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Articolo metodologico

Modificato Eterotopic Hindarto Osteomyocutaneo flap modello nel ratto per traslazionale vascolarizzazione composito Allotransplantazione ricerca

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DOI:

10.3791/59458

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26 aprile 2019

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In questo articolo

Sommario

L'alloinnesto in composito vascolarizzato offre benefici che alterano la vita ai riceventi trapianti, ma le cause biologiche del rigetto del trapianto e della vascolopatia restano poco comprese. Il modello chirurgico del roditore presentato qui offre un modello di trapianto riproducibile e clinicamente rilevante, permettendo ai ricercatori di valutare gli eventi di rigetto e le potenziali strategie terapeutiche per prevenirne l'insorgenza.

Abstract

L'allotrandisplazione composita vascolarizzata (VCA) è un campo relativamente nuovo nella chirurgia ricostruttiva. Risultati clinici in VCA umano includono trapianti di mano e viso e, più recentemente, parete addominale, utero, e trapianti urogenitali. I risultati funzionali hanno superato le aspettative iniziali e la maggior parte dei destinatari godono di una migliore qualità della vita. Tuttavia, poiché l'esperienza clinica si accumula, deve essere affrontato il rigetto cronico e le complicazioni derivanti dall'immunosoppressione. In molti casi in cui gli innesti sono falliti, la patologia causativa è stata la vascolopatia ischemica. I meccanismi biologici del rigetto acuto e cronico associato con VCA, in particolare vascolopatia ischemica, sono importanti aree di ricerca. Tuttavia, a causa del numero molto ridotto di pazienti VCA, la valutazione dei meccanismi proposti è meglio affrontata in un modello sperimentale. Più gruppi hanno utilizzato modelli animali per affrontare alcune delle domande irrisolte pertinenti nel rigetto VCA e vascolopatia. Diversi modelli di modelli che coinvolgono una varietà di specie sono descritti in letteratura. Qui presentiamo un modello riproducibile di flap di osteomiocutanea dell'arto posteriore eterotopico VCA nel ratto che può essere utilizzato per la ricerca traslazionale VCA. Questo modello consente la valutazione seriale dell'innesto, comprese le biopsie e le diverse modalità di imaging, mantenendo un basso livello di morbilità.

Introduzione

La chirurgia ricostruttiva per la perdita di tessuto catastrofico da amputazione, ferite da esplosione, neoplasie maligne e difetti congeniti è limitata dalla disponibilità di tessuto dal paziente e dalla morbilità aggiuntiva causata dal sito donatore. In alcuni casi, come le vittime di ustioni o amputati quadrilatero, tessuto vitale per la ricostruzione non è disponibile dal paziente. In 1964, il primo trapianto di mano moderna è stato eseguito in Ecuador. Mentre questo è stato un successo tecnico, l'immunosoppressione disponibile al momento era insufficiente per prevenire il rigetto, e l'innesto è stato perso in meno di 3 settimane1. In 1998 ....

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Protocollo

Tutte le operazioni di chirurgia animale sono state eseguite in conformità con i protocolli approvati dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali dell'Università di Louisville (protocollo approvato IACUC 18198) e la guida nazionale istituti di salute (NIH) per la cura e l'uso di Animali da laboratorio10. 4-mese-vecchio maschio Brown-Norway (RT1. An) e 4-mese-vecchio maschio Lewis (RT1. Al) i ratti sono stati usati rispettivamente come donatori VCA e riceventi.

1. raccolta dell'Alloinnesto del donatore

  1. Sedate l'animale donatore utilizzando l'isoflurano vaporizz....

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Risultati

Il modello di lembo eterotopico dell'arto posteriore del ratto VCA consente la sopravvivenza a lungo termine dell'alloinnesto sotto immunosoppressione. Il modello è affidabile, riproducibile e semplice da eseguire. La patta è ben nascosta nella zona dell'inguina e costituisce una minima morbilità e disagio per l'animale. La presentazione cutanea è una manifestazione clinica della sopravvivenza e del rigetto dell'alloinnesto (Figura 1). Il design del flap consente il monitoraggio clinico lord.......

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Discussione

Nello sviluppo di questo modello di VCA, sono state prese in considerazione diverse questioni chiave. In primo luogo, era importante includere osso intatto (tibia e perone), midollo osseo, e la pelle nel trapianto. Mentre i trapianti clinici a mano da donatori adulti non trasferiscono quantità significative di midollo ematopoietico attivo, gli studi del ruolo della nicchia del midollo osseo sono meglio specchiati utilizzando un osso vascolarizzato intatto piuttosto che un osso lungo tagliato, che si traduce in fibrosi de.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato sostenuto dall'ufficio dell'assistente segretario della difesa per gli affari sanitari attraverso il programma di ricerca medica orientato al Congresso con il premio No. W81XWH-13-2-0057. Opinioni, interpretazioni, conclusioni e raccomandazioni sono quelle degli autori e non sono necessariamente approvate dal dipartimento della difesa.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
AcepromazinaHenry Schein5700850
Forbici AvventiziaASSI 
Morsetto approssimatore (doppio)ASSIABB2V, ABB22V
Morsetto approssimatore (singolo)FST00398-02
Pinza per applicazioneASSI CAF4
Forbici da dissezioneASSISDS18R8
Ago smussato da lavaggio 27 GSAI
EparinaSodio Sagent25021-400-30
IsofluranoPatterson Veterinario14043-704-06
Gioielliere BipolareASSI103000BPS03
Pinza per gioiellieri #3FST11231-30
Ketamina HCl 100 mg/mLZoetis043-304DEA Licenza richiesta
Soluzione Ringer lattatoHospira0409-7953-03
Soluzione Ringer lattato + 5% DestrosioHospira0409-7953-09
MeloxicamHenry Schein11695-6925-2
Micro pinzeASSI JFAL3
Micro porta aghiASSIB138
Prograf (Tacrolimus) 5 mg/mLAstellas0469-3016-01
Sutura, 10-0 ProleneEthiconW2790o 10-0 Ethilon (2830)
Sutura, 4-0 VicrylEthiconJ714D
Pinza dilatatrice per vasiASSID5AZ
XilazinaVetOne13985-612-50
SAS15R8 pinza

Riferimenti

  1. Gilbert Fernandez, J. J., Febres-Cordero, R. G., Simpson, R. L. The Untold Story of the First Hand Transplant: Dedicated to the Memory of one of the Great Minds of the Ecuadorian Medical Community and the World. Journal of Reconstructive Microsurgery. , (2018).
  2. Dubernard, J. M., et al.

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Ristampe e permessi

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