Articolo metodologico

Una tecnica di occlusione dell'arteria cerebrale media per indurre la depressione post-ictus nei ratti

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DOI:

10.3791/58875

22 maggio 2019

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Sommario

Qui presentiamo un protocollo per indurre la depressione post-ictus nei ratti, occludendo l'arteria cerebrale centrale attraverso l'arteria carotide interna. Usiamo il test di nuoto forzato Porsolt e il test di preferenza del saccarosio per confermare e valutare gli Stati d'animo depressivi indotti.

Abstract

La depressione post-ictus (PSD) è la più ricorrente di tutte le complicazioni psichiatriche risultanti da un ictus ischemico. Una maggioranza maggiore (circa 60%) di tutti i pazienti affetti da ictus ischemico soffrono di PSD, un disturbo considerato un precursore ischemico correlato al colpo per aumentare la morte e la degradazione in salute. La patofisiologia della PSD è ancora oscura. Per studiare il meccanismo di sviluppo e l'occorrenza di PSD ulteriormente, e per scoprire una terapia, abbiamo tentato di sviluppare un nuovo protocollo che richiede occludendo l'arteria cerebrale centrale (MCA) attraverso l'arteria carotide interna (ICA) nei ratti. Questo protocollo descrive un modello di PSD indotto nei ratti attraverso l'occlusione dell'arteria cerebrale centrale (MCAO). Utilizzati anche nell'esperimento sono il test di nuoto forzato Porsolt e il test di preferenza di saccarosio per confermare e valutare l'umore depressivo dei ratti sotto inchiesta. Invece di inserire il catetere attraverso l'arteria carotide esterna (ECA), come previsto per la procedura originaria, questa tecnica MCAO ha il monofilamento che passa direttamente attraverso l'ICA. Questa tecnica MCAO è stata sviluppata pochi anni fa e porta ad una riduzione della mortalità e della variabilità. È generalmente accettato che i criteri utilizzati siano preferenziali nella selezione dei modelli biologici. I dati ottenuti con questo protocollo dimostrano che questo modello di MCAO potrebbe essere un modo per indurre PSD nei ratti e potrebbe potenzialmente portare alla comprensione della fisiopatologia e del futuro sviluppo di nuovi farmaci e altri agenti neuroprotettivi.

Introduzione

L'ictus è quarto nell'elenco delle malattie perpetrare la morte negli Stati Uniti1,2,3, mentre provoca la maggior parte delle disabilità negli adulti nei paesi sviluppati4; Questo rende il colpo un contendente leader tra i problemi di salute più significativi del mondo. La normalità nei pazienti colpiti da ictus è rara, con circa il 15%-40% delle vittime di sopravvivenza che soffrono di invalidità permanente, il 20% che richiede cure istituzionali 3 mesi dopo l'inizio della corsa5, e circa un terzo dei sopravvissuti di 6 mesi ch....

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Protocollo

Il Comitato per la cura degli animali dell'Università Ben-Gurion del Negev, Israele ha approvato tutte le procedure di trattamento e di prova utilizzate in questo protocollo.

1. preparazione dei ratti per la procedura sperimentale

Nota: Selezionare maschi adulti Sprague-Dawley ratti di peso 300-350 g.

  1. Casa i ratti, quattro per gabbia, in un Vivarium a 22 ° c e 40% di umidità, con un invertito 12 h ciclo chiaro/scuro (luci off a 8:00 a.m.) e accesso illimitato al cibo e acqua.
  2. Assegna casualmente i ratti a due gruppi, vale a dire un gruppo MCAO (n = 24) e un gruppo Sha....

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Risultati

I risultati istologici (tabella 1) hanno rivelato un volume di infarto statisticamente significativo come percentuale del cervello totale (p < 0,0001) post-MCAO rispetto agli animali del gruppo Sham-Control. Anche riferito è stato un edema cerebrale statisticamente significativo quando la valutazione dal gruppo sperimentale (p < 0,0003) è stato messo fianco a fianco con quello del gruppo Sham-controllo.

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Discussione

Uno dei modi in cui la tecnica MCAO qui presentata potrebbe essere ritenuta più sicura rispetto al modello originale MCAO è illustrata dal fatto che la Corte dei conti e le sue filiali, tra cui l'arteria occipitale, la lingua terminale e l'arteria mascellare, non sono compromesse Quando si occludere l'MCA tramite l'ICA. L'offset originale del modello MCAO della ECA (e delle sue filiali), dissezione e coagulando distalmente i46, provoca la masticazione compromessa, a causa di un compromesso con l'a.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Ringraziamo il professor Olena Severynovska del dipartimento di fisiologia, facoltà di biologia, ecologia e medicina, Oles Honchar Dnipro University, Dnipro, Ucraina per il suo sostegno e utili contributi alle nostre discussioni. I dati ottenuti fanno parte della tesi di dottorato di R.K..

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Tampone assorbente---
Scatola in perspex nero senza lucentezza-(120 cm & volte; 60 cm & volte; 60 cm), divisa in una zona centrale del 25% e nella zona di confine circostante
BottiglieTechniplastACBT0262SUbottiglie da 150 ml riempite con 100 ml di acqua e 100 ml di soluzione di saccarosio all'1% (p/v)
ElectricShock Heat System Ultasonic Inc.--
Horizon-XLMennen Medical Ltd
Imaging SystemKodak-Perl'imaging e la quantificazione
Monofilamento---
Asciugamani di cartaFarmacia-Asciugamaniasciutti utilizzati per mantenere asciutti i ratti dopo averli immersi in acqua
Cilindro Pexiglass--un cilindro alto 100 cm e di diametro 40 cm utilizzato per l'esecuzione del test di nuoto forzato
Purina ChowPurina5001Il cibo da laboratorio per roditori somministrato a ratti, topi e criceti è un alimento del ciclo di vita che è stato utilizzato nella ricerca biomedica per oltre 5 decenni. Fornito ai ratti ad libitum in questo esperimento
Gabbie per rattiTechniplast2000PAlloggiamento convenzionale per roditori. È stato utilizzato per alloggiare i ratti durante l'esperimento
Scanner Canon CanoScan4200F-Videocamera
ETHO-VISION (Noldus)-Videocamera digitale per la registrazione ad alta definizione del comportamento dei ratti in test in campo aperto

Riferimenti

  1. Miniño, A. M., Murphy, S. L., Xu, J., Kochanek, K. D. Deaths: final data for 2008. National Vital Statistics Reports. 59 (10), 1-126 (2011).
  2. Roger, V. L., et al. Executive summary: Heart disease and stroke statistics-2012 update: a report from....

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Formal Correction: Erratum: A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats
Posted by JoVE Editors on 2/07/2022. Citeable Link.

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Dmitri Frank

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Dmitry Frank

Tag

Modello di rattoTest del nuoto forzato di PorsoltTest di preferenza per il saccarosioMisurazione del volume dell infartoPunteggio di gravit neurologicaAnalisi dell edema cerebraleAnalisi istologicaArteria carotide interna

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