Qui, presentiamo un protocollo di colorazione elastica per identificare le fibre elastiche nei tessuti del cancro gastrico pT300M0 su sezioni di cancro in formalina e incorporate in paraffina. Successivamente, descriviamo un metodo per determinare se le cellule tumorali invadono oltre la lamina elastica.
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Articolo metodologico
Colorazione elastica su vetrini di tessuto gastrico pT3N0M0 gastrico
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
La lamina elastica, che di solito si trova nello strato sub-mesoteliale, adiacente alle cellule mesoteliali peritoneo, è anfifila sulla colorazione ematossia ed eosina (H&E), ma può essere visualizzata attraverso la colorazione elastica. Uno dei vantaggi importanti della colorazione elastica è che rende facile determinare se le cellule tumorali hanno invaso oltre la lamina elastica. Questo aiuta a esaminare l'estensione dell'invasione superficiale peritoneale, distinguendo così gli stadi pT3 e pT4 nel cancro gastrointestinale. In questo studio, presentiamo un protocollo per identificare le fibre elastiche nelle sezioni del tessuto del cancro gastrico pT3N0M0 fissato in formalina e incorporato in paraffina. Prepariamo sezioni di paraffina di 5-m fissate su vetrini, e poi tutti i vetrini vengono deparaffinati e reidratati durante la procedura di colorazione. Successivamente, tutte le sezioni sono ossidati da permanganato di potassio, sbiancate dall'acido osalico, macchiate da macchie elastiche e contrastate da Van Gieson. Infine, esaminiamo l'effetto della colorazione; la mina elastica è macchiata di blu-nero e le fibre di collagene sono colorate di rosso, mentre le cellule tumorali sono macchiate in varie tonalità di giallo. Descriviamo in dettaglio anche i metodi utilizzati per determinare la relazione posizionale tra le cellule tumorali e la lamina elastica. Questo metodo è semplice, a basso costo, e ampiamente applicabile nell'identificazione dell'invasione superficiale di superficie nel cancro gastrointestinale a causa della sua eccezionale selettività per fibre elastiche e risultati autentici.
Introduzione
Secondo il sistema di staging per tumore, nodo e metastasi (TNM), la prognosi del cancro gastrico allo stadio patologico pT4 è significativamente peggiore di quella di pT3 (8a UICC/AJCC)1. Con il cancro gastrico, la classificazione del tumore primario (pT) di solito dipende dalla profondità dell'invasione del tumore2. Lo stadio patologico per il cancro gastrico pT3 è definito come cancro gastrico che invade attraverso il muscolosi in tessuti sottosrosali, mentre il cancro gastrico pT4 è definito come cancro penetrante sulla superficie del peritoneo viscerale. La presenza dell'invasività superficiale della superf....
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Protocollo
Tra il 1994 e il 2005, campioni di pazienti sono stati selezionati da due patologi gastrointestinali esperti presso l'Affiliated Cancer Hospital della Xiangya School of Medicine, Università Del Sud Centrale, da pazienti affetti da gastrectomia di neolasmi dello stomaco, con diagnosi patologica postoperatoria del cancro gastrico nella fase pT3N0M0 (secondo la settima messa in scena TNM). Questo studio è stato approvato dal comitato di revisione etica.
1. Sezionamento
- Posizionare il blocco di paraffina in un supporto fisso del microtoma a slitta, che può muoversi avanti e indietro attraverso la lama. Regolare l'angolo ottimale tra i....
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Risultati
Una colorazione elastica di successo rivela chiaramente la lamina elastica e le cellule tumorali nel cancro gastrico pT3. Figura 1 - campo a bassa potenza, microscopicamente controllato dopo la colorazione soluzione di elastina, prima della contromacchia di Van Gieson come da parte del protocollo menzionato - mostra la lamina elastica è vicino alle cellule mesotelia sirosae ed è macchiato blu-nero nel forma di filamenti, e c'è ancora una certa distanza tra le.......
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Discussione
Questo metodo qui proposto fornisce un approccio accurato per identificare la lamina elastica sottosrosale. Il metodo può essere utilizzato per valutare se le cellule tumorali hanno invaso la lamina elastica nel cancro gastrico pT3N0M012. La lamina elastica è rossastra nelle sezioni macchiate di H&E, che non potevano essere facilmente distinte dalle fibre di collagene, e altri metodi di diagnosi ausiliaria esistenti, come la citologia e l'immunohistochimica, esercitavano anche un valore diagnostic.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Gli autori ringraziano il sostegno in parte della National Natural Science Foundation (NO.81401902 e NO.81501992) e della Hunan Natural Science Foundation (NO.2017SK2134, NO.2018JJ2238). Il manoscritto è scritto da Guang Lei. L'intero esperimento viene eseguito da Guang Lei e Haiyan Yang. Gli autori ringraziano l'assistenza dei patologi e dei borsisti che seguono i dati dei pazienti.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Kit di colorazione Elastin-Van Gieson | Baso | BA4083B | Utilizzato per la colorazione di fibre elastiche, fibre di collagene e miofibre |
| Mezzo di montaggio Permount TM | MXB Biotechnologies | DAB-0033 | Utilizzato per il montaggio |
| dell'etanolo | LMAI Bio | LM64-17-5 | 100% |
| Xilene | LMAI Bio |
Riferimenti
- Jiang, C. G., et al. Clinicopathologic characteristics and prognosis of gastric cancer invading the subserosa. Journal of Surgical Oncology. 102 (7), 737-741 (2010).
- Amin, M. B., et al. AJCC Cancer Staging Manual. 8th ed. , Springer. New York, NY. (2017). <....
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Ristampe e permessi
