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Articolo metodologico

Trapianto ortotopico di polmone sinistro in un modello suino giovane per ESLP

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DOI:

10.3791/62979

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14 febbraio 2022

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In questo articolo

Sommario

Questo protocollo descrive un modello suino giovanile di allotrapianto ortotopico di polmone sinistro progettato per l'uso con la ricerca ESLP. L'attenzione si concentra sulle tecniche anestetiche e chirurgiche, nonché sui passaggi critici e sulla risoluzione dei problemi.

Abstract

Il trapianto di polmone è il trattamento gold standard per la malattia polmonare allo stadio terminale, con oltre 4.600 trapianti di polmone eseguiti ogni anno in tutto il mondo. Tuttavia, il trapianto di polmone è limitato dalla carenza di organi donatori disponibili. Di conseguenza, c'è un'alta mortalità in lista d'attesa. La perfusione polmonare ex situ (ESLP) ha aumentato i tassi di utilizzo del polmone da donatore in alcuni centri del 15%-20%. L'ESLP è stato applicato come metodo per valutare e ricondizionare i polmoni marginali del donatore e ha dimostrato risultati accettabili a breve e lungo termine dopo il trapianto di polmoni da donatore con criteri estesi (ECD). I modelli di trapianto di animali di grandi dimensioni (in vivo) sono necessari per convalidare i risultati della ricerca in vitro in corso. Le differenze anatomiche e fisiologiche tra l'uomo e i suini pongono sfide tecniche e anestetiche significative. Un modello di trapianto facilmente riproducibile consentirebbe la validazione in vivo delle attuali strategie ESLP e la valutazione preclinica di vari interventi volti a migliorare la funzione polmonare del donatore. Questo protocollo descrive un modello suino di allotrapianto ortotopico di polmone sinistro. Ciò include tecniche anestetiche e chirurgiche, una lista di controllo chirurgica personalizzata, risoluzione dei problemi, modifiche e i vantaggi e i limiti dell'approccio.

Introduzione

Il trapianto di polmone è il trattamento a lungo termine per la malattia polmonare allo stadio terminale. Ogni anno in tutto il mondo vengono eseguiti oltre 4.600 trapianti di polmone1. Tuttavia, il trapianto di polmone presenta attualmente limitazioni significative. Innanzitutto, la necessità di organi continua a eclissare i donatori disponibili. Nonostante i tassi di trapianto di polmone siano aumentati ogni anno dal 2012 a causa degli effetti combinati di un maggior numero di candidati in lista per il trapianto, di un aumento del numero di donatori e di un migliore utilizzo degli organi recuperati, la mortalità in lista d'attesa per il trapi....

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Protocollo

Tutte le procedure sono state eseguite nel rispetto delle linee guida del Canadian Council on Animal Care e della guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio. I protocolli sono stati approvati dal comitato istituzionale per la cura degli animali dell'Università di Alberta. Questo protocollo è stato applicato in giovani femmine di Yorkshire di peso compreso tra 35 e 50 kg. I suini sono esemplari privi di agenti patogeni e di grado alimentare. Vengono acquistati presso lo Swine Research and Technology Centre di Edmonton, AB, Canada (https://srtc.ualberta.ca). Tutte le persone coinvolte nelle procedure ESLP avevano ricevuto un'adeguata formazione in materia di....

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Risultati

Tutti i risultati sono nel contesto di 4 ore di riperfusione dopo 12 ore di NPV-ESLP16. Durante l'espianto polmonare, ci sono diversi esiti clinici da anticipare (Figura 3). In genere, il suino rimane emodinamicamente stabile dopo un espianto di polmone sinistro riuscito, ma può richiedere un'infusione a basse dosi di fenilefrina (intervallo di dose: 2-10 mg/h) a causa di una risposta vasodilatatoria all'intervento chirurgico. La frequenza cardiaca dovrebbe mirare a c.......

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Discussione

In questo protocollo sono coinvolte diverse fasi chirurgiche critiche e la risoluzione dei problemi è necessaria per garantire il successo del trapianto e della valutazione polmonare. I polmoni dei suini giovani sono incredibilmente delicati rispetto ai polmoni umani adulti, quindi il chirurgo operatore deve essere cauto quando maneggia i polmoni dei suini. Ciò è particolarmente vero dopo una corsa di 12 ore di ESLP, poiché l'organo avrà assunto volume di liquido e sarà suscettibile di lesioni dovute a manipolazioni ecce.......

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Dichiarazioni

DHF detiene brevetti sulla tecnologia e sui metodi di perfusione degli organi ex situ . DHF e JN sono fondatori e principali azionisti di Tevosol, Inc.

Ringraziamenti

Questa ricerca è finanziata per conto della Fondazione Ospedaliera Universitaria.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Radiometro ABL 800 FLEX Analizzatore di gas ematici989-963
Filtro elettrostatico adulto-pediatrico HME - PiccoloCovidien352/5877
Divaricatore polmonare AllisonPilling341679
Filtro arteriosoSORIN GROUP01706/03
Backhaus Pinza per asciugamaniPilling454300
Albumina sierica bovinaMP biomedicals218057791
Biomedicus PumpMaquetBPX-80
Fascette per broncoscopio
... Bianco 12"HUASU InternationalHS4830001
Cloruro di calcioFisher ScientificC69-500G
Cooley Divaricatore SternalePilling341162
CUSHING Gutschdressing PinzePilling466200
Debakey-Metzenbaum DissezionePilling342202
ForbiciPilling342202
DeBakey Morsetto Vascolare PerifericoPilling353535
Debakey Pinza per tessuti vascolari dirittiPilling351808
D-glucosioSigma-AldrichG5767-500G
Goccia ventosa
Tubo endotracheale 9.0mm CUFDMallinckrodt9590E
Trasduttoredi flussoPompa di infusione BIO-PROBETX 40
BaxterAS50
Inspire 7 M Ossigenatore a membrana a fibra cavaSORIN GROUPK190690
Connettore per tubi di intercettazione 3/8" x 1/2"Medtronic6013
Tubo di intercettazione 1/4" x 1/16" x 8'Medtronic3108
Tubo di intercettazione 3/8" x 3/32" x 6'Medtronic3506
LaringoscopioN/AN/ARealizzato su misura con lama da 10 pollici
Forbici da dissezione MetzenbaumPilling460420
Serbatoio di anidride carbonica medicoPraxair5823115
Serbatoio di azoto medicoPraxairNI MK
Mosquito ClampPilling181816
Harken Auricle Clamp
Organo CameraTevosol
PlasmaLyte ABaxterTB2544
Poole Tubo di aspirazionePilling162212
Potassio FosfatoFischer ScientificP285-500G
PERFADEX PlusXVIVO19811
Satinsky ClampPilling354002
ScalaTANITAKD4063611
Membrana di supporto in siliconeTevosol
Bicarbonato di sodioSigma-Aldrich792519-1KG
Cloruro di sodio 0,9%BaxterJB1324
Sorin XTRA Cell SaverSORIN GROUP75221
Sega sternaleStryker6207
Dispositivo chirurgico di elettrocauterizzazioneKls MartinME411
Trasduttore di pressione TruWaveEdwardsVSYPX272
Catetere venoso centrale a due lumi 7FR X2Arrowg+ardCS-12702-E
Morsettoper tubi VorsePilling351377
divaricatore Willauer-DeaverPilling341720
Yankauer Tubo di aspirazionePilling162300
0 ETHIBOND Verde 1X36" Endo Loop 0ETHICOND8573
0 PDS II CP-1 2x27"ETHICONZ467H
1 VICRYL MO-4 1x18"ETHICONJ702D
2-0 SETA Nero 12" x 18" FiliETHICONSA77G
4-0 PROLENE Blu TF 1x24"ETHICON8204H
6-0 PROLENE Blu BV 2x30"ETHICONM8776
calibro 21
Serbatoio di ossigeno medico Praxair 2014408 Ago

Riferimenti

  1. Chambers, D. C., et al. The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; focus theme: Multi....

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