Liposomi antigenici per la generazione di anticorpi specifici per la malattia

Kyle J. Bednar; Lakeya Hardy; Johanna Smeekens; Dharmendra Raghuwanshi; Shiteng Duan; Mike D. Kulis; Matthew S. Macauley

doi:10.3791/58285

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Articolo metodologico

Liposomi antigenici per la generazione di anticorpi specifici per la malattia

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DOI:

10.3791/58285

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25 ottobre 2018

Kyle J. Bednar^*¹ , Lakeya Hardy^*²^,³ , Johanna Smeekens^*³^,⁴ , Dharmendra Raghuwanshi⁵ , Shiteng Duan⁶ , Mike D. Kulis³^,⁴ , Matthew S. Macauley⁵^,⁷

¹Janssen R&D, ²Department of Microbiology and Immunology, University of North Carolina, ³UNC Food Allergy Initiative, University of North Carolina, ⁴Department of Pediatrics, University of North Carolina, ⁵Department of Chemistry, University of Alberta, ⁶Department of Molecular Medicine, Scripps Research Institute, ⁷Department of Medical Microbiology and Immunology, University of Alberta

^* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Descritto è la preparazione di nanoparticelle liposomiale antigeniche e loro uso nella stimolante della B-cellula attivazione in vitro e in vivo. Risposte anticorpali coerente e stabile ha condotto allo sviluppo di un nuovo modello di allergia dell'arachide. Il protocollo per la generazione di liposomi antigenici può essere estesa a diversi antigeni e modelli di immunizzazione.

Abstract

Risposte anticorpali forniscono immunità protettiva critico per una vasta gamma di agenti patogeni. Ci rimane un elevato interesse nel generare anticorpi robusti per la vaccinazione così come capire come patogeno anticorpo risposte sviluppano allergie e malattie autoimmuni. Non è banale generando risposte robusto dell'anticorpo antigene-specifiche. In modelli murini, spesso richiede più cicli di vaccinazioni con adiuvante che conduce ad una grande quantità di variabilità dei livelli di anticorpi indotti. Un esempio è in modelli murini di allergie arachidi dove modelli più robusti e riproducibile che riducono al minimo i numeri del mouse e l'uso dell'adiuvante sarebbe vantaggioso. Presentato qui è un modello murino altamente riproducibili di anafilassi allergia dell'arachide. Questo nuovo modello si basa su due fattori chiave: (1) antigene-specifici splenocytes passivamente vengono trasferiti da un mouse di arachidi-sensibilizzati in un ingenuo destinatario mouse, normalizzare il numero di memoria antigene-specifiche cellule di B e di T attraverso un gran numero di topi; e (2) destinatari topi sono successivamente potenziati con un forte immunogen multivalenti sotto forma di nanoparticelle liposomiale visualizzati l'allergene principale dell'arachide (Ara h 2). Il principale vantaggio di questo modello è la sua riproducibilità, che in ultima analisi, riduce il numero di animali utilizzati in ogni studio, riducendo al minimo il numero di animali che ricevono iniezioni multiple di adiuvante. L'assemblaggio modulare di questi liposomi immunogenici fornisce relativamente facile adattabilità ad altri modelli allergiche o autoimmuni che coinvolgono gli anticorpi patogeni.

Introduzione

Allergia alimentare colpisce l'8% dei bambini negli Stati Uniti e ha aumentato in prevalenza negli ultimi dieci anni¹. Allergia alle arachidi colpisce l'1% dei bambini e non è in genere sovrasviluppata². Anche se parecchi test clinici promettenti sono in corso per il trattamento di allergia alimentare, tra cui l'immunoterapia orale (OIT), l'immunoterapia sublinguale (SLIT) e immunoterapia epicutaneous (EPIT), non ci sono attualmente senza strategie di trattamento approvato dalla FDA per desensibilizzazione individui allergici arachidi³^,⁴^,