Pancreatite acuta grave indotta da taurocolato di sodio nei topi C57BL/6

Mariana B. Serra; Márcia  K. Koike; Denise  F. Barbeiro; Marcel  C. C. Machado; Heraldo  P. de Souza

doi:10.3791/61547

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Articolo metodologico

Pancreatite acuta grave indotta da taurocolato di sodio nei topi C57BL/6

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DOI:

10.3791/61547

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28 giugno 2021

Mariana B. Serra^*¹ , Márcia K. Koike^*¹ , Denise F. Barbeiro^*¹ , Marcel C. C. Machado^*¹ , Heraldo P. de Souza^*¹

¹Discipline of Clinical Emergencies, Department of Clinical Medicine, HCFMUSP / LIM 51, University of São Paulo Medical School

^* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Modelli animali per la pancreatite acuta grave consentono lo studio dei cambiamenti fisiopatologici nella fase iniziale, facilitando l'osservazione dell'evoluzione degli eventi infiammatori. Qui forniamo un protocollo per l'induzione della pancreatite biliare acuta grave mediante infusione retrograda di taurocolato di sodio nel dotto pancreatico di topi C57BL/6 anestetizzati.

Abstract

L'induzione della pancreatite acuta biliare mediante infusione di taurocolato di sodio è stata ampiamente utilizzata dalla comunità scientifica a causa della rappresentazione della condizione clinica umana e della riproduzione di eventi infiammatori corrispondenti all'insorgenza della pancreatite biliare clinica. La gravità del danno pancreatico può essere valutata misurando la concentrazione, la velocità e il volume dell'acido biliare infuso. Questo studio fornisce una lista di controllo aggiornata dei materiali e dei metodi utilizzati nella riproduzione del protocollo e mostra i principali risultati di questo modello di pancreatite acuta (AP). La maggior parte delle pubblicazioni precedenti si sono limitate a riprodurre questo modello nei ratti. Abbiamo applicato questo metodo nei topi, che fornisce ulteriori vantaggi (cioè la disponibilità di un arsenale di reagenti e anticorpi per questi animali insieme alla possibilità di lavorare con ceppi di topi geneticamente modificati) che possono essere rilevanti per lo studio. Per l'induzione della pancreatite acuta nei topi, presentiamo un protocollo sistematico, con una dose definita del 2,5% di taurocolato di sodio a una velocità di infusione di 10 μL / min per 3 minuti nei topi C57BL / 6 che raggiunge il suo massimo livello di gravità entro 12 ore dall'induzione ed evidenzia i risultati con risultati che convalidano il metodo. Con la pratica e la tecnica, il tempo totale stimato, dall'induzione dell'anestesia al completamento dell'infusione, è di 25 minuti per animale.

Introduzione

Nell'uomo, la presenza di calcoli biliari è la causa più comune di pancreatite dovuta all'ostruzione della porzione terminale del coledocale, interrompendo il flusso delle secrezioni pancreatiche e causando un intenso processo infiammatorio nel pancreas, con un aumento della concentrazione di enzimi digestivi nel siero e mediatori ^{infiammatori1,2}.

Sono state proposte due diverse teorie per spiegare lo sviluppo della pancreatite acuta (AP). La teoria del "canale comune" suggerisce che le pietre presenti nella cistifellea ostruiscono il sistema del dotto biliare comune distale, consen....