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Articolo metodologico
* These authors contributed equally
Questo protocollo dimostra che l'ossigeno iperbarico può migliorare la proliferazione, l'inibizione e l'apoptosi delle cellule di glioma U251 trattate con irradiazione a raggi X, bloccando le cellule nella fase G2/M. Ciò migliora la radiosensibilità delle linee cellulari di glioma umano.
Lo scopo di questo studio era esplorare l'uso dell'ossigeno iperbarico per migliorare la radiosensibilità delle cellule di glioma umano. Le cellule di glioma umano U251 sub-coltivate sono state divise casualmente in quattro gruppi: un gruppo di controllo non trattato, cellule trattate solo con ossigeno iperbarico (HBO), cellule trattate solo con irradiazione a raggi X (raggi X) e cellule trattate sia con HBO che con raggi X. In questi gruppi sono state osservate la morfologia cellulare, l'attività di proliferazione cellulare, la distribuzione del ciclo cellulare e l'apoptosi per valutare il ruolo dell'HBO nel migliorare la radiosensibilità delle cellule di glioma. Con l'aumento delle dosi di raggi X (0 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 6 Gy, 8 Gy), la frazione di sopravvivenza (SF) delle cellule di glioma è diminuita gradualmente.
È stato osservato un SF significativamente più basso per le cellule trattate con HBO e raggi X insieme rispetto al gruppo a raggi X per ciascuna dose (tutti P < 0,05). L'inibizione della proliferazione era significativamente più alta nel gruppo HBO combinato con i raggi X rispetto al gruppo dei raggi X per ogni dose (tutti P < 0,05) per la linea cellulare U251. La percentuale di cellule in fase G2/M era significativamente più alta nel gruppo HBO combinato con i raggi X (2 Gy) (26,70% ± 2,46%) e nel gruppo HBO (22,36% ± 0,91%) rispetto al gruppo di controllo (11,56% ± 2,01%) e nel gruppo raggi X (2 Gy) (10,35% ± 2,69%) (tutti P < 0,05). L'apoptosi delle cellule U251 era significativamente più alta nel gruppo HBO combinato con raggi X (2 Gy) rispetto al gruppo HBO, al gruppo raggi X (2 Gy) e al gruppo di controllo (tutti P < 0,05). Concludiamo che l'HBO può migliorare la proliferazione, l'inibizione e l'apoptosi delle cellule di glioma U251 bloccando le cellule di glioma nella fase G2/M e migliorando la radiosensibilità delle cellule di glioma U251.
Il glioma è un tumore intracranico primario che origina dalle cellule gliali del sistema nervoso centrale1. L'attuale strategia di trattamento per il glioma è la chirurgia combinata con la radioterapia e la chemioterapia. La radioterapia postoperatoria per il glioma può fornire benefici in termini di sopravvivenza (evidenza di grado I) e la radioterapia postoperatoria precoce può prolungare efficacemente la sopravvivenza del paziente (evidenza di grado II)2. Per i gliomi di grado superiore (grado III o IV), in particolare il glioblastoma altamente maligno e invasivo (evidenza di grado II....
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Tutti i metodi di studio sono stati approvati dal Comitato di revisione istituzionale e dal Comitato etico del secondo ospedale affiliato all'Università di Lanzhou e sono stati eseguiti in conformità con le linee guida e i regolamenti pertinenti.
1. Trattamento delle cellule di glioma
NOTA: In questo esperimento è stata utilizzata la linea cellulare di glioma U251.
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Coltura di cellule di glioma U251
Le cellule di glioma U251 avevano una forma fusiforme da 24 a 48 ore dopo la coltura in DMEM ed erano aderenti. Queste cellule sono state utilizzate per ulteriori studi (Figura 1).
Morfologia e conta delle cellule di glioma
La conta cellulare per le cellule di glioma U251 nel gruppo HBO combinato con i raggi X (2 Gy) era significativamente inferiore a quella per il gruppo dei raggi X (2 Gy) .......
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La linea cellulare di glioma U251 è una delle linee cellulari di glioma umano più classiche ed è ampiamente utilizzata come modello di glioma in molti studi.
Effetti dell'HBO sulla proliferazione delle cellule di glioma U251
L'HBO si riferisce tipicamente alla respirazione di ossigeno puro (concentrazione di ossigeno al 100%) in una camera sigillata con una pressione 1,5-3 volte superiore alla normale pressione atmosferica, che può aumentar.......
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Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Buffer di rilegatura | Dickinson and Company | RH10 9RR | |
| CCK-8 | DOJINDO | Saggio di conteggio cellulare | NJ |
| CELL FIT | analisi del ciclo cellulare (contenuto di DNA) | ||
| cellulare apoptotica | CELLQUEST | ||
| DMEM e annessina V-FITC | Gibco BRL | ||
| citometro a flusso | Dickinson | ||
| Glioma U251 e U87 linea cellulare Shanghai | Institute of Cell Biology | ||
| camera iperbarica di ossigeno | Hongyuan Institute | ||
| acceleratore lineare medico | Elekta Limited Company | ||
| lettore di | |||
| MOD FITLT formac v1.01 | analisi cellulare - fase del ciclo cellulare | ||
| tripsina | Hyclone Laboratories Inc |
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