In questo articolo, presentiamo un protocollo per indurre lesioni polmonari acute nei suini tramite l'iniezione venosa centrale di acido oleico. Si tratta di un modello animale stabilito per lo studio della sindrome da distress respiratorio (ARDS).
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Articolo metodologico
In questo articolo, presentiamo un protocollo per indurre lesioni polmonari acute nei suini tramite l'iniezione venosa centrale di acido oleico. Si tratta di un modello animale stabilito per lo studio della sindrome da distress respiratorio (ARDS).
La sindrome da distress respiratorio acuta è una malattia di rilevanti intensiva con un'incidenza compresa tra 2,2% e 19% dei pazienti di terapia intensiva. Nonostante i progressi del trattamento negli ultimi decenni, ARDS pazienti soffrono ancora i tassi di mortalità tra i 35 e 40%. C'è ancora una necessità di ulteriori ricerche migliorare l'outcome dei pazienti affetti da ARDS. Un problema è che nessun singolo modello animale può imitare il pathomechanism complesso della sindrome da distress respiratorio, ma esistono diversi modelli per studiare le diverse parti di esso. Iniezione di acido oleico (OAI)-ferita indotta del polmone è una modella ben affermata per studiare strategie di ventilazione, distribuzione di meccanica e ventilazione/perfusione polmonare negli animali. OAI conduce allo scambio di gas gravemente compromessa, deterioramento della meccanica polmonare e rottura della barriera alveolo-capillare. Lo svantaggio di questo modello è la controversa rilevanza meccanicistica di questo modello e la necessità di accesso venoso centrale, che è una sfida soprattutto in modelli animali più piccoli. In sintesi, OAI-indotta del polmone ferita conduce a risultati riproducibili in piccoli e grandi animali e quindi rappresenta un modello particolarmente adatto per lo studio di ARDS. Tuttavia, ulteriore ricerca è necessaria per trovare un modello che imita tutte le parti di ARDS e manca i problemi associati con i diversi modelli esistenti oggi.
La sindrome da distress respiratorio (ARDS) è una sindrome di cure intensive che è stato ampiamente studiata dalla relativa prima descrizione circa 50 anni fa1. Questo corpo di ricerca hanno portato a una migliore comprensione della patofisiologia e provoca lo sviluppo di ARDS conseguente migliore cura del paziente e risultato2,3. Tuttavia, la mortalità nei pazienti affetti da ARDS rimane molto alta con circa 35-40%4,5,6. Il fatto che circa il 10% dei ricoveri di ICU e il 23% dei pazienti di ICU che richiedono la ventilazione meccanica è a causa di ARDS sottolinea la rilevanza per ulteriori ricerche in questo campo.
Modelli animali sono ampiamente utilizzati nella ricerca per esaminare i cambiamenti patofisiologici e potenziali modalità di trattamento per i diversi tipi di malattie. A causa della complessità di ARDS, non esiste nessun singolo modello animale di imitare questa malattia, ma diversi modelli che rappresentano diversi aspetti7. Un modello ben consolidato è iniezione di acido oleico (OAI)-ha indotto la lesione del polmone. Questo modello è stato utilizzato in una vasta gamma di animali, tra cui topi8, ratti9, maiali10, cani11e pecore12. L'acido oleico è un acido grasso insaturo e l'acido grasso più comune nel corpo di esseri umani sani13. È presente nel plasma, le membrane cellulari e del tessuto adiposo umano13. Fisiologicamente, è associato all'albumina mentre è trasportato attraverso il flusso sanguigno13. Aumento dei livelli di acidi grassi nel sangue è associati con diverse patologie e la gravità di alcune malattie correla con livelli di siero acido grasso13. L'acido oleico ARDS-modello è stato sviluppato nel tentativo di riprodurre ARDS causato da embolia lipidica, come si è visto in pazienti di trauma14. L'acido oleico ha effetti diretti su recettori immuni innati nel polmoni13 e trigger l'accumulazione del neutrofilo15, mediatore infiammatorio produzione16e delle cellule morte13. Fisiologicamente, acido oleico induce velocemente di progressione ipossiemia, aumento della pressione arteriosa polmonare e l'accumulo di acqua polmonare extravascolare. Inoltre, induce ipotensione arteriosa e depressione del miocardio7. Gli svantaggi di questo modello sono la necessità di accesso venoso centrale, la dubbia rilevanza meccanicistica e il potenziale progresso letale causata da rapida ipossiemia e depressione cardiaca. Il vantaggio di questo modello rispetto ad altri modelli è l'usabilità in piccoli e grandi animali, la riproducibilità valido dei meccanismi fisiopatologici in ARDS, l'inizio acuto di ARDS dopo l'iniezione di acido oleico, e la possibilità di studiare isolato ARDS senza infiammazione sistemica come molti altri sepsi modelli7. Nel seguente articolo, diamo una descrizione dettagliata della ferita polmonare indotta da acido oleico nei suini e fornire dati rappresentativi per caratterizzare la stabilità dei compromessi nella funzione polmonare. Esistono diversi protocolli per la ferita di polmone OAI-indotta. Il protocollo fornito qui è in grado di indurre in modo affidabile il danno polmonare acuto.
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Tutti gli esperimenti sugli animali descritti qui sono stati approvati dal Comitato istituzionale e statale cura degli animali (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Coblenza, Germania; numero di omologazione G14-1-077) e sono stati condotti in conformità con le linee guida della Società europea e tedesca delle scienze animali di laboratorio. Gli esperimenti sono stati condotti in suini maschi anestetizzati (sus scrofa domestica) di età 2-3 mesi, peso kg 27-29.
1. anestesia, l'intubazione e ventilazione meccanica
2. Strumentazione
3. ultraveloce misurazione della pressione parziale dell'ossigeno (pO2)
Nota: La misurazione della pO2 con la sonda per ultraveloce pO2-misurazione non è obbligatorio ma aiuta a visualizzare le modifiche in tempo reale a pO2.
4. INSERIMENTO DEL CATETERE DELL'ARTERIA POLMONARE
5. l'induzione di danno polmonare
6. fine dell'esperimento e l'eutanasia
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PaO2stato2-rapporto diminuisce dopo l'applicazione frazionata di acido oleico (Figura 1). Nello studio presentato, 0,185 ± 0,01 ml kg-1 acido oleico era necessaria per l'induzione di danno polmonare. Tutti gli animali hanno mostrato un'alterata ossigenazione dopo l'induzione di danno polmonare, con varietà nel tempo ulteriore corso. In animale 1 e 3, è rimasto a un livello con piccole fluttuazioni; in animali 2, si osserva un ...
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In questo articolo viene descritto un metodo della lesione di polmone indotta da acido oleico come modello per studiare i vari aspetti della ARDS grave. Ci sono anche altri protocolli con emulsioni differenti, differenti siti di iniezione e diverse temperature dell'emulsione23,24,25,26,27,28 ,29<...
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Tutti gli autori non divulgare alcun conflitto di interessi finanziario o di qualsiasi altra.
Gli autori vogliono ringraziare Dagmar Dirvonskis per il supporto tecnico eccellente.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Rubinetto a 3 vie blu | Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Svezia | 394602 | |
| rubinetto a 3 vie rosso | Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Svezia | 394605 | |
| Atracurium | Hikma Pharma GmbH , Martinsried | 4262659 | |
| Canula 20 G | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna | 301300 | |
| Datex Ohmeda S5 | GE Healthcare Finland Oy, Helsinki, Finlandia | ||
| Disinfezione | Schü lke & Mayr GmbH, Germania | 104802 | |
| Tubo endotracheale | Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malesia | 112482 | |
| Introduttore per tubo endotracheale | Rü sch | 5033062 | |
| Engströ m Carestation | GE Heathcare, Madison USA | ||
| Fentanyl | Janssen-Cilag GmbH, Neuss | ||
| Gloves | Paul Hartmann, Germania | 9422131 | |
| Incetomat-line 150 cm | Fresenius, Kabi Germany GmbH | 9004112 | |
| Ketamine | Hameln Pharmaceuticals GmbH | ||
| Laringoscopio | Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malesia | 671067-000020 | |
| Sistema di monitoraggio della pressione logica | Smith- Medical Germany GmbH | MX9606 | |
| Logicath 7 Fr 3-lumen 30cm | Smith- Medical Germany GmbH | MXA233x30x70-E | |
| Masimo Radical 7 | Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USA | ||
| Maschera per cani ventilanti | Henry Schein, Germania | 730-246 | |
| Neofox Kit | Ocean optics Largo, FL USA | NEOFOX-KIT-PROBE | |
| Noradrenalina | Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH | 73016 | |
| Acido oleico | Applichem GmbH Darmstadt, Germania | 1.426.591.611 | |
| Siringa originale Perfusor 50ml Luer Lock | B.Braun Melsungen AG, Germania | 8728810F | |
| PA-Katheter Swan Ganz 7,5 Fr 110cm | Edwards Lifesciences LLC, Irvine CA, USA | 744F75 | |
| Set introduttore per guaina percutanea 8,5 e 9 Fr, 10 cm con valvola per emostasi integrata/porta laterale | Arrow international inc. Reading, PA, USA | AK-07903 | |
| Perfusore FM Braun | B.Braun Melsungen AG, Germania | 8713820 | |
| Cloruro di potassio | Fresenius, Kabi Germany GmbH | 6178549 | |
| Propofol 2% | Fresenius, Kabi Germany GmbH | ||
| Saline | B.Braun Melsungen AG, Germania | ||
| Sonosite Micromaxx Ultrasoundsystem | Sonosite Bothell, WA, USA | ||
| Acciaio inossidabile Macintosh Taglia 4 | Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malesia | 670000 | |
| Sterofundin | B.Braun Melsungen AG, Germania | ||
| Stresnil 40mg/ml | Lilly Germany GmbH, Abteilung Elanco Siringa per la salute | ||
| 10 mL | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna | 309110 | |
| Siringa 2 mL | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna | 300928 | |
| Siringa 20 mL | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna | 300296 | |
| Siringa 5 mL | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna | 309050 | |
| catetere venoso 22G | B.Braun Melsungen AG, Germania | 4269110S-01 |
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