Method Article

Impianto di stent coronari di dimensioni umane nell'aorta addominale del ratto utilizzando un accesso trans-femorale

DOI:

10.3791/61442

November 19th, 2020

In This Article

Summary

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Questo protocollo descrive l'impianto di stent coronari umani nell'aorta addominale dei ratti con uno sfondo apoE-/- utilizzando un accesso trans-femorale. Rispetto ad altri modelli animali, i modelli murini portano i vantaggi di alta produttività, riproducibilità, facilità di movimentazione e alloggiamento e un'ampia disponibilità di marcatori molecolari.

Abstract

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L'intervento coronarica percutaneo (PCI), combinato con l'impiego di uno stent coronarica, rappresenta il gold standard nel trattamento interventico della malattia coronarica. La restenosi in-stent (ISR) è determinata da un'eccessiva proliferazione del tessuto neointimico all'interno dello stent e limita il successo a lungo termine degli stent. Una varietà di modelli animali sono stati utilizzati per chiarire i processi fisiopatologici alla base della restenosi in-stent (ISR), con i modelli coronarica suina e l'arteria iliaca del coniglio che sono i più frequentemente utilizzati. I modelli murini offrono i vantaggi di un'elevata produttività, facilità di movimentazione e alloggiamento, riproducibilità e un'ampia disponibilità di marcatori molecolari. Il modello di topo carente di apolipoproteina E (apoE-/- ) è stato ampiamente utilizzato per studiare le malattie cardiovascolari. Tuttavia, gli stent devono essere miniaturizzati per essere impiantati nei topi, comportando importanti cambiamenti delle loro proprietà meccaniche e (potenzialmente) biologiche. L'uso di ratti apoE-/- può superare queste carenze in quanto i ratti apoE-/- consentono la valutazione degli stent coronari delle dimensioni dell'uomo e allo stesso tempo forniscono un fenotipo aterogenico. Questo li rende un modello eccellente e affidabile per indagare ISR dopo l'impianto stent. Qui descriviamo, in dettaglio, l'impianto di stent coronari umani disponibili in commercio nell'aorta addominale dei ratti con uno sfondo apoE-/- utilizzando un accesso trans-femorale.

Introduction

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L'intervento coronarica percutaneo (PCI), combinato con l'impiego di uno stent coronarica, rappresenta il gold standard nel trattamento interventico della malattia coronarica1. Il successo a lungo termine degli stent, tuttavia, può essere limitato dal verificarsi di restenosi in-stent (ISR) determinata da un'eccessiva proliferazione del tessuto neointimico all'interno dello stent2,3. L'ISR può richiedere un nuovo intervento con bypass coronarica o re-PCI. Per lo studio dell'ISR sono stati suggeriti diversi modelli animali, ognuno dei quali presenta vantaggi e carenze. I principali incon....

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Protocol

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Gli esperimenti sono stati eseguiti in conformità con la legge tedesca sul benessere degli animali (TSchG) e la direttiva 2010/63/UE relativa alla protezione degli animali utilizzati a fini scientifici. L'approvazione ufficiale di questo studio è stata concessa dal Governmental Animal Care and Use Committee (Protocollo n.: AZ 87-51.04.2010.A065; Landesamt für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz Nordrhein-Westfalen, Recklinghausen, Germania). Il protocollo di studio è conforme alla Guida alla cura e all'uso degli animali da laboratorio. Il trattamento postoperatorio del dolore si basa sulle raccomandazioni della Società tedesca per le scienze animali di laboratorio (GV....

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Results

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Questo protocollo descrive l'impianto di stent nell'aorta addominale dei ratti utilizzando una via di accesso trans-femorale (Figura 1). Il primo punto centrale di questo modello animale è che consente il dispiegamento di stent coronari a misura d'uomo. Uno stent coronare crimpato e montato su palloncino disponibile in commercio può essere posizionato nell'aorta addominale dei ratti. Così, inoltre, può essere applicato lo stesso principio di distribuzione dello stent come negli esseri umani........

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Discussion

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Questo protocollo descrive l'impianto di stent coronari a misura d'uomo nell'aorta addominale dei ratti apoE-/- . Vale la pena sottolineare diversi punti tecnici. In primo luogo, si dovrebbe evitare una mancata corrispondenza tra la dimensione dello stent e la dimensione dell'aorta. Posizionare uno stent troppo piccolo può portare a malapposition stent, mentre l'impianto di uno stent troppo grande per l'aorta può causare sovraccarico, strappo e lesioni del vaso. Pertanto, si consiglia di utilizzare stent tra 2.......

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Disclosures

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Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Acknowledgements

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Ringraziamo la signora Angela Freund per la sua preziosa assistenza tecnica nella produzione di incorporamenti e diapositive. Ringraziamo anche Tadeusz Stopinski presso l'Institute for Laboratory Animal Science & Experimental Surgery per il suo perspicoso aiuto nel lavoro veterinario.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Diet
SNIFF Dieta ricca di grassi + Clopidogrel (15 mg/kg)SNIFF Spezialdiä ten GmbH, Soestpreparato su misuraWestern Diet
Drugs and Anesthetics
BuprenorphineEssex Pharma997.00.00
ISOFLO (Isoflurane Vapor) vaporizzatoreEickemeyer4802885
IsofluraneForene AbbottB 506
Soluzione isotonica (0,9%) di NaClDeltaSelect GmbHPZN 00765145
Soluzione di lattato di RingerBaxter Deutschland GmbH3775380
(S)-ketaminaCEVA Germania
XilazinaMedistar Germania
Forniture di consumo
Siringhe da 10 mL BDPlastipak4606108V
Siringhe da 2 mLBD Plastipak4606027V
Sutura in prolene 6-0ETHICONN-2719K
Sutura in seta 4-0SeraflexIC 158000
Unguento per occhi e naso BepanthenBayer Vital GmbH6029009.00.00
Tamponi di garza di cotoneFuhrmann GmbH32014
Nastro di seta Durapore3M1538-1
Soluzione di disinfezione della pelle polialcolicaAntiseptica GmbH72PAH200
Ago Sterican 18 GB. Braun304622
Ago Sterican 27 3/4 GB.Braun4657705
Carta velinadisponibilein commercio
Strumenti chirurgici
Graefe pinze curve x1Fine Science Tools Inc.11151-10
Pinze Graefe diritte FineScience Tools Inc.11050-10
Porta aghi MathieuFine Science Tools Inc.12010-14
ForbiciStrumenti di Fine Science Inc.14074-11
Pinza SemkenFine Science Tools Inc.11008-13
Piccole forbici chirurgiche curve FineScience Tools Inc.14029-10
Piccole forbici chirurgiche dritte FineScience Tools Inc.14028-10
Pinze modello standardFine Science Tools Inc.11000-12
Forbici a molla VannasFine Science Tools Inc.15000-08
Attrezzatura
Microscopio da dissezioneLeica MZ9
Termoforo a temperatura controllataSygonix26857617
Attrezzatura per l'impianto di stent
Stent a rilascio di farmaco Xience 2,25 mm x 8 mmAbbott Vascular USA1009544-18
Filo guida Fielder XT PTCA Filo guida: 0,014" x 300 cmASAHI INTECC CO., LTD GiapponeAGP140302
Sistema di siringhe di gonfiaggioAbbott 20/30 Priority Pack1000186
Processamento e analisi dei tessuti
30% H2O2Roth9681Istologia
EtanoloRothK928.1Istologia
Giemsas Azur-Eosin-MethylenblauMerck109204Istologia
Tavoletta graficaWACOM Europe GmbHCTL-6100WLK-S
Roti Histofix, Formaldeide tamponata 4%RothP087Istologia
Technovit 9100Morphisto12225.K1000Istologia

References

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Patel, M. R., et al.

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Human Coronary StentsRat Abdominal AortaTrans Femoral AccessApoE Knockout RatsStent Implantation ProcedureIn Stent RestenosisOptical Coherence TomographyHistological AnalysisFemoral Artery AccessBalloon Inflation

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