Qui presentiamo un modello murino SAH standardizzato, indotto dalla perforazione del filamento endovascolare, combinato con la risonanza magnetica (MRI) 24 ore dopo l'operazione per garantire il corretto sito di sanguinamento ed escludere altre patologie intracraniche rilevanti.
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Articolo metodologico
Modello di perforazione endovascolare per emorragia subaracnoidea combinata con risonanza magnetica (MRI)
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il modello di perforazione del filamento endovascolare per imitare l'emorragia subaracnoidea (SAH) è un modello comunemente usato - tuttavia, la tecnica può causare un alto tasso di mortalità e un volume incontrollabile di SAH e altre complicanze intracraniche come ictus o emorragia intracranica. In questo protocollo viene presentato un modello murino SAH standardizzato, indotto dalla perforazione del filamento endovascolare, combinato con la risonanza magnetica (MRI) 24 ore dopo l'operazione per garantire il corretto sito di sanguinamento ed escludere altre patologie intracraniche rilevanti. In breve, i topi C57BL/ 6J vengono anestetizzati con un'iniezione intraperitoneale di ketamina/xilazina (70 mg/16 mg/kg di peso corporeo) e posti in posizione supina. Dopo l'incisione del collo della linea mediana, l'arteria carotide comune (CCA) e la biforcazione carotidea sono esposte e una sutura di polipropilene monofilamento non assorbibile 5-0 viene inserita in modo retrogrado nell'arteria carotide esterna (ECA) e avanzata nell'arteria carotide comune. Quindi, il filamento viene invaginato nell'arteria carotide interna (ICA) e spinto in avanti per perforare l'arteria cerebrale anteriore (ACA). Dopo il recupero dall'intervento chirurgico, i topi subiscono una risonanza magnetica 7.0 T 24 ore dopo. Il volume di sanguinamento può essere quantificato e classificato tramite risonanza magnetica postoperatoria, consentendo un robusto gruppo sperimentale SAH con la possibilità di eseguire ulteriori analisi di sottogruppo in base alla quantità di sangue.
Introduzione
L'emorragia subaracnoidea (SAH) è causata dalla rottura di un aneurisma intracranico e rappresenta un'emergenza pericolosa per la vita, associata a morbilità e mortalità sostanziali, pari a circa il 5% degli ictus 1,2. I pazienti con SAH presentano forti mal di testa, disfunzioni neurologiche e disturbi progressivi della coscienza3. Circa il 30% dei pazienti con SAH muore entro i primi 30 giorni dopo l'evento emorragico iniziale4. Clinicamente, il 50% dei pazienti sperimenta lesioni cerebrali ritardate (DBI) dopo lesioni cerebrali precoci. La DBI è caratterizzata....
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Protocollo
Gli esperimenti sono stati eseguiti in conformità con le linee guida e i regolamenti stabiliti da Landesamt fuer Gesundheit und Soziales (LaGeSo), Berlino, Germania (G0063/18). In questo studio sono stati utilizzati topi maschi C57Bl/6J (8-12 settimane) con un peso di 25 ± 0,286 g (media ± s.e.m.).
1. Preparazione animale
- Indurre l'anestesia iniettando ketamina (70 mg/kg) e xilazina (16 mg/kg) per via intraperitoneale. Mantenere la temperatura corporea normale, contribuendo alla rapida induzione dell'anestesia profonda. Testare un'adeguata sedazione con uno stimolo al dolore, come un pizzico di punta, e verificare....
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Risultati
Mortalità
Per questo studio, un totale di 92 topi maschi C57Bl / 6J di età compresa tra 8-12 settimane sono stati sottoposti a operazione SAH; in questi, abbiamo osservato un tasso di mortalità complessivo dell'11,9% (n = 12). La mortalità si è verificata esclusivamente entro le prime 6-24 ore dopo l'intervento chirurgico, suggerendo la mortalità perioperatoria e il sanguinamento SAH stesso come i fattori che contribuiscono più probabilmente.
Grado di sanguinamento .......
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Discussione
In sintesi, un modello murino SAH standardizzato indotto dall'operazione di perforazione del filamento endovascolare è presentato con invasione minore, breve tempo operativo e tassi di mortalità accettabili. La risonanza magnetica viene condotta 24 ore su 24 postoperatoria per garantire il corretto sito di sanguinamento e l'esclusione di altre patologie intracraniche rilevanti. Inoltre, abbiamo classificato diversi gradi di sanguinamento SAH e misurato i volumi di sanguinamento, consentendo ulteriori analisi di sottogrup.......
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Dichiarazioni
Nessun conflitto di interessi
Ringraziamenti
SL è stato sostenuto dal Chinese Scholarship Council. KT è stato sostenuto dalla borsa di studio BIH-MD dell'Istituto di sanità di Berlino e dalla Sonnenfeld-Stiftung. RX è supportato dal BIH-Charité Clinician Scientist Program, finanziato dalla Charité -Universitätsmedizin Berlin e dal Berlin Institute of Health. Riconosciamo il sostegno della Fondazione tedesca per la ricerca (DFG) e del Fondo di pubblicazione ad accesso aperto di Charité - Universitätsmedizin Berlin.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Crema per gli occhi | Bayer | 815529836 | Bepanthen |
| Software di analisi delle immagini | ImageJ | In bundle con Java 1.8.0_172 | |
| Sutura di legatura (5-0) | SMI | Seta nera USP | |
| Sorgente luminosa per microscopio | Zeiss | CL 6000 LED | |
| Ketamina | CP-pharma | 797-037 | 100 mg/mL |
| MRI | Bruker | Pharmascan 70/16 | 7 |
| Immagini MRI Tesla acquisite software | Bruker | Bruker Paravision 5.1 | |
| Paracetamolo (40 mg/mL) | bene Arzneimittel | 4993736 | |
| Filamento di prolene (5-0) | Erhicon | EH7255 | |
| Rasoio | Wella | HS61 | |
| Strumento chirurgico (Forbici fini) | FST | 14060-09 | |
| Strumento chirurgico (forcipe#1) | AESCULAP | FM001R | |
| Strumento chirurgico (pinze#2) | AESCULAP | FD2855R | |
| Strumento chirurgico (pinza#3) | Hammacher | HCS 082-12 | |
| Strumento chirurgico (Porta aghi) | FST | 91201-13 | |
| Strumento chirurgico (Vannas Spring Scissors) | FST | 15000-08 | |
| Microscopio operatorio | Zeiss | Stemi 2000 C | |
| Monitoraggio della ventilazione | Stony Brook | Monitoraggio di piccoli animali e Sistema di gating | |
| Sutura per ferite(4-0) | Erhicon | CB84D | |
| Xylavet | CP-pharma | 797-062 | 20 mg/mL |
Riferimenti
- Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. Spontaneous subarachnoid haemorrhage. The Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).
- van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. The Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).
- Abraham, M. K., Chang, W. -T. W.
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Ristampe e permessi
