È stato sviluppato un metodo che utilizza frutta di caffè verde (GF) per testare la tossicità degli insetticidi contro la piralide delle bacche di caffè (CBB). Insetticidi o sostanze tossiche sono stati applicati ai GF disinfettati prima o dopo l'infestazione da CBB. Sono stati valutati la mortalità degli insetti, la repellenza e la capacità riproduttiva, oltre ad altri parametri.
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Articolo metodologico
Metodologia per testare agenti di controllo e insetticidi contro la bacca di caffè Borer Hypothenemus hampei
In questo articolo
Sommario
Abstract
Prima di raccomandare insetticidi per il trattamento della piralide delle bacche di caffè (CBB) Hypothenemus hampei, è importante conoscere la mortalità e la repellenza di questi insetticidi contro gli insetti adulti o il loro impatto sulla produzione riproduttiva. Tuttavia, i metodi attualmente disponibili valutano solo la mortalità adulta, limitando la selezione di nuovi insetticidi con una diversa modalità d'azione. In questo lavoro, sono stati esaminati diversi metodi sperimentali per identificare i diversi effetti sulla CBB in condizioni di laboratorio. Per questo, i frutti di caffè verde (GF) sono stati raccolti e disinfettati mediante immersione in soluzione di ipoclorito di sodio seguita da irradiazione con luce UV. Parallelamente, gli adulti CBB di una colonia sono stati disinfettati mediante immersione in soluzione di ipoclorito di sodio. Per valutare la protezione della frutta (preinfestazione), i frutti sono stati posti in scatole di plastica e sono stati applicati gli insetticidi. Quindi, gli adulti CBB sono stati rilasciati ad un tasso di due CBB per GF. I GF sono stati lasciati in condizioni controllate per valutare l'infestazione da CBB e la sopravvivenza dopo 1, 7, 15 e 21 giorni. Per valutare l'efficacia degli insetticidi dopo l'infestazione da CBB (postnfestazione), gli adulti CBB sono stati rilasciati ai GF in un rapporto 2:1 per 3 ore a 21 °C. I frutti infestati che mostrano adulti CBB con i loro addominali parzialmente esposti sono stati selezionati e collocati in rack a 96 pozzetti, e i CBB che perforano i frutti sono stati trattati direttamente. Dopo 20 giorni, i frutti sono stati sezionati e sono stati registrati gli stadi biologici CBB all'interno di ciascun frutto. I GF fungevano da substrati che imitavano le condizioni naturali per valutare insetticidi tossici, chimici e biologici contro il CBB.
Introduzione
La piralide delle bacche di caffè (CBB), Hypothenemus hampei, è stata rilevata per la prima volta nel 1988 in Colombia e da allora è diventata la specie di parassiti più importante del raccolto di caffè. Le femmine di CBB lasciano il frutto natale già fecondato, cercando nuovi frutti guidati dalle sostanze chimiche volatili che emettono 1,2. Un ciclo completo viene eseguito entro 23 giorni3 ad una temperatura di 25 °C. Il ciclo inizia con la femmina fondatrice che penetra nel seme e depone le uova nell'endosperma del frutto. Le larve eclosed mangiano il seme. Se i frutti vengo....
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Protocollo
NOTA: Questo protocollo affronta diversi metodi per identificare diversi effetti sul CBB in condizioni di laboratorio.
1. Raccolta della frutta
- Scegli GF con un'età evolutiva di ~ 120-150 giorni dopo la fioritura dagli alberi in una piantagione di caffè al mattino presto.
2. Disinfezione della frutta20
- Porta circa 300 GF in laboratorio. Seleziona GF di dimensioni uniformi e sane e ritira i peduncoli.
- Immergere i GF in una soluzione di sapone (2 ml di sapone liquido per piatti in 998 ml di acqua di rubinetto), seguito da ....
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Risultati
I risultati hanno mostrato che le femmine CBB hanno riconosciuto i frutti e, a seconda delle caratteristiche della superficie del frutto e degli odori emessi, le femmine CBB hanno iniziato a penetrare o a portare i frutti entro 3 ore a 21 ° C.
L'effetto di un insetticida sul CBB quando applicato ai frutti del caffè (procedura di preinfestazione) dopo 24 ore e nel tempo è mostrato nella Figura 4. I due insetticidi (emulsione alcaloide al 5% e al 6%) hanno causato u.......
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Discussione
In questo protocollo, la disinfezione dei frutti e degli insetti sono passaggi critici. Quando i frutti del campo vengono utilizzati in laboratorio, mostrano spesso un'elevata contaminazione e disidratazione poiché microrganismi e acari sono presenti nell'epidermide 7,15,16. Pertanto, l'uso di frutta o insetti che non sono disinfettati causerà la morte degli insetti a causa della contaminazione causata da microrganismi, come bat.......
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Dichiarazioni
Nessuno degli autori ha conflitti di interesse da dichiarare.
Ringraziamenti
Gli autori esprimono i loro ringraziamenti alla Federazione Nazionale dei Coltivatori di Caffè della Colombia, agli assistenti del Dipartimento di Entomologia (Diana Marcela Giraldo, Gloria Patricia Naranjo), alla Experiment Station Naranjal e a Jhon Félix Trejos.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Bicchiere con beccuccio, forma bassa 500 mL | MARCA PP | ||
| Agitatore da banco | New Brunswick Scientific Innova 4000 Agitatore | ||
| Sapone liquido per piatti-AXION | Colgate-Palmolive | AXION | |
| Cappa; Stazione a Flusso Laminare Orizzontale | Terra Universal | Acciaio verniciato a polvere, 1930 mm L x 1118 mm P x 1619 mm A, 120 V (https://www.terrauniversal.com/hood-horizontal-laminar-flow-station-9620-64a.html) | |
| Insetti CBB | BIOCAFE | (http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html). | |
| Multi Fold Asciugamani di carta bianchi | Familia | 73551 | |
| Preval Spray unit | Preval Merck | Z365556-1KT | https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/z365556?gclid=Cj0KCQiAweaNBhDEARIsAJ 5hwbfZOy1TWGj6huatFtRQt AzOyHe5-oBiKnOUK2T1exuuk WwJLdvxkvsaAjoYEALw_wcB |
| Rack reversibili 96-Well | heathrowscientific | HEA2345A | https://www.heathrowscientific.com/reversible-racks-96-well-i-hea2345a |
| Lame per bisturi N 11 | Merck | S2771-100EA | |
| Manici per bisturi N3 | Merck | S2896-1EA | |
| Ipocloruro di sodio | L'azienda clorox | Clorox | |
| Zeiss | Stemi 508 | https://www.zeiss.com/microscopy/int/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-508.html |
Riferimenti
- Mendesil, E., et al. Semiochemicals used in host location by the coffee berry borer, Hypothenemus hampei. Journal of Chemical Ecology. 35 (8), 944-950 (2009).
- Jaramillo, J., et al. Coffee berry borer joins bark beetles in coffee klatch. PLoS....
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Ristampe e permessi
