In questo articolo vengono descritti i protocolli utilizzati per produrre una nuova piattaforma di distribuzione di vaccini, "polybubbles", per consentire il rilascio ritardato di burst. Poliesters tra cui politolico-acido co-glicolico) e policaprolactone sono stati utilizzati per formare i polibubbles e piccole molecole e antigene sono stati utilizzati come carico.
È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Articolo metodologico
Produzione di una piattaforma di distribuzione di vaccini sensibile al vicino all'infrarosso e Core-Shell
In questo articolo
Sommario
Abstract
Le strategie di erogazione dei vaccini che possono limitare l'esposizione del carico al solvente organico, consentendo al contempo nuovi profili di rilascio, sono cruciali per migliorare la copertura delle vaccinazioni in tutto il mondo. Qui, viene introdotta una nuova piattaforma di rilascio di fumpoli iniettabile, curabile e ritardata, chiamata polibolle. Il carico è stato iniettato in polibolo a base di poliestere che si sono formati in una soluzione aques basata sul 10% di carboxymethycellulose. Questo documento include protocolli per mantenere la forma sferica dei polibololi e ottimizzare il posizionamento e la ritenzione del carico per massimizzare la quantità di carico all'interno dei polibololi. Per garantire la sicurezza, il contenuto di solventi clorurato all'interno dei polibolcchi è stato analizzato utilizzando l'analisi dell'attivazione dei neutroni. Studi di rilascio sono stati condotti con piccole molecole come carico all'interno del polibolo per confermare il rilascio di scoppio ritardato. Per mostrare ulteriormente il potenziale di consegna on-demand del carico, i nanorod d'oro sono stati mescolati all'interno del guscio polimero per consentire l'attivazione laser nel vicino infrarosso.
Introduzione
La copertura immunitaria limitata comporta la morte di 3 milioni di persone specificamente causate da malattie prevenibili convaccino 1. Condizioni di stoccaggio e trasporto inadeguate portano allo stoccaggio dei vaccini funzionali e contribuiscono così a ridurre l'immunizzazione globale. Inoltre, la vaccinazione incompleta dovuta al non aderire ai programmi vaccinale richiesti provoca anche una copertura vaccinale limitata, in particolare nei paesi in via disviluppo 2. Sono necessarie visite multiple al personale medico entro il periodo raccomandato per ricevere colpi di richiamo, limitando così la percentuale di popola....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Protocollo
1. Sintesi del triacrilato policaprolacyone (PCLTA)
- Asciugare 3,2 mL di 400 da policaprolacyone (PCL) triol durante la notte a 50 gradi centigradi in un flacone di fondo rotondo aperto di 200 mL e K2CO3 in una fiala di vetro a 90 gradi centigradi.
- Mescolare il tris con 6,4 mL di diclorometano (DCM) e 4,246 g di carbonato di potassio (K2CO3) sotto argon.
- Mescolare 2,72 mL di cloruro di acriloile in 27,2 mL di DCM e aggiungere dropwise alla miscela di reazione nel pallone oltre 5 min.
- Coprire la miscela di reazione con un foglio di alluminio e lasciarlo indisturbato a temperatura ambient....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Risultati
I polibololi sono stati ampiamente caratterizzati utilizzando SEM e NAA. Cargo è stato centrato con successo per provocare un rilascio burst ritardato. I polibololi sono stati attivati con successo anche al laser a causa della presenza di AuNR all'interno dei polibololi.
Caratterizzazione polybubble
Polibololi iniettati in una soluzione aques senza CMC hanno provocato una polibolletta appiattita a causa del l.......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Discussione
Tecnologie e sfide attuali
Micro- e nanoparticelle a base di emulsione sono stati comunemente utilizzati come portatori di consegna di farmaci. Anche se la cinetica del rilascio del carico da questi dispositivi è stata ampiamente studiata, il controllo della cinetica del rilascio a raffica è stata una grande sfida11. La versatilità e la funzionalità del carico sono limitate anche nei sistemi basati sull'emulsione a causa dell'esposizione del carico ai solventi aques e organici .......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Vorremmo ringraziare il Dr. Bryan E. Tomlin affiliato con il laboratorio di analisi elementale all'interno del dipartimento di chimica di TAMU che ha assistito con l'analisi di attivazione neutroni (NAA).
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
Soluzione di Fisher
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| substrato del saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) in 1 fase Ultra Tetrametilbezidina (TMB) | Thermo scientific | 34028 | |
| 2-idrossi-2-metilpropiofenone | TCI AMERICA | H0991 | |
| Soluzione di arresto da 450 nm per substrato | TMB Abcam | ab17152 | |
| Cloruro di acriloil | Sigma Aldrich | A24109-100G | |
| Acriflavina | Chem-Impex International | 22916 | |
| Etere etilico anidro | Fisher Chemical | E138-500 | |
| Anticorpo anti-HIV1 gp120 coniugato alla perossidasi di rafano (HRP) | |||
| Albumina sierica bovina (BSA) | Fisher BioReagents | BP9700100 | |
| Coniugati coloranti BSA-CF488 | Invitrogen | A13100 | |
| Acido bromosalicilico | Acros Organics | AC162142500 | |
| Carbossimetilcellulosa (CMC) | Millipore Sigma | 80502-040 | |
| Bromuro di centrimonio (CTAB) | MP Biomedicals | ICN19400480 | |
| Cloroformio | Fisher Chemical | C2984 | |
| Tampone di rivestimento | Abcam | ab210899 | |
| Diclorometano (DCM) | Sigma Aldrich | 270997-1L | |
| Etere dietilico | Fisher Chemical | E1384 | |
| Dodeacil Ammina | Acros Organics | AC117665000 | |
| Doxorubicina cloridrato | Fisher BioReagents | BP251610 | |
| Acido L-ascorbico | Acros Organics | A61 100 | |
| Legato 100 Pompa a siringa | KD Scientific | 14 831 212 | |
| mPEG tiolo | Laysan Bio | NC0702454 | |
| Latte in polvere scremato | Andwin Scientific | NC9022655 | |
| Carbonato di potassio | Acros Organics | AC424081000 | |
| Tampone salino fosfato | BioReagents | BP3991 | |
| (Poly(caprolattone) | Sigma Aldrich | 440744-250G | |
| (Poly(caprolattone) triolo | Acros Organics | AC190730250 | |
| Poliacido (acido lattico-co-glicolico) diacrilato | CMTec | 280050 | |
| Carbonato di potassio | Acros Organics | AC424081000 | |
| Ricombinante HIV1 gp120 + gp41 proteina | Abcam | ab49054 | |
| Nitrato d'argento | Acros Organics | S181 25 | |
| Sodio boroidruro | Fisher Chemical | S678 10 | |
| Acido tetracloroaurico | Fisher Chemical | G54 1 | |
| Trealosio | Acros Organics | NC9022655 | |
| Trietilammina | Acros Organics | AC157910010 |
Riferimenti
- World Health Organization. Global Immunization: Worldwide Disease Incidence. , Children's Hospital of Philadelphia. https://www.chop.edu/centers-programs/vaccine-education-center/global-immunization/diseases-and-vaccines-world-view (2018).
- Paul, A., Bera, M., Gupta, P., Singh, N. D. P. o-Hydroxycinnamate for sequential photouncaging of two different functional groups and its application in releasing c....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Ristampe e permessi
