Qui, descriviamo una nuova tecnica veloce che modella la lesione del midollo spinale aperto nei ratti che elimina la laminectomia. L'emisezione laterale viene eseguita durante la visualizzazione attraverso un microscopio. La tecnica è versatile e può essere utilizzata anche nelle regioni cervicale, toracica e lombare del midollo spinale di altri animali.
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Articolo metodologico
Una tecnica di emisezione laterale del midollo spinale minimamente invasiva e veloce per modellare le lesioni aperte del midollo spinale nei ratti
In questo articolo
Sommario
Abstract
Le tecniche di lesione del midollo spinale a cielo aperto che modellano lesioni simili alla lacerazione sono dispendiose in termini di tempo e invasive perché comportano la laminectomia. Questa nuova tecnica elimina la laminectomia rimuovendo due processi spinosi e sollevando, quindi inclinando, l'arco vertebrale caudale. L'area chirurgica si apre senza la necessità di laminectomia. L'emisezione laterale viene quindi eseguita con controllo visibile diretto al microscopio. Il trauma è ridotto al minimo, richiedendo solo una piccola ferita ossea.
Questa tecnica ha diversi vantaggi: è più veloce e, quindi, meno onerosa per l'animale, e la ferita ossea è più piccola. Poiché la laminectomia viene eliminata, ci sono meno possibilità di lesioni indesiderate al midollo spinale e non ci sono schegge ossee che possono causare problemi (le schegge ossee incorporate nel midollo spinale possono causare gonfiore e danni secondari). Il canale vertebrale rimane intatto. Il limite principale è che l'emisezione può essere eseguita solo negli spazi intervertebrali.
I risultati mostrano che questa tecnica può essere eseguita molto più velocemente rispetto all'approccio chirurgico tradizionale, utilizzando la laminectomia (11 min vs. 35 min). Questa tecnica può essere utile per i ricercatori che lavorano con modelli animali di lesione del midollo spinale aperto in quanto è ampiamente adattabile e non richiede alcuna strumentazione specializzata aggiuntiva.
Introduzione
Le lesioni del midollo spinale (SCI) sono purtroppo lesioni prevalenti nell'uomo. Le lesioni midollari possono essere complicate in diversi modi, ad esempio dalle infezioni, ed è clinicamente importante studiare queste lesioni1. Poiché non esiste un'unica cura definitiva per la lesione midollare, sono ancora necessari modelli animali per approfondire la comprensione dei ricercatori e far progredire i possibili trattamenti 2,3. Sebbene le lesioni chiuse siano più comunemente modellate (compressione e contusione), è clinicamente importante comprendere le lacerazioni, che possono essere mo....
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Protocollo
Tutte le procedure sugli animali sono state eseguite secondo la direttiva UE (2010/63/UE) e sono state approvate dal comitato etico per gli animali dell'Ufficio nazionale ungherese per la sicurezza della catena alimentare (PEI/001/2894-11/2014). Durante questo studio sono state seguite tutte le normative istituzionali e governative applicabili in materia di uso etico degli animali.
1. Preparazione prima dell'intervento chirurgico
- Sterilizzare tutti gli strumenti utilizzati durante la procedura (vedere la Tabella dei materiali) e disinfettare le superfici in cui deve essere eseguito il lavoro prima....
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Risultati
Dopo l'emisezione, i ratti mostrano paralisi nell'arto posteriore omolaterale (prova in vivo del successo dell'emisezione). Una valutazione approfondita del campione può essere effettuata solo dopo la rimozione del midollo spinale (vedere la Figura 2, dove il midollo spinale rimosso può essere visto sia dal lato ventrale che da quello dorsale).
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Discussione
Questa tecnica di lesione del midollo spinale minimamente invasiva è stata sviluppata studiando ratti con lesioni al midollo spinale e il team ha dovuto affrontare problemi derivanti dall'intervento chirurgico stesso (schegge ossee dalla laminectomia che causano compressione e danneggiano il midollo spinale, intervento chirurgico che richiede troppo tempo, guarigione lenta di una grande ferita ossea). Eliminando la laminectomia, la procedura è diventata molto più veloce (11 minuti contro 35 minuti), la struttura del cana.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari o relazioni personali che potrebbero aver influenzato il lavoro riportato in questo articolo.
Ringraziamenti
Gli autori ringraziano Gergely Ángyán per l'artwork originale. Questo lavoro di ricerca è stato finanziato dall'Università Semmelweis di Budapest, Ungheria. Questo studio è stato sostenuto anche dal programma operativo ungherese per lo sviluppo delle risorse umane (EFOP-3.6.2-16-2017-00006). Un ulteriore sostegno è stato ricevuto dal programma di eccellenza tematica (2020-4.1.1.-TKP2020) del Ministero per l'innovazione e la tecnologia in Ungheria, nell'ambito del programma tematico Therapy dell'Università Semmelweis.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Augmentin (1.000 mg/200 mg polvere) | GlaxoSmithKline, Regno Unito | Dose una tantum di antibiotici s.c. a scopo profilattico (10 mg di amoxicillina e 2 mg di acido clavulanico; Augmentin 1.000 mg/200 mg polvere). Ogni giorno dopo l'intervento chirurgico, 10 mg di amoxicillina e 2 mg di acido clavulanico (Augmentin 1.000 mg/200 mg polvere) al giorno per animale | |
| Betadine | EGIS, Ungheria | Disinfettare la pelle dell'area chirurgica utilizzando una soluzione di iodio povidone | |
| Calypsol (50 mg/mL) | Richter Gedeon, Ungheria | Anestesia: combinazione di ketamina 80 mg/kg e xilazina 8 mg/kg per via intramuscolare | |
| CP XYLAZIN 2% (20 mg/mL) | Produlab Pharma B.V., Paesi Bassi | Anestesia: combinazione di ketamina 80 mg/kg e xilazina 8 mg/kg per via intramuscolare | |
| Pinza ossea dentale | Dentech, Ungheria | BS 0127 | Rimuovere i processi spinosi della vertebra toracica 13th e della vertebra lombare 1st utilizzando una pinza ossea dentale micromotore |
| chirurgico dentale | W& H, Austria | MF-TECTORQUE | Utilizzando un micromotore chirurgico dentale, viene eseguita una laminectomia al microscopio ottico della vertebra L1 |
| Zeiss, Germania | OPMI19-FC | Controllare la procedura visualizzando un'immagine microscopica ingrandita (ingrandimento 16x) | |
| soluzione fisiologica salina (0,9% NaCl) | Fresenius Kabi, Germania | Mantenere gli occhi umidi del ratto durante l'intera anestesia utilizzando gocce di soluzione salina fisiologica (riapplicare se necessario) | |
| raspatorium | Dentech, Ungheria | FK 1164 | Sezionare i muscoli attaccati alle vertebre con l'aiuto di un raspatorio, fino a quando tutti i legamenti spinali sono visibili. |
| divaricatore | Dentech, Ungheria | RT 1253 | |
| bisturi | Dentech, Ungheria | BB 173 | |
| bisturi | Dentech, Ungheria | BB 184 | |
| lama del bisturi 12 | B. Braun, Germania | 12 | |
| lama del bisturi 20 | B. Braun, Germania | 20 | |
| garza da taglio sterile 10 x 10 cm | Sterilux, Hartmann, Germania | ||
| suture (monofilamento, sintetiche; assorbibili e non assorbibili), dimensioni: 4-0 | B. Braun, Germania | ||
| pinzetta (13 cm) | Dentech, Ungheria | BD 1555 | |
| pinzetta (pinza per tessuti delicati) | Dentech, Ungheria | BD 1670 |
Riferimenti
- Failli, V., et al. Functional neurological recovery after spinal cord injury is impaired in patients with infections. Brain. 135, Pt 11 3238-3250 (2012).
- Guan, B., Chen, R., Zhong, M., Liu, N., Chen, Q.
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Ristampe e permessi
