Articolo metodologico

Rilevamento rapido della virulenza e della tipizzazione dell'Helicobacter pylori utilizzando la tecnologia di marcatura a punti quantici

DOI:

10.3791/67792

⸱

13 giugno 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory Medicine, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tra i numerosi metodi diagnostici per l'Helicobacter pylori, l'immunofluorescenza a punti quantici è in grado di tipizzare e rilevare rapidamente l'Helicobacter pylori, fornendo una base per le decisioni cliniche sul trattamento. Questo articolo fornisce un'introduzione dettagliata al valore applicativo della tecnologia dei punti quantici nella tipizzazione e nel rilevamento di Helicobacter pylori.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Presentiamo un metodo basato sulla tecnologia di marcatura a punti quantici per rilevare rapidamente la virulenza di Helicobacter pylori ed eseguire la tipizzazione, con l'obiettivo di superare i limiti dei metodi diagnostici convenzionali e fornire una base per un trattamento clinico personalizzato. Un kit è stato progettato utilizzando il metodo del sandwich a doppio antigene. Ciò ha comportato una serie di passaggi meticolosi, tra cui la creazione di sistemi di reazione tampone e la conduzione di processi di attivazione e accoppiamento per le reazioni antigene-anticorpo durante la preparazione del kit. Inoltre, esistevano procedure specifiche per la raccolta, l'elaborazione e le operazioni di analisi dei campioni per determinare lo stato di infezione e il tipo di virulenza di Helicobacter pylori. Stabilendo modelli di dati per diversi risultati (negativi, di tipo II e di tipo I), è stata verificata l'efficacia della tecnologia dei punti quantici nel rilevamento della tipizzazione. Nel caso di campioni negativi, i valori del segnale erano deboli o assenti nelle aree di rilevamento pertinenti. Per i campioni di tipo II, è stato osservato un modello specifico di valori di segnale positivi e negativi per diversi anticorpi, mentre per i campioni di tipo I è stato notato un insieme distinto di valori di segnale positivi corrispondenti agli anticorpi chiave. Inoltre, la sua applicazione in studi relativi alla gastrite cronica e al cancro gastrico ha dimostrato il suo valore nel fungere da indicatore di screening. Il metodo basato su punti quantici presenta vantaggi come una migliore sensibilità e specificità rispetto ai metodi diagnostici tradizionali. Tuttavia, deve anche affrontare sfide come i potenziali impatti derivanti dal tempo di conservazione dei campioni e i costi relativamente elevati. Tuttavia, con le continue innovazioni tecnologiche, si prevede che in futuro svolgerà un ruolo più significativo in campo biomedico per il rilevamento dell'Helicobacter pylori e la diagnosi delle malattie correlate.

Introduzione

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

L'Helicobacter pylori (H. pylori) è un batterio Gram-negativo che si trova tra la mucosa pilorica e la sottomucosa dell'antro gastrico 1,2. Nel 1994, l'Organizzazione Mondiale della Sanità/Agenzia Internazionale per la Ricerca sul Cancro (OMS/IARC) lo ha classificato come cancerogeno di Classe I. A seconda che esprimano tossine della citotossina vacuolare A (VacA) e del gene A correlato alla citotossina (CagA), si dividono in due tipi: ceppo virulento di infezione da H. pylori di tipo I: più virulento e più dannoso per i pazienti. Strettamente correlata all'incidenza di ulcere gastriche e duodenali e di cancro gastrico, l'infezione da H. pylori di tipo II coinvolge ceppi a bassa virulenza con debole patogenicità, che generalmente si manifestano come lieve indigestione 3,4. I ricercatori hanno scoperto che il tasso di infezione del tipo I è superiore a quello del tipo II, con tassi di infezione di tipo I e di tipo II rispettivamente del 72,4% e del 27,6%,5. Il rilevamento rapido dei tipi di H. pylori, in particolare la distinzione tra tipo I e tipo II, è fondamentale per il trattamento clinico e la prevenzione delle malattie.

La gastrite cronica causata dall'infezione da H. pylori può portare a gravi malattie dell'apparato digerente, come la gastrite atrofica, l'ulcera peptica, l'adenocarcinoma gastrico e il linfoma del tessuto linfoide associato alla mucosa (MALT) nei pazienti infetti 6,7,8. Il Global Burden of Disease Study del 2014 prevede che a partire dal 2010, circa 3,5 decessi ogni 100.000 persone saranno causati dall'ulcera peptica ogni anno. I rapporti di ricerca hanno rilevato che quasi 800.000 nuovi casi di cancro gastrico in tutto il mondo nel 2018 erano correlati all'infezione da H. pylori 10. Negli ultimi anni, gli studi hanno scoperto che l'infezione da H. pylori è anche strettamente correlata a malattie neurologiche, malattie cardiovascolari, diabete, ecc. L'infezione da H. pylori è diventata un problema di salute pubblica globale. Pertanto, il rilevamento accurato dell'infezione da H. pylori è importante per il rilevamento di malattie correlate. Il trattamento è fondamentale, rendendo il rilevamento accurato di H. pylori un punto di riferimento per la ricerca.

Poiché il tasso di infezione da H. pylori è elevato in Cina, il rilevamento tempestivo e accurato dell'infezione da H. pylori è utile per la diagnosi precoce e il trattamento e ha un significato positivo per la prevenzione e il trattamento del cancro gastrico. Esistono vari metodi per rilevare l'infezione da H. pylori, inclusi metodi invasivi come il test rapido dell'ureasi (RUT), la microscopia colorata di sezioni di tessuto mucoso gastrico, l'endoscopia e il test del respiro con urea C13 o C14. (UBT), test dell'antigene fecale (SAT) di H. pylori e altri metodi non invasivi 11,12,13. Questi metodi di rilevamento presentano alcune limitazioni. Ad esempio, l'esame istologico può dare risultati falsi negativi a causa della qualità e delle dimensioni del campione bioptico selezionato nel sito della biopsia; il test del respiro può essere influenzato dal recente uso da parte del paziente di antibiotici o inibitori della pompa protonica (PPI) e dall'influenza di vari fattori di influenza 11,14,15. In considerazione dei limiti dei metodi tradizionali, come la sensibilità e la specificità insufficienti e dispendiose in termini di tempo, lo sviluppo di metodi diagnostici rapidi basati sull'immunofluorescenza a punti quantici (QD-IF) ha mostrato un grande potenziale applicativo nel campo dei biosaggi16,17. L'analisi QD-IF introduce sonde fluorescenti a punti quantici per ottenere la rilevazione specifica di bersagli molecolari attraverso il legame specifico a bersagli molecolari18,19.

I punti quantici sono nanoparticelle semiconduttrici con un raggio inferiore o vicino al raggio dell'eccitone di Bohr, generalmente da 1 a 10 nm. I punti quantici sono usati come sonde fluorescenti. I segnali di fluorescenza sono generati da punti quantici eccitanti e i dati quantitativi sono ottenuti misurando il dispositivo. I suoi vantaggi includono un'ampia gamma di lunghezze d'onda di eccitazione, lunghezze d'onda di emissione strette, dimensioni della fluorescenza regolabili, elevata sensibilità, buona stabilità ottica, lunga durata della fluorescenza, grande spostamento di Stokes ed elevata efficienza di fluorescenza quantistica. I punti quantici superano le carenze di altri marcatori, come il breve tempo di luminescenza, i requisiti ambientali precisi, la scarsa ripetibilità, la scarsa stabilità (come i coloranti fluorescenti), l'inattivazione enzimatica e la bassa sensibilità. Il test immunologico a fluorescenza a punti quantici combina i vantaggi dell'immunodosaggio a fluorescenza a punti quantici e del saggio immunologico a fluorescenza con biomarcatori e presenta i vantaggi di semplicità, rapidità, elevata specificità e alta sensibilità20,21.

Gli strumenti diagnostici tradizionali per la rilevazione di H. pylori, tra cui la coltura batterica, il test dell'urea e i test sierologici, hanno i loro limiti. La coltura batterica richiede molto tempo e condizioni di laboratorio rigorose, che spesso si traducono in una sensibilità relativamente bassa a causa delle esigenti esigenze di crescita di H. pylori. Il test del respiro con urea può produrre risultati falsi negativi in determinate circostanze, come l'uso recente di antibiotici o inibitori della pompa protonica 22,23,24. In alcuni casi, i test sierologici possono solo indicare l'esposizione passata piuttosto che lo stato attuale dell'infezione e mancano della capacità di distinguere tra i diversi tipi di virulenza dell'agente patogeno.

Al contrario, la tecnologia Quantum Dot Immunofluorescence (QD-IF) è emersa come un'alternativa promettente. QD-IF combina le eccellenti proprietà ottiche dei punti quantici, come l'elevata intensità di fluorescenza, gli spettri di emissione stretti e la buona fotostabilità, con la specificità delle reazioni immunologiche. Ciò consente di rilevare in modo rapido e sensibile gli antigeni o gli anticorpi di H. pylori nei campioni biologici. Inoltre, ha il vantaggio unico di essere in grado di identificare contemporaneamente il tipo di virulenza del ceppo infettante, cosa che i metodi tradizionali faticano a raggiungere. Colmando questa lacuna nel processo diagnostico, la tecnologia QD-IF ha un grande potenziale per rivoluzionare il modo in cui diagnostichiamo e gestiamo le infezioni da H. pylori , facilitando interventi medici più personalizzati ed efficaci.

Nel complesso, vi è un urgente bisogno clinico di un metodo diagnostico efficace e non invasivo in grado di rilevare contemporaneamente l'infezione da H. pylori e i suoi tipi di virulenza (tipo I e tipo II). Questo articolo si propone di utilizzare il metodo QD-IF per valutare la presenza di infezione da H. pylori in campioni di tessuto e costruire un metodo rapido e accurato per rilevare i tipi di infezione da H. pylori . Il rilevamento rapido dell'infezione da H. pylori e dei suoi tipi di virulenza è di grande importanza per ottenere una medicina di precisione, migliorare gli effetti del trattamento, ridurre il rischio di malattie correlate e prevenire il cancro gastrico. Fornisce una base teorica scientifica per il personale clinico per scegliere metodi accurati di rilevamento dell'infezione da H. pylori .

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Protocollo

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Questo studio (KY2025-191-01) è stato condotto aderendo alle linee guida del comitato etico per la ricerca umana dell'Ospedale del popolo provinciale del Guangdong (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University. Questo articolo è conforme alla domanda di esenzione dal consenso informato.

NOTA: Questo studio mira a utilizzare la tecnologia dei punti quantici per progettare e sviluppare un kit per diagnosticare se le specie sanguigne dei partecipanti contengono anticorpi Helicobacter pylori ureasi (ureasi), anticorpi vacuolari della citotossina A (VacA) e anticorpi della tossina del gene A correlato alla citotossina (CagA) per determinare se H. pylori è infetto e se il ceppo infetto è di tipo I o di tipo II. Questo kit progettato utilizza un metodo sandwich a doppio antigene per misurare gli anticorpi dell'ureasi Helicobacter pylori , gli anticorpi CagA e gli anticorpi VacA. Quando il campione di prova contenente la sostanza bersaglio viene aggiunto al tampone del campione, scorre attraverso il tampone quantico e la membrana attraverso l'azione del sifone, formando un complesso antigene-anticorpo in fase solida. Dopo l'individuazione, la linea di rilevamento e la massa vengono lette rispettivamente dall'analizzatore. Il valore del segnale della linea di controllo viene utilizzato per determinare lo stato negativo e positivo dell'anticorpo Urase, dell'anticorpo CagA e dell'anticorpo VacA in base ai valori del segnale T/C di ciascuno dei tre anticorpi. Il diagramma di progettazione è illustrato nella Figura 1.

figure-protocol-1
Figura 1: Diagramma schematico della scheda di test di tipizzazione di H. pylori . La figura mostra la struttura e la composizione della scheda di prova. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

1. Preparazione del kit

  1. Istituzione del sistema di reazione tampone dell'acido etansolfonico (MES) QDs-2-(n-morfina)
    1. Equilibrare la soluzione originale di QDs a temperatura ambiente (RT). Quindi, aspirare 1000 μL e aggiungere un volume uguale di 2x soluzione MES (la concentrazione finale di MES era 10 mmol/L).
    2. Mescolare, agitare e sonicare per 30-3 minuti.
  2. Attivazione
    1. Aggiungere 20 mg/mL di 1-etil-3- (3-dimetilamminopropil)carbodiimmide (EDC)/ N-idrossisuccinimide (NHS) nel sistema tampone QDs-MES ad un rapporto di 10:1. Mescolare, agitare e sonicare per 3 minuti.
    2. Porre la soluzione preparata in un bagnomaria a 37 °C per 15 minuti e centrifugare a 13.000 × g per 20 minuti.
    3. Rimuovere il surnatante dalla soluzione centrifugata e scioglierlo nuovamente con 1 soluzione MES. Soffiare ripetutamente la soluzione con una pipetta, agitarla per mescolarla uniformemente e farla sonicare per 3 minuti.
    4. Porre la soluzione di cui sopra in un bagnomaria a 37 °C per 15 minuti e centrifugare a 13.000 × g per 20 minuti.
  3. Accoppiamento
    1. Aggiungere 0,03 mg di antigene dell'ureasi, antigene CagA, antigene VacA e IgG anti-topo di capra a 1000 μl della soluzione di attivazione, pipettare ripetutamente la punta, agitare e sonicare per 3 minuti.
    2. Porre la soluzione di cui sopra in un bagnomaria a 37 °C e reagire per 3 ore.
  4. Chiusura e stoccaggio
    1. Aggiungere 100 μl di soluzione bloccante (Tabella supplementare 1) e incubare per 1 ora.
    2. Centrifugare la soluzione bloccata a 13.000 × g per 15 minuti.
    3. Rimuovere il surnatante dalla soluzione centrifugata, aggiungere 750 μl di soluzione di ricostituzione (Tabella supplementare 1), pipettare, agitare e sonicare ripetutamente per 5 minuti, quindi conservare a 4 °C.

2. Preparazione delle lastre rivestite

  1. Preparazione dei pad quantici
    1. Diluire il complesso antigenico di H. pylori marcato con punti quantici 1:5 con tampone di diluizione a punti quantici per preparare la quantità richiesta in base alla produzione in lotti.
    2. Prendi il tampone quantico e spruzza uniformemente una certa quantità di complesso antigenico di H. pylori marcato con punti quantici sul tampone utilizzando uno spruzzatore di pellicola e asciugalo a 37 °C per 30 minuti.
  2. Preparazione della membrana
    1. Utilizzare il buffer di stampa per diluire i materiali di rivestimento della linea di controllo e della linea di prova e preparare la quantità richiesta in base al volume di produzione del lotto.
    2. Incollare la membrana in nitrocellulosa sulla lastra di cloruro di polivinile (PVC), utilizzare uno spruzzatore d'oro a graffio di pellicola per rivestire uniformemente la linea di controllo qualità e testare i materiali della linea sulla membrana e asciugare a 57 °C per 24 ore.

3. Assemblaggio

  1. Incollare in sequenza il quantum e i tamponi del campione sulla piastra in PVC rivestita con film.

4. Taglio a strisce

  1. Utilizzare un tagliastrisce per tagliare la tavola di grandi dimensioni assemblata in strisce reattive.

5. Imballaggio interno

  1. Completare l'imballaggio in base alle esigenze di composizione del kit.
    NOTA: I componenti del kit sono i seguenti: (i) Scheda di prova: è costituita da un guscio di striscia reattiva e una striscia reattiva. La striscia reattiva è costituita da una piastra in PVC, un tampone per campioni, un tampone quantico (un complesso antigenico marcato con punti quantici; il complesso contiene l'antigene dell'ureasi, l'antigene CagA, l'antigene VacA e le IgG di topo), una membrana di nitrocellulosa (l'area di rilevamento è fissata con l'antigene VacA, l'antigene CagA e l'antigene dell'ureasi (espressione eucariotica dell'antigene ricombinante) e l'area di controllo qualità è rivestita con IgG anti-topo di capra (poli-anticorpo di capra)), e carta assorbente. Diverse specifiche di imballaggio hanno diverse quantità di schede di prova. Per il reagente di una persona è necessaria una scheda di test. (ii) Scheda SD: 1 pezzo/scatola. I componenti della scheda di test e della scheda SD (Secure Digital) di lotti diversi di kit di test non devono essere mescolati.

6. Elaborazione del campione

NOTA: Per la raccolta dei campioni, fare riferimento alle procedure operative del National Clinical Laboratory.

  1. Raccogliere il sangue in una provetta di gel di separazione. Fare attenzione a evitare l'emolisi.
  2. Testare il campione di siero separato entro 4 ore a temperatura ambiente (RT). Se non può essere testato in tempo, conservare il campione a 2-8 °C per 3 giorni. Per un lungo periodo (entro 1 anno), sigillarlo e conservarlo a una temperatura inferiore a -20 °C.
  3. Ripristinare i campioni in RT e mescolarli accuratamente prima dell'uso.
    NOTA: I campioni congelati e scongelati devono essere completamente scongelati prima dell'uso e il numero di cicli di congelamento-scongelamento non deve superare i cinque. Ripetuti campioni congelati e scongelati possono causare il deterioramento dell'analita e devono essere evitati. Anche i campioni di chilo e di emolisi gravi influenzeranno il test e dovrebbero essere evitati.

7. Procedura per la prova

  1. Estrarre il kit di reagenti e i materiali per il controllo qualità per equilibrare a RT.
  2. Preparazione del campione: Centrifugare i campioni di sangue intero a 1467 g per 10 minuti.
  3. Verificare che il numero di lotto della scheda SD corrisponda a quello del kit di reagenti. Inserire la scheda SD nello strumento per la calibrazione automatica.
  4. Accendere lo strumento e il computer operativo. Avvia il software designato e seleziona il modulo Test . Scegliere Impostazioni di inizializzazione per inizializzare lo strumento e attendere il completamento con successo.
  5. Accedere all'area dei reagenti dello strumento e rimuovere lo slot della scheda di test. Aprire il kit di reagenti e selezionare il numero richiesto di schede di test.
  6. Aprire le buste di alluminio delle schede di prova e posizionarle nella fessura secondo l'orientamento indicato. Reinserire lo slot della scheda nell'area dei reagenti dello strumento.
  7. Test di controllo qualità (QC)
    1. All'interno del modulo Test , selezionare Inserimento manuale. Fare clic su Immissione informazioni e inserire le informazioni specifiche sul materiale QC. Fare clic su Genera. Posizionare i materiali QC nell'apposito rack per campioni, assicurandosi che l'ordine e l'orientamento siano corretti.
    2. Fare clic su Avvia test per avviare il test QC. L'ago del campione dello strumento aspirerà 80 μL del campione e lo dispenserà verticalmente nel pozzetto del campione. Lo strumento inizierà automaticamente la temporizzazione dopo l'erogazione del campione. Dopo 15 minuti, lo strumento eseguirà il rilevamento, leggerà i valori di misurazione ed emetterà i risultati.
  8. Test di esempio: all'interno del modulo Test , selezionare BIS bidirezionale. Posizionare i campioni da testare nell'apposito rack per campioni, assicurandosi che l'ordine e l'orientamento siano corretti. Fare clic su Avvia test. Allo stesso modo, lo strumento aspirerà 80 μL di campione da ciascuno di essi e li elaborerà in modo identico al processo QC.
  9. Una volta completati i test, rimuovere le schede di test usate dallo strumento e smaltirle come rifiuti sanitari.

8. Controllo di qualità

  1. H. pylori negativo: controllare e assicurarsi che i risultati dei prodotti di riferimento negativi Helicobacter pylori , vale a dire l'anticorpo ureasi, l'anticorpo CagA e l'anticorpo VacA, siano tutti negativi.
  2. Infezione da H. pylori di tipo II: controllare e assicurarsi che il prodotto di riferimento Helicobacter pylori di tipo II, ovvero l'anticorpo ureasi, sia positivo e che i risultati dell'anticorpo CagA e dell'anticorpo VacA siano tutti negativi.
  3. Infezione da H. pylori di tipo I: controllare e assicurarsi che il prodotto di riferimento Helicobacter pylori di tipo I, ovvero l'anticorpo ureasi sia positivo, l'anticorpo CagA e/o l'anticorpo VacA siano positivi.

9. Analisi dei risultati

  1. Infezione di tipo II con ceppi deboli o non tossigeni: quando la lettura degli anticorpi ureasi è positiva e le letture degli anticorpi CagA e VacA sono negative, interpretarla come un'infezione con un ceppo debole o non tossigenico di H. pylori .
  2. Infezione di tipo I con ceppi produttori di tossine altamente patogeni: quando la lettura dell'anticorpo ureasi è positiva e la lettura dell'anticorpo CagA o dell'anticorpo VacA è positiva, o entrambi sono positivi, interpretarla come un'infezione con un ceppo altamente patogeno produttore di tossine H. pylori .
  3. Negativo: quando le letture dell'anticorpo ureasi, dell'anticorpo CagA e dell'anticorpo VacA sono tutte negative, interpretarlo come nessuna infezione da ceppi di H. pylori .
  4. Non valido: quando lo strumento giudica il risultato non valido, verificare la presenza di operazioni errate o guasti al kit di reagenti e riprovare la procedura.

10. Taratura dell'analizzatore di fluorescenza

  1. Innanzitutto, accendere l'analizzatore e lasciarlo riscaldare per circa 15 minuti per stabilizzarne le prestazioni. Quindi, inserire lo standard di calibrazione fornito dal produttore nel portacampioni.
  2. Successivamente, accedere alla funzione di calibrazione sull'interfaccia dell'analizzatore e avviare il processo. L'analizzatore rileverà automaticamente la fluorescenza dello standard e regolerà i suoi parametri interni di conseguenza in modo che corrispondano ai valori di riferimento preimpostati.
  3. Successivamente, rimuovere lo standard di calibrazione e inserire un campione bianco per verificare che le letture rientrino nell'intervallo accettabile.
  4. La ripetizione regolare di questi passaggi secondo il programma consigliato aiuta a mantenere l'accuratezza dell'analizzatore per misure affidabili.

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Risultati

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La Figura 2 mostra il principio di funzionamento dell'immunoanalizzatore a fluorescenza a punti quantici. È costituito principalmente da una sorgente luminosa di eccitazione, una sorgente luminosa ricevente, un modulo di circuito di conversione fotoelettrica, un circuito di elaborazione del segnale, un circuito di conversione del valore AD e un modulo di calcolo dell'elaborazione del segnale; La sorgente luminosa di eccitazione genera marcatori fluorescenti. Assorbe la luce monocromatica con...

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Discussione

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Gli attuali metodi diagnostici per l'Helicobacter pylori si dividono principalmente in due categorie: invasivi e non invasivi26. Metodi come il test rapido dell'ureasi (RUT), l'istologia, la biologia molecolare e la coltura batterica presentano limitazioni in termini di invasività, sensibilità, specificità, vincoli di tempo, costi, requisiti delle apparecchiature, gestione dei campioni e monitoraggio in tempo reale. Più comuni sono le diagnosi rapide ...

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Dichiarazioni

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Gli autori dichiarano di non avere conflitti di interesse.

Ringraziamenti

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Questa ricerca è stata finanziata dal Guangdong Provincial Basic and Applied Basic Research Fund Project (sovvenzione n.: 2021A1515220022, 2022A1515220023).

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
1-(3-dimetilamminopropil) -3-etilcarbodiimmide cloridrato (EDC)Sigma25952-53-85 g/bottiglia
2-(n-morfina) acido etansolfonico (MES)Sigma145224-94-8100 g/bottiglia
CentrifugaSigma3K15
Fluorescenza Immuno AnalyzerGuangzhou Labsim Biotech Co., LtdProvincia del Guangdong Dispositivo medico n.
Kit per il test di tipizzazione dell'Helicobacter pylori Chongqing iSIA BIO-Technology Co., LtdRegistrazione nazionale del dispositivo medico n. 20203400330QDs Metodo di immunofluorescenza
Sale sodico di N-idrossitiosuccinimide (NHS)Sigma106627-54-71 g/flacone
2017221743

Riferimenti

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Tacconelli, E., et al. research and development of new antibiotics: WHO priority list of antibioticresistant bacteria and tuberculosis. Lancet Infect Dis. 18 (3), 318-327 (2018).
  2. Kamboj, A. K., et al. Helicobacter pylori: past, present, and future of treatment. Mayo Clin Proc. 92 (4), 599-604 (2017).
  3. Yamaoka, Y. Disease mechanisms: Helicobacter pylori virulence factors. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 7 (11), 629-641 (2010).
  4. Sharndama, H. C., Mba, I. E. Helicobacter pylori: an updated overview on its virulence and pathogenesis. Braz J Microbiol. 53 (1), 33-50 (2022).
  5. Lin, Y., et al. Infection status of type I and type II Helicobacter pylori in areas with high incidence of gastric cancer and its impact on gastrin and pepsinogen levels. World J Gastroenterol. 26 (25), 3673-3685 (2020).
  6. Li, Y. H., et al. Global prevalence of Helicobacter pylori infection from 1980 to 2022: a systematic review and metaanalysis. Lancet Gastroenterol Hepatol. 8 (6), 553-564 (2023).
  7. Karbalaei, M., Keikha, M. Rescue effect of lactobacillicontaining bismuth regimen on Helicobacter pylori treatment failure. New Microbiol New Infect. 42, 100904(2021).
  8. Malfertheiner, P., et al. Helicobacter pylori infection. Nat Rev Dis Primers. 9 (1), 19(2023).
  9. Stewart, B., et al. Global burden of disease requiring emergency surgery. Br J Surg. 101 (1), e9-e22 (2014).
  10. de Martel, C., et al. The global burden of cancer attributable to infection in 2018: a global incidence analysis. Lancet Glob Health. 8 (2), e180-e190 (2020).
  11. Godbole, G., et al. Review: diagnosis of Helicobacter pylori infection. Helicobacter. 25 (S1), e12735(2020).
  12. Lee, Y. C., et al. Diagnosis and treatment of Helicobacter pylori infection. Annu Rev Med. 73 (1), 183-195 (2022).
  13. Fischbach, W., Malfertheiner, P. Helicobacter pylori infection. Ger Int Med J. 115, 429-436 (2018).
  14. Zhang, C., et al. Survey on the quantitative detection of serum Helicobacter pylori antibodies in clinical laboratories in my country. J Clin Lab Anal. 36 (1), e24069(2021).
  15. Wan, W. S., et al. Improving the detection rate of Helicobacter pylori in chronic gastritis biopsies: a comparative analysis of H&E, methylene blue, WarthinStarry, immunohistochemistry, and quantum dot immunohistochemistry. Front Oncol. 13, 1229871(2023).
  16. Bodo, J., et al. Quantitative in situ detection of phosphoproteins in fixed tissues using quantum dot technology. J Histochem Cytochem. 57 (7), 701-708 (2009).
  17. Chen, C., et al. Quantum dotbased immunofluorescence technology for quantitative determination of HER2 expression in breast cancer. Biomaterials. 30 (15), 2912-2918 (2009).
  18. Kuang, H., et al. Recent developments in quantum dot analytical applications. TrAC Trends Anal Chem. 30 (10), 1620-1636 (2011).
  19. Park, Y., et al. Medically transformable quantum dots for biosensing and imaging. J Photochem Photobiol C Photochem Rev. 30, 51-70 (2017).
  20. SanmartinMatalbobs, J., et al. Semiconductor quantum dots as target analytes: properties, surface chemistry and detection. Chem Detect Nanomaterials. 12 (14), 2501(2022).
  21. Katan, C., Mercier, N., Even, J. Quantum and dielectric confinement effects in lowerdimensional hybrid perovskite semiconductors. Chem Rev. 119 (5), 3140-3192 (2019).
  22. Chinese Medical Association Branch of Health Management. Physical examination population 13C expert consensus on technical specifications for urea breath tests. Health Exam Manag. 2 (2), 94-96 (2021).
  23. National Clinical Medical Research Center for Digestive Diseases. Expert consensus on clinical application of Helicobacter pyloriurea breath test (2020). Chin J Health Manag. 14 (2020), 510-513 (2020).
  24. Zhang, Y., et al. The influence factors of Helicobacter pylori infection were detected by urea breath test. Chin J Clin Gastroenterol. 32 (3), 197-202 (2020).
  25. Lin, B., et al. Diagnostic value of gastric function triad and Helicobacter pylori typing in chronic gastritis and gastric cancer. Labeled Immunoassays Clin Med. 30 (1), 74-76 (2023).
  26. Cardos, A. I., et al. Evolution of diagnostic methods for Helicobacter pylori infection: from traditional tests to hightech, advanced sensitivity and identification tools. Diagnostics. 12 (508), 1-23 (2022).
  27. Ding, S. Z., et al. Chinese consensus report on familybased Helicobacter pylori infection control and management (2021 edition). Gut. 71 (2), 238-253 (2021).
  28. Wan, W., et al. Comparison of quantum dot immunofluorescence histochemistry and conventional immunohistochemistry in detecting Helicobacter pylori infection in paraffinembedded tissue of gastric biopsy. J Mol Histol. 52, 461-466 (2021).
  29. Zhou, Y., et al. Development of a fast and sensitive doubleantigen sandwich lateral flow immunoassay based on quantum dot nanobeads and its clinical performance in detecting SARSCoV2 total antibodies. Sens Actuators B Chem. 343, 130139(2021).
  30. Liu, H., et al. Consistency analysis of highsensitivity cardiac troponin I in peripheral blood and venous blood using quantum dot immunofluorescence method and its clinical application in acute myocardial infarction. J Chest Dis. 14 (4), 1267-1274 (2022).
  31. Xirong, W., et al. Development of quantum dotbased lateral flow immunoassay test strips for rapid and sensitive detection of SARSCoV2 neutralizing antibodies. Sci Rep. 13, 22253(2023).
  32. Purwidyantri, A., et al. Programmable graphenebased microfluidic sensor for DNA detection. Sens Actuators B Chem. 367, 132044(2022).
  33. Lee, K. S., Wagner, M., Stocker, R. Ramanbased sorting of microbial cells to link functions to their genes. Microb Cell. 7 (3), 62-65 (2020).
  34. Hu, C., et al. Design and fabrication of carbon dots for energy conversion and storage. Chem Soc Rev. 48 (8), 2315-2337 (2019).

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Ristampe e permessi

Richiedi il permesso di riutilizzare il testo o le figure di questo articolo JoVE

Richiedi permesso

Tag

Rilevazione di Helicobacter pyloritipizzazione della virulenzalegame antigene anticorporeagenti per immunocromatografiadoppio sandwich antigenicoscreening della gastrite cronicabiomarcatori del cancro gastricocaratteristica operativa del ricevitoresensibilit diagnostica

Articoli correlati