Qui, presentiamo un protocollo di costrizione trasversale aortica (TAC) tramite un thoracotomy laterale. Questa tecnica è una procedura chirurgica mini-invasiva, chiuso il petto con l'obiettivo di simulare sovraccarico pressorio e insufficienza cardiaca nei topi utilizzando le impostazioni standard di Laboratorio TAC.
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Articolo metodologico
Un modello chiuso-cassa per indurre costrizione trasversale aortica in topi
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Ricerca sull'ipertrofia cardiaca e scompenso cardiaco spesso si basa su modelli murini di sovraccarico pressione indotte dalla TAC. La procedura standard consiste nell'eseguire un thoracotomy parziale per visualizzare l'arco aortico trasversale. Tuttavia, il trauma chirurgico causato dal thoracotomy aperto petto modelli cambia la fisiologia respiratoria come le costole sono sezionate e lasciare scollegate dopo chiusura sul petto. Per evitare questo, abbiamo stabilito un approccio minimamente invasivo, chiuso il petto via il thoracotomy laterale. Qui ci avviciniamo l'arco aortico tramite lo spazio intercostale 2nd senza entrare nella cavità toracica, lasciando il mouse con una lesione meno traumatica per recuperare da. Eseguiamo questa operazione utilizzando le impostazioni standard del laboratorio per le procedure di petto aperto TAC con tassi di sopravvivenza uguale. Oltre a mantenere la fisiologica respirazione grazie all'approccio di cassa chiusa, i topi sembrano trarre giovamento mostrando rapido recupero, come la tecnica meno invasiva appare per facilitare un rapido processo di guarigione e di ridurre la risposta immunitaria dopo il trauma.
Introduzione
Modelli murini sono spesso utilizzati per simulare malattie umane1. Restringimento aortico trasversa (TAC) viene utilizzato per indurre sovraccarico pressorio e ipertrofia ventricolare sinistra2. Il modello di TAC del aperto petto nei topi è stato convalidato da Rockman et al. 3 e la procedura chirurgica è descritta in dettaglio da DeAlmeida et al. 4. Banding dell'aorta trasversa è più favorevole rispetto al restringimento aortico addominale perché una porzione maggiore della circolazione in grado di compensare gli effetti negativi di questo di quest'ultim....
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Protocollo
Questo protocollo è stato approvato dal comitato etico per la sperimentazione animale LANUV Recklinghausen (n. 84-02.04.2016.A374). Generalmente, questa procedura è eseguita su topi adulti > 10 settimane dell'età. Tuttavia, è possibile eseguire questo intervento chirurgico su anche gli animali più giovani. Strumenti chirurgici devono essere sterilizzati prima dell'uso e tutti i passaggi devono essere eseguiti in condizioni asettiche.
1. induzione dell'anestesia e l'intubazione
- Iniettare buprenorfina 0,1 µ g/g di peso corporeo per via intraperitoneale per sollievo dal dolore. Ripetere le iniezioni intraperitoneali di buprenorfina 0....
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Risultati
Un TAC successo garantisce l'induzione di sovraccarico di pressione e l'ipertrofia ventricolare sinistra. Una validazione ad hoc di sovraccarico di pressione può essere raggiunto utilizzando la misura della velocità di flusso di Doppler come mostrato nella Figura 2. Mentre la velocità del flusso sanguigno preoperatoria è uguale in entrambe le arterie carotiche, TAC provoca una velocità aumentata di sangue nell'arteria carotica di destra a causa della elevata .......
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Discussione
La rapida comparsa di ipertensione dovuto TAC differisce dall'ipertrofia clinicamente rilevante causato da stenosi aortica o ipertensione. Tuttavia, l'uso di piccoli modelli animali per indurre insufficienza cardiaca ha molti vantaggi ed è, pertanto, scelto da molti investigatori11. Questo modello di petto chiuso migliora i modelli già esistenti della tecnica chirurgica per indurre costrizione trasversale aortica in topi4.
La fase più critica è i.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Ringraziamo Stilla Frede e Susanne Schulz per loro assistenza tecnica. Questo studio ha ricevuto alcun finanziamento.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Catetere a pressione-volume | Millar Instruments, USA | SPR-839 | |
| Ventilatore per topi | Harvard Apparatus GmbH, Germania | Minivent - TYPE 845 | |
| Ventilatore per topi | Harvard Apparatus GmbH, Germania | Connessione a Y con cannula per intubazione OD 1,2 mm 73-2844 | |
| Vaporizzatore | Drä ger Medical AG&CO. KG, Germania | 19.3 Isofluran-Vaporizzatore (una versione più recente è disponibile con il numero di catalogo D-877-2010) | |
| Microscopio | Leica Microsystems, Germania | MZ 7.5 | |
| Sorgente luminosa | Schott AG, Germania | KL 1500 LCD | |
| 6-0 Prolene | Ethicon, USA | Sutura in polipropilene BV-1 9,3 mm 3/8c | sutura per chirurgia |
| Seraflex | Serag Wiessner, Germania | USP 5/0 schwarz; IC108000 | sutura per costrizione |
| Tavoli operatori a controllo omeoretermico | Harvard Apparatus GmbH, Germania | Typ 872/3 HT con supporto per treppiede e controller omeoretermico Tipo 874; 73-4233 | |
| Sonda rettale flessibile | Harvard Apparatus GmbH, Germania | 1,6 mm OD; 55-7021 | |
| Strumento di visualizzazione del segnale Doppler | Indus Instruments, USA | Stazione di lavoro per l'elaborazione del segnale Doppler (DSWP) con modulo | |
| Pinza intracapsulare Arruga | Altomed, Regno Unito | A5400 | |
| Indus Instruments, USA | Sonda | ||
| Divaricatore per coperchio Jaffe | Altomed, Regno Unito | A3513 |
Riferimenti
- Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods Mol Biol Clifton NJ. 573, 115-137 (2009).
- Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., Izumo, S. Mouse cardiac surg....
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Ristampe e permessi
