Il paradigma dello stress psicosociale cronico (CGS) impiega fattori di stress clinicamente rilevanti durante la gravidanza nei topi per modellare i disturbi psichiatrici di madri e neonati. Qui, forniamo una procedura passo-passo per applicare il paradigma CGS e le valutazioni a valle per convalidare questo modello.
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Articolo metodologico
Utilizzo di un modello murino di stress psicosociale in gravidanza come paradigma traslazionale rilevante per i disturbi psichiatrici nelle madri e nei neonati
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il periodo peripartum è considerato un periodo sensibile in cui le esposizioni materne avverse possono comportare conseguenze negative a lungo termine sia per la madre che per la prole, incluso lo sviluppo di disturbi neuropsichiatrici. I fattori di rischio legati all'emergere della disregolazione affettiva nella diade materno-infantile sono stati ampiamente studiati. L'esposizione allo stress psicosociale durante la gravidanza è costantemente emersa come uno dei predittori più forti. Diversi modelli di roditori sono stati creati per esplorare questa associazione; tuttavia, questi modelli si basano sull'uso di fattori di stress fisici o di un numero limitato di fattori di stress psicosociali presentati in modo ripetitivo, che non catturano con precisione il tipo, l'intensità e la frequenza dei fattori di stress sperimentati dalle donne. Per superare queste limitazioni, è stato generato un paradigma di stress psicosociale cronico (CGS) che impiega vari insulti psicosociali di diversa intensità presentati in modo imprevedibile. Il manoscritto descrive questo nuovo paradigma CGS in cui le topi femmine gravide, dal giorno gestazionale 6,5 al 17,5, sono esposte a vari fattori di stress durante il giorno e durante la notte. I fattori di stress diurni, due al giorno separati da una pausa di 2 ore, vanno dall'esposizione a oggetti estranei o odore di predatore a frequenti cambiamenti nella biancheria da letto, rimozione della biancheria da letto e inclinazione della gabbia. I fattori di stress durante la notte includono l'esposizione continua alla luce, il cambio dei compagni di gabbia o la lettiera bagnata. Abbiamo precedentemente dimostrato che l'esposizione alla CGS provoca lo sviluppo di anomalie neuroendocrine e comportamentali materne, tra cui una maggiore reattività allo stress, l'emergere di modelli di assistenza materna frammentati, anedonia e comportamenti correlati all'ansia, caratteristiche fondamentali delle donne che soffrono di umore perinatale e disturbi d'ansia. Questo modello CGS, quindi, diventa uno strumento unico che può essere utilizzato per chiarire i difetti molecolari alla base della disregolazione affettiva materna, nonché i meccanismi trans-placentati che influenzano il neurosviluppo fetale e provocano conseguenze comportamentali negative a lungo termine nella prole.
Introduzione
I meccanismi alla base di una maggiore suscettibilità ai disturbi neuropsichiatrici nelle madri e nei neonati a seguito di esposizioni materne avverse nel periodo peripartum rimangono in gran parte sconosciuti. Sostanziali alterazioni fisiologiche materne si verificano durante la gravidanza e il passaggio al periodo postpartum, compresi diversi adattamenti neuroendocrini che si ipotizza siano critici non solo per il neurosviluppo della prole sana ma anche per preservare la salute mentale materna1,2. A livello dell'asse ipotalamico ipotalamico surrenale materno (HPA), si osservano adattamenti sia nei livelli ci....
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Protocollo
Tutti gli esperimenti sugli animali descritti sono stati approvati dall'Animal Care and Use Committee presso il Cincinnati Children's Medical Center ed erano in conformità con le linee guida del National Institutes of Health. L'accesso ad libitum al chow e all'acqua standard dei roditori è stato fornito in ogni momento ai topi, anche durante il paradigma CGS. I topi sono stati alloggiati su un ciclo luce-buio di 14 ore / 10 ore (luci su 06:00 h) se non diversamente specificato (cioè esposizione alle luci durante la notte).
1. Preparazione per gli accoppiamenti a tempo
- Almeno 2 settimane prima di allestire gli accoppiament....
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Risultati
L'esposizione delle tope femmine gravide alla CGS provoca cambiamenti nei parametri cronici rilevanti per lo stress, tra cui una riduzione dell'aumento di peso corporeo durante la gravidanza (Figura 2A) e un aumento del peso delle ghiandole surrenali nel primo periodo postpartum (Figura 2B)19. È importante sottolineare che l'esposizione alla CGS provoca anomalie postpartum nella funzione neuroendocrina materna. Le dighe CGS mostrano un as.......
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Discussione
L'esposizione delle topi gravide alla CGS perturba la funzione neuroendocrina materna postpartum, compresa la risposta dell'asse HPA a nuovi fattori di stress, ed è associata a varie anomalie comportamentali rilevanti per l'umore perinatale e i disturbi d'ansia. Dato che il modello impiega l'utilizzo di un fattore di rischio ambientale, si prevede una variazione fenotipica più elevata di quella altrimenti osservata nei modelli genetici22. Tuttavia, i risultati ottenuti dall'applicazione del paradi.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno conflitti di interesse da divulgare.
Ringraziamenti
Gli autori desiderano riconoscere il sostegno del National Institute of General Medical Sciences T32 GM063483-14 grant e della Cincinnati Children's Research Foundation. Per i dati adattati da Zoubovsky et al., 2019, Creative Common License può essere trovato nella seguente posizione: http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| lancetta animale | Braintree Scientific Inc. | GR4MM | |
| Sonda terminale smussata | Fine Science Tools | 10088-15 | Utilizzato per verificare la presenza di tappi copulatori |
| Bottiglie per SPT | Braintree Scientific Inc. | WTRBTL S-BL | Borraccia in vetro da 100 ml con tappo e provetta a sfera, graduata da 1 mL. |
| Provette coniche (50 mL) | Corning Inc. | 352098 | Utilizzato per trattenere i topi per misurare la risposta dell'asse HPA allo stress acuto. Assicurarsi che il tubo conico abbia una piccola apertura all'estremità per la ventilazione. |
| Legos | Amazon-Marbles | ||
| Amazon-Mouse | |||
| Corticosterone ELISA kit | Biovendor | RTC002R | |
| Mouse EZM | TSE | Systems-Agitatore | |
| di laboratorio reciproco | Labnet international | S2030-RC-B | |
| Provette separatori di siero | Becton Dickinson | 365967 | |
| Costruzione e fornitura di design alternativo | fondo a gabbia statica | RC71D-PC | |
| Gabbia statica - piani ventilati filtrati | Alternative Design Manufacturing and Supply Inc. | FT71H-PC |
Riferimenti
- Hillerer, K. M., Reber, S. O., Neumann, I. D., Slaterry, D. A. Exposure to chronic pregnancy stress reverses peripartum-associated adaptations: implications for postpartum anxiety and mood disorders. Endocrinology. 152 (10), 3930-3940 (2011).
- Hillerer, K. M., Neumann, I. D., Slaterry, D. A.
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Ristampe e permessi
