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Articolo metodologico

Un modello di stenosi della valvola aortica di coniglio indotta da lesione diretta del palloncino

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DOI:

10.3791/65078

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31 marzo 2023

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* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

È necessario un modello animale appropriato per comprendere i meccanismi patologici alla base della stenosi della valvola aortica (AVS) e per valutare l'efficacia degli interventi terapeutici. Il presente protocollo descrive una nuova procedura per lo sviluppo del modello di coniglio AVS tramite una lesione diretta con palloncino in vivo.

Abstract

I modelli animali stanno emergendo come uno strumento importante per comprendere i meccanismi patologici alla base della stenosi della valvola aortica (AVS) a causa della mancanza di accesso a fonti affidabili di valvole aortiche umane malate. Tra i vari modelli animali, i modelli di coniglio AVS sono uno dei più comunemente utilizzati negli studi sugli animali di grandi dimensioni. Tuttavia, i modelli tradizionali di coniglio AVS richiedono un periodo a lungo termine di integrazione alimentare e manipolazione genetica per indurre una stenosi significativa nella valvola aortica, limitandone l'uso negli studi sperimentali. Per affrontare queste limitazioni, viene proposto un nuovo modello di coniglio AVS, in cui la stenosi è indotta da una lesione diretta del palloncino alla valvola aortica. Il presente protocollo descrive una tecnica di successo per l'induzione di AVS nei conigli bianchi neozelandesi (NZW), con procedure passo-passo per la preparazione, la procedura chirurgica e l'assistenza post-operatoria. Questo modello semplice e riproducibile offre un approccio promettente per lo studio dell'inizio e della progressione dell'AVS e fornisce uno strumento prezioso per studiare i meccanismi patologici alla base della malattia.

Introduzione

È sempre più riconosciuto che l'uso di modelli animali appropriati può contribuire a una migliore comprensione dei meccanismi patologici alla base della stenosi della valvola aortica (AVS) a causa della mancanza di accesso a fonti affidabili di valvole aortiche umane malate associate alla progressione della stenosi aortica (SA). Tra i vari modelli animali per lo studio dell'AVS, i conigli sono uno dei modelli AVS di animali di grossa taglia più comunemente usati, e il modello di coniglio AVS è indotto attraverso l'integrazione di colesterolo/vitamina D2 o la manipolazione genetica 1,2,3,4.

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Protocollo

Tutte le procedure di ricerca sugli animali sono state approvate ed eseguite in conformità con la legge sul benessere degli animali da laboratorio, la Guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio e le Linee guida e le politiche per gli esperimenti sugli animali fornite dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali (IACUC) presso il College of Medicine dell'Università Cattolica della Corea (numero di approvazione: CUMC-2021-0176-05). Il presente studio ha utilizzato conigli bianchi neozelandesi maschi di 3 mesi (NZW) del peso di 3,5-4,0 kg, che sono stati mantenuti in condizioni standard in gabbie individuali. I conigli sono stati alimentati c....

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Risultati

Modello di AVS di coniglio indotto da lesione della valvola aortica
Per indurre il modello AVS del conio, per questo studio sono stati utilizzati conigli maschi NZW del peso di 3,5-4,0 kg. Secondo le procedure chirurgiche descritte nella fase 2 (Figura 2), il modello AVS è stato stabilito da una lesione della valvola aortica, che ha provocato la degenerazione meccanica della valvola aortica e la calcificazione. Il gruppo di controllo comprendeva conigli alimentati con una.......

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Discussione

I modelli animali di AVS sono comunemente usati per studiare gli aspetti patologici dell'AVS, tra cui l'inizio e la progressione dell'AVS. Questo protocollo introduce un nuovo modello di AVS di coniglio indotto da una lesione diretta da palloncino alla valvola aortica. In questo studio, il modello di lesione della valvola aortica ha mostrato un significativo ispessimento e calcificazione dei lembini. Rispetto al modello AVS lieve indotto dall'integrazione alimentare, la valvola aortica nel modello di lesione diretta con .......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare con questo lavoro.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato sostenuto da una sovvenzione della National Research Foundation of Korea (NRF) finanziata dal governo coreano (MSIT) (n. 2020R1A4A3079570), dal Ministero dell'Istruzione (n. 2021R1I1A1A01051425) e dal Programma di sviluppo tecnologico strategico industriale (n. 20014873) finanziato dal Ministero del Commercio, dell'Industria e dell'Energia, Repubblica di Corea.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Sutura di seta 3-0AILEESK312
4% paraformaldeide (PFA)IntronIBS-BP031-2
Soluzione rosso alizarinaMillporeTMS-008-C
ASAHI SION BLUE Filo guidaASAHI
Copritavolo posterioreYuhan kimberly80101-30
Dispositivo di sgonfiaggio con palloncinoDemax MedicalDID30s
Bionet Monitor veterinarioBIONETBM3 VET
C-ArmSIEMENS Healthcare GmbHCios alpha
Dieta certificata per conigliPurina53224,7% di olio di cocco idrogenato, 0,5% di colesterolo e 1% Molasse
Curadle Smart IncubatorAutoelexCS-CV206Unità di Terapia Intensiva (ICU)
ErgocalciferolSigma-aldrich E5750Vitamina D2
Fechtner pinza congiuntiva titanioWORLD PRECISSION StrumentoWP1820
PinzeHEBUHB203
GentamicinaShin Poong
Glicopirrolato SamChunDang
Greenflex NSDAI HAN PHARMSoluzione salina normale 500 ml
ematossilinaSigma-aldrich HT1079-1 SET
HeparinJW farmaceutico25.000 U
Set per infusione monousoSWOON MEDICAL
IodioVerde farmaceutico
IodixanolGE HealthcareVisipaqueSoluzione di gonfiaggio (agente di contrasto)
Catetere IV 22 GBD 
Catetere 382423 IV 24 GBD382412
KetoprofeneSamChunDang
Siringa Luer-Lok 10 mLBecton Dickinson Medical
Luer-Lok 3 mLMicroscopio medico
OLYMPUSSZ61
MicrotomoThermoFisher ScientificHM 325
MTSigma-aldrichHT15-1kt
Needel holderSolco009-1304
Portaaghi con blocco e suturaJEUNGDO BIO & PLANTH-1222-18
ParaffinaLK LABKOREAH06-660-107
PBSGibco10010-023
Cloruro di potassio 40Daihan PharmKCl
Prelude Guaina idrofila idealeMERIT MEDICALGuaina PID4F11018SS 4F
PTA Catetere per dilatazione a palloncinoBoston ScientificH749-3903280208-0Catetere a palloncino 8,0 mm
RompunElancoXylaxine
garza sterileDAE HAN Medical10 cm x 20 cm 
Guanti chirurgiciAnsellCamice chirurgico Ansell
Yuhan kimberly90002-02
Forbici chirurgicheNopa, GermaniaAC020/16
Nastro chirurgico3M micopore1530-1
Siringa 1 mL Siringamedica
10 mLShin Chang Medical
Cassetta tissutaleScilav koreaCas3003
Trasduttore in gelSUNGHEUNGSH102
TridolYuhan Corp.Ultrasuoni Tramadol HCl
PhilpsAffiniti 50
Kit colorante Von KossaAbcamab105689
Zoletil 50Virbac koreaTiletamine & zolazepam
di Siringa Becton Dickinson Kit colorante Shin Chang

Riferimenti

  1. Aliev, G., Burnstock, G. Watanabe rabbits with heritable hypercholesterolaemia: A model of atherosclerosis. Histology and Histopathology. 13 (3), 797-817 (1998).
  2. Cimini, M., Boughner, D. R., Ronald, J. A., Aldington, L., Rogers, K. A.

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Ristampe e permessi

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