Qui, presentiamo un protocollo per la creazione di un iCR immunocompetente (Istituto di ricerca sul cancro) modello murino di infezione del sistema nervoso centrale per visualizzare lo sviluppo della neuropatia. Il monitoraggio dei disturbi encefalitici virali con punteggi di malattia identici potrebbe essere eseguito per mostrare la neuropatia indotta dal virus dengue in vivo.
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Articolo metodologico
Un modello Murine di encefalite virale acuta indotta da virus dengue
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il virus dengue (DENV), un virus trasmesso da artrodi trasmesso dalle zanzare, può causare la grave malattia nota come febbre emorragica dengue, caratterizzata da complicazioni letali dovute a perdite di plasma, asciti, effusioni pleuriche, grave emorragia e compromissione dell'organo. Alcuni casi di infezione Da DENV presentano manifestazioni neurologiche; tuttavia, gli studi non hanno esplorato ulteriormente la neuropatogene indotta da DENV. In questo studio, presentiamo un protocollo per utilizzare un topo ICR (Istituto di ricerca sul cancro) immunocompetente per studiare l'induzione dell'infezione del sistema nervoso centrale (SNC) con DENV, seguito dalla progressione di encefalite virale acuta malattia.
Introduzione
DENV, un virus artropode della famiglia Flaviviridae, contiene un genoma di RNA a senso positivo che codifica tre proteine strutturali virali (capside, premembrana e busta) e sette proteine non strutturali virali (NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B e NS5). I quattro sierotipi di DENV (DENV1-4), che infettano circa 390 milioni di persone ogni anno, causano un onere globale anche se i governi hanno diretto notevoli sforzi verso il controllo dei vettori e delle malattie delle zanzare1. Attualmente, i vaccini protettivi e i farmaci antivirali terapeutici sono in fase di sviluppo e richiedono un'ulteriore convalida a lungo termine
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Protocollo
I protocolli sperimentali di studio sugli animali sono stati approvati dal Comitato Istituzionale per la cura degli animali e l'utente del National Defense Medical Center (numero IACUC: 16-261), secondo le linee guida stabilite dal Ministero della Scienza e della Tecnologia di Taiwan.
1. Procedura di infezione
- Preparare le scorte non adattate dENV2 (strain PL046)9 (originariamente ottenute dai Centers for Disease Control di Taiwan, che vanno da 2,5 x 107 a 1 x 109 PFU/mL).
- Diluire lo stock di virus a 1 x 106 PFU con Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 medio....
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Risultati
Gravi complicazioni neurologiche associate alla dengue sono state segnalate nei pazienti per la patogenesi dengue4. Anche se questi casi sono rari in clinica, la creazione di un modello murino immunocompetente di infezione Da DENV può essere utilizzato non solo per studiare l'immunopatogene, ma anche per esplorare l'infezione da SNC, la neuroinfiammazione, la neurotossicità e il virale acuto una malattia simile all'encefalite. In questo studio, secondo il nostro at.......
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Discussione
L'infezione da DENV è stata rilevata nel SNC di pazienti con dengue grave3,17, suggerendo la possibilità della manifestazione di encefalite virale acuta avvenuta durante la patogenesi dengue. Qui, riportiamo un modello murino in vivo dell'infezione da DENV per studiare il coinvolgimento della disfunzione del SNC nella dengue grave, in particolare con un focus sulle malattie acute simili all'encefalite acuta indotta da DENV. Rispetto ai modelli precedenti, in part.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo studio è stato sostenuto da sovvenzioni del Ministero della Scienza e della Tecnologia (MOST107-2321-B-038-001) e dal finanziamento intramurale 106TMU-CIT-01-2, Taipei, Taiwan.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Roswell Park Memorial Institute 1640 medium (RPMI) | Gibco | 11875-085 | Virus diluente |
| 0,3 mL Siringa da insulina | BD Ultra-FineII | 328838 | Iniezione intracerebrale e intraperitoneale |
| Microbalance | METTLER TOLEDO's LabX | AL104 | Peso del topo |
| DENV2 non adattato (ceppo PL046) | I Centri per il controllo delle malattie di | Taiwan-Infettare il topo | |
| da latte Institute of Cancer Research (ICR) | BioLASCO Taiwan Co., | Ltd-Il | nostro modello murino |
Riferimenti
- Guzman, M. G., Gubler, D. J., Izquierdo, A., Martinez, E., Halstead, S. B. Dengue infection. Nature Reviews Disease Primers. 2, 16055(2016).
- Katzelnick, L. C., Coloma, J., Harris, E. Dengue: knowledge gaps, unmet needs, and research priorities. Lancet Infectious Diseases. 17
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