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Articolo metodologico
* These authors contributed equally
Il presente protocollo descrive le lesioni traumatiche dei nervi periferici (TPNI), tra cui schiacciamento calibrato con precisione, lacerazione rigorosamente allineata e disallineata, nonché lacune innestate e non innestate del nervo sciatico nei topi. Vengono sviluppati sensori progettati su misura per misurare il trauma nervoso, indotto con strumenti comunemente disponibili per garantire risultati riproducibili post-TPNI.
La lesione traumatica del nervo periferico (TPNI) è una causa comune di morbilità a seguito di trauma ortopedico. Metodi riproducibili e precisi per ferire il nervo e denervare il muscolo sono stati a lungo un obiettivo nella ricerca muscoloscheletrica. Molti arti lesionati traumaticamente hanno un trauma nervoso che definisce l'esito a lungo termine del paziente. Nel corso di diversi anni, sono stati sviluppati metodi precisi per produrre lesioni nervose microchirurgiche, tra cui schiacciamento, lacerazioni e innesto di intercapedine nervosa, consentendo valutazioni dei risultati riproducibili. Inoltre, sono stati creati metodi più recenti per le lesioni da schiacciamento calibrate che offrono correlazioni clinicamente rilevanti con gli esiti utilizzati per valutare i pazienti umani. I principi della manipolazione minima per garantire una bassa variabilità nelle lesioni nervose consentono di aggiungere ancora più lesioni tissutali associate in questi modelli. Ciò include lo schiacciamento muscolare diretto e altri componenti della lesione dell'arto. Infine, la valutazione dell'atrofia e l'analisi precisa degli esiti comportamentali rendono questi metodi un pacchetto completo per lo studio del trauma muscoloscheletrico che incorpora realisticamente tutti gli elementi della lesione traumatica dell'arto umano.
La lesione traumatica del nervo periferico (TPNI) è una causa comune di morbilità dopo un trauma ortopedico 1,2,3. Ogni anno, circa il 3% dei pazienti traumatizzati subisce lesioni nervose 1,4, con un'incidenza di 3,50,000 casi5, con conseguenti 50,000 riparazioni chirurgiche6. Le TPNI si verificano in un'ampia gamma di gravità e il recupero funzionale dipende direttamente dal tipo e dalla gravità di queste lesioni
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Il disegno sperimentale e i protocolli sugli animali sono stati approvati dall'Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) presso il Penn State University College of Medicine. Per gli studi sono stati utilizzati topi maschi adulti C57BL/6J, di 10 settimane, del peso di 20-25 g. Gli animali sono stati alloggiati presso la struttura per animali in condizioni sterili di gestione degli animali e sono stati acclimatati almeno 5 giorni prima di condurre gli studi.
1. Preparazione degli animali
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Il sensore di pressione digitale su misura (Figura 1D) funziona rilevando la variazione di resistenza dell'FSR quando viene applicata una forza. Questo dispositivo rileva e registra le quantità di pressione più modeste applicate ad esso con un tempo di risposta di <5 μs, una frequenza di campionamento di 20 Hz e un intervallo di pressione di 2,5-25 libbre31. Le differenze nella pressione SNCI (Figura 1C) indotta da una pinza (
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La storia della ricerca TPNI si estende su diversi decenni11,12. I primi esperimenti con cani e specie più grandi hanno stabilito l'importanza dei modelli animali nello studio dei risultati della TPNI 36,37,38. Nel corso del tempo, questi modelli si sono spostati in roditori più piccoli, con le loro misure di risultati convalidate stabil.......
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Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Questo lavoro è stato sostenuto da sovvenzioni del NIH (K08 AR060164-01A) e del DOD (W81XWH-16-1-0725; W81XWH-19-1-0773) oltre al supporto istituzionale del Pennsylvania State University College of Medicine, Hershey, PA 17033, USA.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Preparazione alcolica | COVIDIEN | 5110 | |
| Buprenorfina | ZooPharm | BSRLAB0.5-211706 | |
| C57BL/6J | Jackson Laboratories, Bar Harbor | N/A | |
| Applicatori con punta in cotone | Puritan | 25-8062WC | |
| Forbice da dissezione | ASSI | ASSI. | |
| Colla di fibrina-TISSEEL | Baxter | 1501263 | |
| Resistore sensibile alla forza (FSR) | N/A | FlexiForce A301 | |
| Forcipe | FST-Dumont | 5SF Inox, 11252-00 | |
| GraphPad Prism | GraphPad Software Inc. | Versione 8.4.3. | |
| Termoforo omeotermico | Kent Scientific | RJ1675 | |
| Ketamina/Ketaved | VEDCO | VED1220 | |
| Pinze microchirurgiche | Miltex Premium instruments | BL1901 | |
| Unguento lubrificante oftalmico | Akorn Animal Health | NDC 59399-162-35 | |
| Piastra di Petri | VWR | 25384-092 | |
| Soluzione salina tamponata con fosfato | Gibco | 14190-144 | |
| Iodio povidone | Solimo | L0017765SA | |
| Sensore di pressione di precisione a pizzico Dispositivo | misura | Forbice N/A | |
| Miltex Premium | 21-536 | ||
| Microscopio binoculare stereo zoom | Precision Instruments | Modello PZMIII | |
| Guanti sterili | Cardinal Health | 9L19E511 | |
| Graffette chirurgiche | 3M-Precise | DS-25 | |
| Nastro chirurgico | 3M-Microphore | 1530-0 | |
| Suture | Ethicon | BV130-5 | |
| Siringa | BD Siringa | 309597 | |
| Trimmer | Philips | Electronics MG3750 | |
| Xilazina/Anased | Akorn Salute degli animali, Inc. |
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