di potenza | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | PM100USB | |
| Strumento di misurazione dell'altezza | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | BHM1 | |
| Fundus camera | Topcon Corporation (Tokyo, Giappone) | TRC 50EX | |
| Matlab | MathWorks (Natick, MA, USA) | 2017a | |
| Oscilloscopio | Teledyne LeCroy (Chestnut Ridge, NY, USA) | WaveJet 354T | |
| Esperimento sugli animali | |||
| Coperta a circolazione d'acqua | Stryker Corporation (Kalamazoo, MI, USA) | TP-700 | |
| Ketamina cloridrato iniezione | Par pharmaceutical, Inc. (Woodcliff Lake, NJ, USA) | Codice NDC 42023-115-10 | |
| Xilazina cloridrato | VetOne (Boise, ID, USA) | Codice NDC 13985-704-10 | |
| Tropicamide oftalmica | Akorn Pharmaceuticals Inc. (Lake Forest, IL, USA) | Codice NDC 17478-102-12 | |
| Fenilefrina cloridrato oftalmico | Paragon BioTeck, Inc. (Portland, OR, USA) | Codice NDC 42702-102-15 | |
| Lubrificante oculare | Hub Pharmaceuticals LLC (Rancho Cucamonga, CA, USA) | Codice NDC 17238-610-15 | |
| Collirio | Altaire Pharmaceuticals, Inc. (Aquebogue, NY, USA) | Codice NDC 59390-175-18 | |
| Soluzione oftalmica di tetracaina cloridrato | Bausch & Lomb, Inc. (Rochester, NY, USA) | Codice NDC 24208-920-64 | |
| Flurbiprofene soluzione oftalmica di sodio | Bausch & Lomb, Inc. (Rochester, NY, USA) | Codice NDC 24208-314-25 | |
| Neomicina e polimixina B Solfato e desametasone Unguento oftalmico | Bausch & Lomb, Inc. (Rochester, NY, USA) | Codice NDC 24208-795-35 | |
| Iniezione di meloxicam | Henry Schein Inc. (Queens, NY, USA) | Codice NDC 11695-6925-1 |
Riferimenti
- Wang, L. V., Hu, S. Photoacoustic tomography: in vivo imaging from organelles to organs. Science. 335 (6075), 1458-1462 (2012).
- Beard, P. Biomedical photoacoustic imaging. Interface Focus. , rsfs20110028 (2011).
- Taruttis, A., Ntziachristos, V.
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Ristampe e permessi
