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Articolo metodologico

Modello Murine della Stenosi Venoso Centrale utilizzando Aortocaval Fistula con una stenosi di flusso

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DOI:

10.3791/59540

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11 luglio 2019

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In questo articolo

Sommario

Una fistola aortocaval è stata creata perforando l'aorta infra-renale murina attraverso entrambe le pareti nella vena cava inferiore ed è stata seguita dalla creazione di una stenosi nel suo deflusso attraverso la legatura parziale della vena cava inferiore. Questo modello riproducibile può essere utilizzato per studiare la stenosi venosa centrale.

Abstract

La stenosi venosa centrale è un'entità importante che contribuisce al fallimento della fistola arteriovenosa (AVF). Un modello MURine AVF è stato modificato per creare una legatura parziale della vena cava inferiore (IVC) nel deflusso della fistola, imitando la stenosi venosa centrale. Vengono introdotti aspetti tecnici di questo modello. L'aorta e l'IVC sono esposti, a seguito di un'incisione addominale. L'aorta infra-renale e l'IVC sono sezionati per il bloccaggio prossimale, e l'aorta distale è esposta per la puntura. L'IVC nel punto medio tra la vena renale sinistra e la biforcazione aortica viene attentamente sezionato per posizionare un sutura sotto l'IVC. Dopo aver bloccato l'aorta e IVC, viene creato un AVF forando l'aorta afra-renale attraverso entrambe le pareti nell'IVC con un ago da 25 G, seguito dalla legatura di un catetere intrave (IV) da 22 G e IVC insieme. Il catetere viene quindi rimosso, creando una stenosi venosa riproducibile senza occlusione. L'aorta e l'IVC sono sbloccati dopo aver confermato l'emostasi primaria. Questo nuovo modello di stenosi venosa centrale è facile da eseguire, riproducibile e faciliterà gli studi sul fallimento dell'AVF.

Introduzione

Le fistole arteriovenose (AVF) sono gli accessi più comuni per l'emodialisi, con una patenza superiore e un'infezione ridotta rispetto ad altri accessi come innesti o cateteri venosi centrali. Tuttavia, fino al 60% di AVF non riesce a maturare1,2,3; una recente revisione sistematica ha riferito che i tassi di patenza primaria a 1 anno erano solo il 60%4. La stenosi lungo il deflusso venoso provoca prevalentemente il fallimento della maturazione AVF5,6. Ci sono alcuni luoghi caratteristici incli....

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Protocollo

Tutti gli esperimenti sono stati effettuati con l'approvazione del Comitato istituzionale di cura e uso degli animali dell'Università di Yale (IACUC).

1. Anestesia e procedure pre-operative

  1. Sterilizzare tutti gli strumenti chirurgici e materiali automatizzando l'autoclaving. Accendere il dispositivo di supporto termico per essere certi che sia caldo (40-42 gradi centigradi).
  2. Mettere un topo C57BL/6 di 9-11 settimane in una camera di induzione acrilica e anestesizzarlo con 2,5% di isoflurane vaporizzato e 0,8 ossigeno L/min. L'induzione dell'anestesia dura circa 3 min.
  3. Togliere il mouse dalla camera. Confermare ....

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Risultati

Topi maschi hanno subito l'operazione di cui sopra per creare sia un AVF e una stenosi IVC. I topi di controllo sono stati sottoposti solo alla laparotomia e alla dissezione dei tessuti che circondano l'IVC, ad esempio, una procedura fittizia, o solo la creazione di una stenosi IVC senza la creazione simultanea di un AVF.

L'IVC è stato osservato con ultrasuoni Doppler il giorno 7 dopo la procedura chirurgica (

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Discussione

Il modello murine AVF è stato utilizzato per studiare i meccanismi di base e gli eventi molecolari che portano alla maturazione AVF13,14. In questo studio, abbiamo modificato un modello AVF murine stabilito per creare un nuovo modello di fistola murina aortocaval con una stenosi IVC nel tratto di deflusso della fistola. Il nostro modello di legatura è simile a diversi modelli murini descritti in precedenza che utilizzano la legatura vascolare. Un modello murino d.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato sostenuto dal NATIONAL Institute of Health (NIH) degli Stati Uniti Grant R01-HL128406; il Dipartimento dei Veterani Affari Biomedico Laboratorio di ricerca e sviluppo Programma merito Review Award I01-BX002336; nonché con le risorse e l'uso di strutture presso il VA Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
testina di scansione 20-60 MhzVisualSonics Inc.RMV-704
8-0 Micro sutura sterile, 6 mm (140 &5;), 3/8 cerchio, punto TAP AgoAROSutureT06A08N14-13monofilamento di poliammide Suture
Camera di induzione, 2 litri
3,75 "L x 9,00" P x 3,75 "H
VetEquip941444
Isoflo, liquido di isofluranoZoetis26675-46-7
Topi, C57BL / 6JIl Jackson Laboratorio664
Pet Bed Pad riscaldante a microondeSnuggle Safe6250
Ago PrecisionGlide 25GBD305122
Catetere Surflo I.V. 22GTerumoSR-OX2225CAdiametro esterno 0,85 mm
Morsetto vascolare Strumentochirurgico RobozRS-5424
Vevo770 Sistemadi imaging ad alta risoluzioneVisualSonics Inc.770

Riferimenti

  1. Dember, L. M., et al. Effect of clopidogrel on early failure of arteriovenous fistulas for hemodialysis: a randomized controlled trial. JAMA. 299 (18), 2164-2171 (2008).
  2. Dixon, B. S. Why don't fistulas mature? Kidney International. 70....

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Ristampe e permessi

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