Preparazione di Gushukang (GSK) Granuli per in vivo e in vitro

Yongjian Zhao; Qiang Wang; Shufen Liu; Yongjun Wang; Bing Shu; Dongfeng Zhao

doi:10.3791/59171

È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

Articolo metodologico

Preparazione di Gushukang (GSK) Granuli per in vivo e in vitro

7.1K visualizzazioni

⸱

DOI:

10.3791/59171

⸱

9 maggio 2019

Yongjian Zhao¹^,²^,³ , Qiang Wang¹^,²^,³ , Shufen Liu¹^,²^,³ , Yongjun Wang¹^,²^,³^,⁴ , Bing Shu¹^,²^,³ , Dongfeng Zhao¹^,²^,³

¹Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, ²Spine Institute, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, ³Key Laboratory of Theory and Therapy of Muscles and Bones, Ministry of Education, ⁴School of Rehabilitation Science, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine

In questo articolo

Sommario

Questo articolo fornisce un protocollo dettagliato per la preparazione di una soluzione di lavoro di granuli di Gushukang per studi sugli animali e granulo GSK contenenti siero per esperimenti in vitro. Questo protocollo può essere applicato alle indagini farmacologiche di farmaci a base di erbe, nonché alle prescrizioni sia per esperimenti in vivo che in vitro.

Abstract

La medicina tradizionale cinese a base di erbe svolge un ruolo come metodo alternativo nel trattamento di molte malattie, come l'osteoporosi postmenopausale (POP). I granuli di Gushukang (GSK), una prescrizione commercializzata in Cina, hanno effetti ossei-protettivi nel trattamento del POP. Prima della somministrazione al corpo, una procedura di preparazione standard è comunemente necessaria, che mira a promuovere il rilascio di costituenti attivi da erbe crude e migliorare gli effetti farmacologici così come gli esiti terapeutici. Questo studio propone un protocollo dettagliato per l'utilizzo di granuli GSK in vivo e in analisi sperimentali in vitro. Gli autori forniscono innanzitutto un protocollo dettagliato per calcolare i dosaggi adatti agli animali dei granuli per l'indagine in vivo: pesatura, dissoluzione, stoccaggio e somministrazione. In secondo luogo, questo articolo descrive i protocolli per la scansione micro-CT e la misurazione dei parametri ossei. Sono stati valutati i protocolli per l'esecuzione della macchina micro-CT e la quantificazione dei parametri ossei. In terzo luogo, vengono preparati granuli GSK contenenti siero e il siero contenente farmaci viene estratto per l'osteoclastogenesi in vitro e l'osteoblastogenesi. I granuli GSK sono stati somministrati intragastricamente due volte al giorno ai ratti per tre giorni consecutivi. Il sangue è stato poi raccolto, centrifugo, inattivato e filtrato. Infine, il siero è stato diluito e utilizzato per eseguire l'osteoclastogenesi e l'osteoblastogenesi. Il protocollo qui descritto può essere considerato un riferimento per le indagini farmacologiche di farmaci a base di erbe, come i granuli.

Introduzione

La medicina tradizionale cinese (TCM) è uno degli importanti approcci complementari e alternativi per il trattamento dell'osteoporosi¹^,². Il decotto d'acqua è la forma di base e più comunemente utilizzata della formula³. Tuttavia, esistono anche inconvenienti: cattivo gusto, disagio per il trasporto, breve durata di conservazione e protocolli incoerenti, limitando gli usi così come gli effetti curativi. Per evitare gli svantaggi di cui sopra e per perseguire effetti migliori, granuli sono stati sviluppati e sono stati ampiamente utilizzati⁴. Anche se molti studi ....