È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

Articolo metodologico

Un modello murino di ostruzione intestinale parziale

22.4K visualizzazioni

DOI:

10.3791/57381

5 marzo 2018

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Ostruzioni intestinali sono un blocco parziale o totale dell'intestino che può causare dolore addominale, nausea, vomito e impedendo il passaggio delle feci. Questa procedura per la creazione di intestinale parziale ha pilastri in topi è affidabile a studiare i meccanismi alla base di crescita delle cellule patologiche e morte nell'intestino.

Abstract

Ostruzioni intestinali, che ostacolare o bloccano il movimento peristaltico, possono essere causati da aderenze addominali e più gastrointestinale (GI) malattie tra cui escrescenze tumorali. Tuttavia, il cellulare che ritocca meccanismi coinvolti nella, e causato da, ostruzioni intestinali sono capiti male. Sono stati sviluppati diversi modelli animali di ostruzioni intestinali, ma il modello del mouse è più costo/tempo efficace. Il modello del mouse utilizza l'impianto chirurgico di un'ostruzione intestinale parziale (PO) che ha un alto tasso di mortalità se non viene eseguita correttamente. Inoltre, topi che riceve la chirurgia PO non riescono a sviluppare ipertrofia se un adeguato blocco non viene utilizzato o non correttamente inserito. Qui, descriviamo un protocollo dettagliato per la chirurgia di PO che produce ostruzioni intestinali affidabili e riproducibili con un tasso di mortalità molto bassa. Questo protocollo utilizza un anello di silicone chirurgicamente posizionati che circonda l'ileo che blocca parzialmente movimento digestivo nell'intestino tenue. Il blocco parziale rende l'intestino diventa dilatato a causa l'arresto del movimento digestivo. La dilatazione dell'intestino induce l'ipertrofia del muscolo liscio sul lato orale dell'anello che progressivamente si sviluppa più di 2 settimane fino a quando non causa la morte. Il modello di mouse PO chirurgico offre un modello in vivo di ipertrofico tessuto intestinale utile per lo studio delle mutazioni patologiche delle cellule intestinali, compreso le cellule muscolari lisce (SMC), cellule interstiziali di Cajal (ICC), PDGFRα+e di un neurone cellule durante lo sviluppo dell'ostruzione intestinale.

Introduzione

Ostruzioni intestinali sono un blocco parziale o totale nell'intestino piccolo o grande che impedisce il movimento attraverso l' intestino1di cibo digerito, fluidi e gas. Dovuto l'ostruzione, il blocco induce le pareti intestinali per diventare ispessito, restringimento del lume2. Ostruzione intestinale può verificarsi a seguito di interventi chirurgici addominali o pelvici che causano la formazione di tessuto di aderenze addominali o da disturbi GI quali diverticolite, volvolo, Ernie, malattie infiammatorie croniche intestinali (morbo di Crohn), stenosi, invaginazione intestinale, stipsi, fecaloma, pseudo-ostruzione, ca....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Protocollo

Il seguente protocollo è stato approvato dal istituzionale Animal Care e utilizzare Committee (IACUC) presso l'Università del Nevada-Reno (UNR) animale risorse ed è conforme a tutti gli orientamenti etici istituzionali per quanto riguarda l'uso di animali di ricerca.

1. gli animali.

  1. Ottenere topi C57BL/6 maturo (4-6 settimane) peso compreso tra 20-30 g. House la colonia di topi di laboratorio in una struttura centralizzata animale alle risorse animali UNR.

2. parziale ostruzione chirurgia

Nota: Interventi sono eseguiti in una sala dedicata alle procedure chirurgiche. Tutt....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Risultati

L'ostruzione parziale (PO) è stata chirurgicamente indotta nei topi un mesi di vita inserendo un anello di silicone intorno l'ileo vicino allo sfintere ileocecale. Questo anello creato un blocco parziale nell'ileo. Le operazioni di intervento Sham (modo) inoltre sono stati effettuati senza un anello sul età/sesso abbinato topi e questi topi non hanno mostrato sintomi simili a quelli trovati nei topi del PO. Topi, rapidamente recupero da un intervento chirurgico PO entro poche ore. Essi no.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Discussione

Abbiamo dimostrato che i topi che ricevono la chirurgia intestinale PO costantemente e riproducibile sviluppano ipertrofia della muscolatura liscia intestinale, che imita l'ostruzione intestinale umano. Ambulatori di ostruzione intestinale sono stati sviluppati per i diversi animali, tra cui7di topi, ratti10, cavie11, cane12 e gatti13. Il modello del mouse dell'ostruzione intestinale ha tempo, costo, di.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori vorrei ringraziare Benjamin J Weigler, D.V.M., pH.d. e Walt Mandeville, D.V.M (risorse animali & Campus frequentando veterinario, University of Nevada, Reno) per i loro servizi animale eccellente fornito per i topi, come pure la loro consiglio su procedure chirurgiche.

....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Telo chirurgicoForniture mediche e veterinarieSMS4040" X100 iarde
Underpad, econ, pro plusForniture mediche e veterinarieMSC28122417x24"
Forbici per irideBraintree scientific, IncSC-i-130
Forbici per irideVantageV95-304
Pinzette elettroniche e per gioiellieri Dumont98-180-3
Sutura riassorbibile intrecciataCovidien polisorbSL-5687G5-0, poliglactin
Nylon monofilamento non assorbibileAD chirurgicoS-N618R136-0, nylon
Lama chirurgicaDynarexNo.15
Porta aghiJacobson microvascolare36-1342TC8,5 pollici
Manico per bisturiFlinn scientificAB1049
Forbice microchirurgicaWPI503305
Unguento oftalmico PetrolatumPuralube VET3,5 g
Fluriso (isoflurano)VetoneV1 502017250 ml
Steri-strip chiusura pelle rinforzata3MR1547
Guanti chirurgiciMedlineMSG2270
Maschera facciale ad anello per le orecchieLa zona di sicurezzaRS700
Avant garza spugne non tessute CaringPRM25444
Tazza chirurgicaAdmiral  craft OYC-2725-A422,5 once
di SwabstickChloraPrep2601032% con clorexidina  Gluconato (CHG) e 70% v/v alcool isopropilico (IPA)Applicatore
punta in cotonePuritan806-WC
BuprenorfinaZoo pharmBZ80693171 mg/ml
Gentamicina solfatoVetoneG-6336-04100 mg/ml
Crema gel ad azione rapidaVeet8111002
SiringaAHSAH01T25161 ml con ago
Anello in siliconeVWR60985-720mm di lunghezza, diametro esterno 4 mm, diametro interno 3,5 mm
Topi C57BL/6The Jackson Laboratory4-6 settimane
con 6

Riferimenti

  1. Millat, B., Guillon, F. Physiopathology and principles of intensive care in intestinal obstructions. Rev Prat. 43, 667-672 (1993).
  2. Tonelli, P.

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Ristampe e permessi

Tag

Impianto di anello di siliconeipertrofia del muscolo lisciocellule interstiziali di Cajalcellule PDGFR alfaanalisi del tessuto gastrointestinaleprotocollo di procedura chirurgicamodello in vivorimodellamento cellulare