Articolo metodologico

Un protocollo per la terapia di fotobiomodulazione Transcranial in topi

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DOI:

10.3791/59076

18 novembre 2018

In questo articolo

Sommario

Terapia di fotobiomodulazione è un'innovativa modalità non invasiva per il trattamento di una vasta gamma di disturbi neurologici e psichiatrici e può anche migliorare la funzione cerebrale sano. Questo protocollo include una guida dettagliata all'esecuzione fotobiomodulazione cervello nei topi di transcranial luce consegna, che può essere adattato per l'uso in altri roditori di laboratorio.

Abstract

Fotobiomodulazione transcranial è un potenziale approccio terapeutico non invasivo innovativo per migliorare la bioenergetica cerebrale, funzione del cervello in una vasta gamma di disturbi neurologici e psichiatrici e potenziamento di memoria nel declino conoscitivo relativo all'età e malattie neurodegenerative. Descriviamo un protocollo di laboratorio per la terapia di fotobiomodulazione transcranial (PBMT) in topi. Topi BALB/c invecchiati (18 mesi) sono trattati con un 660 nm laser transcranially, una volta al giorno per 2 settimane. Trasmissione dati mostrano che circa l'1% della luce incidente rosso sul cuoio capelluto raggiunge una profondità di 1 mm dalla superficie corticale, penetrando l'ippocampo dorsale del laser. I risultati del trattamento sono valutati con due metodi: un Barnes labirinto test, che è una valutazione di attività ippocampo-dipendente apprendimento e memoria spaziale, e misura hippocampal livelli di ATP, che è usato come un indice di bioenergetica. I risultati dell'attività di Barnes mostrano un miglioramento della memoria spaziale in topi invecchiati laser-trattati rispetto ai controlli di pari età. Analisi biochimica dopo trattamento laser indica ha aumentato i livelli di ATP hippocampal. Postuliamo che il miglioramento delle prestazioni di memoria è potenzialmente a causa di un miglioramento nel metabolismo energetico hippocampal indotta dal trattamento laser rosso. Le osservazioni nei topi potrebbero essere esteso ad altri modelli animali poiché questo protocollo potrebbe potenzialmente essere adattato ad altre specie frequentemente utilizzato in neuroscienze traslazionali, come coniglio, gatto, cane o scimmia. Fotobiomodulazione transcranial è una modalità sicura e conveniente che può essere un promettente approccio terapeutico nel danno conoscitivo relativo all'età.

Introduzione

PBMT, o terapia della luce laser a basso livello (LLLT), è un termine generale che si riferisce ai metodi terapeutici basati sulla stimolazione dei tessuti biologici di energia luminosa da laser o diodi emettitori di luce (LED). Quasi tutti i PBMT trattamenti sono applicati con rosso alla luce vicino-infrarosso (NIR) alle lunghezze d'onda da 600 a 1100 nm, una potenza di uscita che vanno da 1 a 500 mW e una fluenza che vanno da < 1 a > 20 J/cm2 (Vedi Chung et al.1).

Transcranial PBMT è un metodo di consegna luce non invadente che è condotto da irradiazione della testa usando una fonte di luce esterna (lase....

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Protocollo

Tutte le procedure sono state effettuate in conformità con la guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio del National Institutes of Health (NIH; Pubblicazione n. 85-23, rivisto nel 1985) e approvato dal comitato etico regionale di Tabriz University of Medical Sciences.

Attenzione: Questo protocollo include l'applicazione di strumenti laser di classe 3B e richiederà una formazione adeguata e aderenza alle linee guida di sicurezza. I laser di classe 3B possono danneggiare gravemente gli occhi e la pelle in grado di riscaldare. I laser di classe 3B non sono considerati un pericolo di ustione. Occhiali di protezione devono essere indos....

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Risultati

Analisi statistiche

L'analisi statistica dei dati ottenuti dalle sessioni di allenamento di Barnes è stato analizzato mediante ANOVA a due vie; le altre prove comportamentistiche e analisi dei livelli di ATP hippocampal tra gruppi sono state effettuate da One-way ANOVA, seguita da test post-hoc di Tukey. Tutti i dati sono espressi come mezzi ± errore standard della media (SEM), fatta eccezione per i dati di tras.......

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Discussione

Descriviamo un protocollo per lo svolgimento di una procedura PBMT di transcranial in topi. Questo protocollo è specificamente rivolto ai laboratori di neuroscienze che eseguono fotobiomodulazione ricerca incentrata su roditori. Tuttavia, questo protocollo può essere adattato ad altri animali di laboratorio che vengono spesso utilizzati nel campo della neuroscienza, come coniglio, gatto, cane o scimmia.

Attualmente, non esiste un crescente interesse nello studio transcranial PBMT con laser ros.......

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Dichiarazioni

Stipendio di P.C. è stato sostenuto da (Dupont-Warren Fellowship e Livingston Award), il dipartimento di psichiatria della Harvard dal cervello e comportamento Research Foundation (NARSAD Young Investigator Award) e della FotoTe Inc. unrestricted grant. La donazione di droga è venuto da TEVA. Rimborso è venuto da Pharmacia Upjohn. P.C. ha ricevuto consultazione onorari da Janssen ricerca e sviluppo. P.C. ha depositato numerosi brevetti relazionati all'uso di luce vicina all'infrarosso in psichiatria. PhotoMedex, Inc fornito quattro dispositivi per uno studio clinico. P.C. ha ricevuto fondi senza restrizioni da Litecure Inc di condurre uno studio su transcranial fotobiomodulazione per il trattamento del disturbo depressivo e di condurre uno studio su soggetti sani. P.C. ha co-fondato una società (Niraxx luce terapeutica) focalizzata sullo sviluppo di nuove modalità di trattamento basate sulla luce vicina all'infrarosso; è anche un consulente per la stessa società. P.C. ha ricevuto finanziamenti da scienze cerebrale di condurre uno studio su transcranial fotobiomodulazione per disturbo d'ansia generalizzato. Gli altri autori non hanno conflitti di interesse a divulgare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato supportato da una sovvenzione dalla Tabriz University of Medical Sciences (concessione n. 61019) S.S.-e. e una sovvenzione di pubblicazione da LiteCure LLC, Newark, DE, USA per l.d.t. Gli autori vorrei ringraziare il dipartimento di immunologia ed Education Development Center (EDC) di Tabriz University of Medical Sciences per la loro assistenza gentile.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
KetaminaAlfasan#1608234-01
XilazinaAlfasan#1608238-01
AgarosioSigma#A4679
SupercollaQuickstar
VibratomeCampden Instruments#MA752-707
Vela in vetro otticoMarca#7102
Potenza metroThor labs#PM100D
Rivelatore di fotodiodiThor labs#S121C
CaliperPittsburgh
GaAlAs laserThor Photomedicine
Etho VisionNoldus
CentrifugaFroilabo#SW14R
CuffieBlue Eagle
Fotocamera digitaleVisionlite#VCS2-E742H
Amplificatore SterioSony
EthanolHamonteb#665.128321
Labirinto di Barnesda Costom
Sigma#MAK190
lettore ElisaConsapevolezza#Stat Fax 2100
Kit di analisi ATP prodotto

Riferimenti

  1. Chung, H., et al. The nuts and bolts of low-level laser (light) therapy. Annals of Biomedical Engineering. 40 (2), 516-533 (2012).
  2. Salehpour, F., et al. Brain Photobiomodulation Therapy: a Narrative Review. Molecular Neurobiology. , 1-36 (2018).....

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Trattamento laserLabirinto di BarnesATP ippocampaleMemoria spazialeTopi anzianiTessuto cerebraleTrasmissione della luceSezionamento al vibratomo

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