Ganaspis brasiliensis- un parassitoide larvale di Drosophila suzukii (un parassita invasivo globale delle colture da frutto) - è stato approvato o è considerato per l'introduzione in Europa e negli Stati Uniti per il controllo biologico di questo parassita. Questo articolo fornisce protocolli per l'allevamento su piccola scala e su larga scala di questo parassitoide.
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Articolo metodologico
Metodi per l'allevamento del parassitoide Ganaspis brasiliensis, un promettente agente di controllo biologico per la Drosophila suzukii invasiva
In questo articolo
Sommario
Abstract
Originaria dell'Asia orientale, la drosophila ad ala maculata, Drosophila suzukii (Matsumura) (Ditteri: Drosophilidae), si è diffusa nelle Americhe, in Europa e in alcune parti dell'Africa nell'ultimo decennio, diventando un devastante parassita di vari frutti dalla pelle morbida nelle sue regioni invase. Il controllo biologico, in particolare per mezzo di parassitoidi auto-perpetuanti e specializzati, dovrebbe essere un'opzione praticabile per una gestione sostenibile a livello di area di questo parassita altamente mobile e polifago. Ganaspis brasiliensis Ihering (Hymenoptera: Figitidae) è un parassitoide larvale ampiamente distribuito in Asia orientale, ed è stato trovato per essere uno dei parassitoidi più efficaci di D. suzukii.
A seguito di rigorose valutazioni pre-introduzione della sua efficacia e dei potenziali rischi non bersaglio, uno dei gruppi genetici più specifici dell'ospite di questa specie (G1 G. brasiliensis) è stato recentemente approvato per l'introduzione e il rilascio sul campo negli Stati Uniti e in Italia. Un altro gruppo genetico (G3 G. brasiliensis), che è stato anche comunemente trovato per attaccare D. suzukii in Asia orientale, potrebbe essere considerato per l'introduzione nel prossimo futuro. Attualmente c'è un enorme interesse nell'allevamento di G. brasiliensis per la ricerca o nella produzione di massa per il rilascio sul campo contro D. suzukii. Questo protocollo e l'articolo video associato descrivono metodi di allevamento efficaci per questo parassitoide, sia su piccola scala per la ricerca che su larga scala per la produzione di massa e il rilascio sul campo. Questi metodi possono beneficiare di ulteriori ricerche a lungo termine e l'uso di questo parassitoide nativo asiatico come promettente agente di controllo biologico per questo parassita invasivo globale.
Introduzione
Originaria dell'Asia orientale, la drosophila ad ala maculata, Drosophila suzukii (Matsumura) (Ditteri: Drosophilidae), si è diffusa nelle Americhe, in Europa e in alcune parti dell'Africa 1,2. La mosca è estremamente polifaga, essendo in grado di utilizzare vari frutti coltivati e selvatici con pelli morbide e sottili nelle sue regioni native e invase 1,2,3. Le attuali strategie di gestione per questo parassita si basano fortemente sull'uso frequente di insetticidi che colpiscono le mosche adulte nei campi c....
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Protocollo
1. Metodi per l'allevamento in laboratorio su piccola scala di G3 Ganaspis brasiliensis
- Prepara la dieta dell'ospite.
- Aggiungere 600 ml di acqua distillata in un contenitore di vetro da 1.500 ml e riscaldare l'acqua su una piastra calda.
- Aggiungere 88,6 g di dieta secca disponibile in commercio (a base di agar, lievito di birra, farina di mais, metil parabene e saccarosio) o preparare la dieta utilizzando la formula pubblicata da Dalton et al.28 (vedere il passaggio 2.1.2).
- Aggiungere 300 ml di acqua distillata nella dieta secca e mescolare accuratamente la miscela dietetica.
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Risultati
La Figura 4 mostra i risultati rappresentativi dell'allevamento in laboratorio su piccola scala di G3 Ganaspis brasiliensis utilizzando due diverse densità parassitoidi (sei o 10 coppie) e due diversi tempi di esposizione (5 o 10 giorni) presso la struttura di quarantena dell'USDA-ARS Beneficial Insects Introduction Unit (Newark, Delaware). Ci sono state 14 repliche per ogni combinazione di densità parassitoide e tempo di esposizione. In totale, i 64 palloni hanno prodotto 4.018 ves.......
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Discussione
La ricerca a lungo termine e le successive emissioni sul campo di un agente di controllo biologico dipendono dalla disponibilità di tecniche di allevamento efficaci ed economiche. I metodi descritti in questo studio hanno dimostrato di essere protocolli efficienti sia per l'allevamento su piccola scala che su larga scala di Ganaspis brasiliensis. Il protocollo di allevamento su piccola scala è stato sviluppato nel corso di diversi anni per ottimizzare la quantità di manodopera e ridurre le attrezzature specializ.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno conflitti di interesse da divulgare.
Ringraziamenti
Gli autori ringraziano Lukas Seehausen e Marc Kenis (CABI, Svizzera) per aver gentilmente fornito G1 G. brasiliensis. I finanziamenti in Italia sono stati forniti dalla Provincia Autonoma di Trento, Trento, Italia, e negli Stati Uniti dal National Institute of Food and Agriculture, dal premio USDA Specialty Crops Research Initiative (# 2020-5118-32140), dall'USDA Animal and Plant Health Inspection Service (Farm Bill, fondo 14-8130-0463) e dai fondi di base USDA ARS CRIS (progetto 8010-22000-033-00D). L'USDA è un fornitore di pari opportunità e datore di lavoro e non approva i prodotti menzionati in questa pubblicazione.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Lievito secco attivo | Fleischmanns Yeast, Cincinnati, OH, USA | Nessuno | Utilizzato per coprire la frutta per ridurre la crescita di muffe e migliorare l'attrazione per le mosche |
| Agar batteriologico | Merk Life Science S.r.l., Milano, Italia | A1296 - 5KG | Utilizzato per preparare la soluzione standard |
| candeggina | Drosophila Clorox Company, Oakland, CA, USA | Nessuno | Utilizzato per disinfettare la polpa della frutta |
| Tappo blu | Azer Scientific, Morgantown, PA, USA | ES3837 | Utilizzato per sigillare il tubo consentendo la ventilazione per gli insetti |
| Mirtilli | Grocery Store, Newark, DE, USA | Nessuno | Fornito come frutto ospite per le mosche (possono essere utilizzati anche vari altri frutti) |
| Gabbia per l'allevamento di insetti BugDorm (L24,5 x P24,5 x H63,0 cm) | Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan | 4E3030 | Utilizzato per l'allevamento di parassitoidi (gabbia |
| Gabbia per l'allevamento di insetti BugDorm (L32,5 x P32,5 x H32,5 cm) | Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan | 4E4590 | Utilizzato per l'allevamento di mosche |
| Gabbia per insetti BugDorm (L32,5 x P32,5 x H32,5 cm) | Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan | 4E4545 | Utilizzato per l'allevamento di parassitoidi (gabbia per l'esplosione) |
| Filo di pollo (0,64 cm, 19 gauge) | Everbilt, OH, USA | 308231EB | Utilizzato per sollevare il frutto per consentire la massima ovdeposizione dei parassitoidi |
| Cornmeal | Grocery Store, Trento, TN, Italy | Nessuno | Utilizzato per preparare il rotolo di cotone dentale medio standard Drosophila |
| (1 x 3,8 cm) | Gima S.p.A., Gessate, MI, Italy | 35000 | Utilizzato per fornire acqua ai parassitoidi all'interno del contenitore di stoccaggio |
| Dieta | DrosophilaFrontier Scientific, Newark, DE, USA | TF1003 | Dieta personalizzata utilizzata per allevare mosche |
| Fiala di Drosophila stretta, Polistirene (2,5 x 9,5 cm) | VWR International, LLC., Radnor, PA, US | 75813-160 | Utilizzato per fornire acqua ai parassitoidi all'interno della gabbia |
| Tappi per fiale di Drosophila, acetato di cellulosa (2,5 cm) | VWR International, LLC., Radnor, PA, US | 89168-886 | Utilizzato per fornire acqua ai parassitoidi all'interno della gabbia |
| Pallone di Erlenmeyer (250 mL) | Carolina Biological, Burlington, NC, USA | 731029 | Utilizzato per l'allevamento di mosche e parassitoidi Provetta |
| centrifuga in stile Falcon (50 mL) | VWR International, LLC., Radnor, PA, US | VWRI525-0611 | Modificato per la spedizione di parassitoidi adulti |
| Tappo in schiuma | Jaece Industries, North Tanawanda, NY, USA | L800-C | Utilizzato per sigillare i palloni consentendo la ventilazione per gli insetti |
| per il miele | , Newark, DE, USA | Nessuno | Fornito come cibo per parassitoidi Tappo |
| schiuma di plastica Identi-Plug | Fisher Scientific Company, LLC, Pittsburg, PA, US | 14-127-40E | Utilizzato come alimentatore per parassitoidi e per sigillare il contenitore di stoccaggio |
| Asciugamano di carta industriale | Negozio di alimentari, Newark, DE, USA | Nessuno | Fornito come substrato di pupa per pupe e umidità mitigata |
| Tessuto a rete micron (250 mL) | Rete industriale, Maple Grove, MN, USA | WN0250-72 | Utilizzato per realizzare il coperchio di ventilazione per insetti |
| Lievito alimentare (fiocchi) | Negozio di alimentari, Trento, TN, Italia | Nessuno | Utilizzato per preparare il sottobicchiere di carta medio standard Drosophila |
| (10,2 cm) | Hoffmaster, WI, USA | 35NG26 | Utilizzato come substrato di pupa per mosche e pupe |
| parassitateBicchiere di plastica (Ø 13,3 cm, 800 mL) | Berry Superfos, Taastrup, Danimarca | Unipak 5134 | Modificato per conservare i parassitoidi adulti |
| Coperchio in plastica (Ø 13,3 cm) | Berry Superfos, Taastrup, Danimarca | PP 2830 | Modificato per conservare i parassitoidi adulti |
| Acido propionico | Merk Life Science S.r.l., Milano, Italia | P1386 - 1L | Utilizzato per preparare lo standard Drosophila Medium |
| Saccharose | Negozio di alimentari, Trento, TN, Italia | Nessuno | Utilizzato per preparare la tazza da zuppa media Standard Drosophila |
| con coperchio (475 mL) | StackMan, Vietnam | DC1648 | Utilizzato per larve parassitate per impupare |
| Farina di soia Negozio | di alimentari, Trento, TN, Italia | Nessuno | Utilizzato per preparare la rondella in feltro bianco media standard Drosophila |
| 0,64 cm di spessore, 5 mm ID x 20 mm OD) | Quiklok, Lincoln, NH, US | WFW/.25 x 5 x 20 mm | Utilizzato come anello di alimentazione per parassitoidi |
Riferimenti
- Asplen, M. K., et al. Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities. Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).
- Tait, G., et al.
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Ristampe e permessi
