Questo studio descrive un metodo di legatura in nylon 6-0 modificato per indurre la parodontite nei topi, che è altamente riproducibile e rappresenta un'alternativa per i ricercatori per studiare la malattia parodontale dal suo sviluppo alle sue conseguenze patologiche.
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Articolo metodologico
Modello murino di parodontite avanzata indotta da legatura di nylon nel secondo molare superiore
In questo articolo
Sommario
Abstract
La malattia parodontale (PD) è una malattia infiammatoria che colpisce i tessuti di supporto dei denti ed è una delle malattie più diffuse in tutto il mondo. La sua forma grave, la parodontite, porta alla distruzione dei tessuti molli, dei denti e delle ossa. Modelli animali di parodontite sono stati sviluppati utilizzando primati, cani, maiali in miniatura e topi. Tra questi, il modello murino indotto dalla legatura offre vantaggi come la rapida progressione della malattia, la riproducibilità, la prevedibilità e il basso costo, replicando efficacemente gli aspetti chiave della parodontite umana. I modelli murini che utilizzano legature hanno fornito preziose informazioni sui microambienti microbiologici e immunologici del tessuto parodontale, evidenziando il ruolo critico dei biofilm nelle risposte immunitarie e la loro associazione con le malattie sistemiche. Questo studio presenta un metodo di legatura in nylon modificato per indurre la parodontite nei topi. La modifica prevede l'utilizzo di una sutura di nylon invece di una sutura di seta e il suo posizionamento sotto l'area di contatto interprossimale piuttosto che farla passare attraverso il punto di contatto. Questo approccio semplifica la tecnica inducendo efficacemente la parodontite. La metodologia dettagliata per il posizionamento della sutura è illustrata graficamente e la progressione della parodontite è dimostrata attraverso analisi istologiche e istometriche.
Introduzione
La malattia parodontale (PD) è un disturbo infiammatorio dei tessuti di sostegno dei denti ed è tra le malattie più diffuse al mondo1; è stato riportato che l'incidenza della malattia di Parkinson varia dal 20% al 50% in tutto il mondo2. La malattia di Parkinson ha diversi gradi di progressione; la sua forma lieve, chiamata gengivite, colpisce solo i tessuti molli e la sua forma grave, chiamata parodontite (PT), colpisce i tessuti duri come l'osso3. Poiché la PT è una malattia infiammatoria, deve essere considerata una risposta immunitaria co....
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Protocollo
Tutte le procedure che coinvolgono animali da esperimento sono state condotte nel rigoroso rispetto del "Quadro etico per la ricerca biomedica sugli animali da laboratorio", seguendo lo standard ufficiale messicano NOM-062-ZOO-1999. Questo studio è stato approvato dal comitato etico della Facultad de Estudios Superiores Iztacala (FES-Iztacala) con protocollo CE/FESI/072024/1765. I topi sono stati alloggiati in camere per animali con libero accesso a cibo e acqua in un ambiente privo di agenti patogeni presso la struttura per animali FES-Iztacala. Questo protocollo è una modifica del metodo precedentemente descritto da Abe et
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Risultati
Questa metodologia consente ai topi indotti di sviluppare la parodontite (PT) dalla seconda settimana in poi. I topi sono stati monitorati settimanalmente per verificare la presenza della legatura. L'eutanasia è stata eseguita il giorno 30. Sono state valutate le caratteristiche cliniche di tutti i gruppi. Il gruppo di controllo ha mantenuto nel tempo caratteristiche normali, come il colore e la struttura della gengiva marginale. Rispetto a quelli del gruppo CTL, i tessuti del gruppo PT hanno mostrato infiammazione, sang.......
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Discussione
Diversi modelli animali di parodontite sono stati utilizzati per valutare diversi aspetti, come le risposte microbiologiche e immunitarie, e presentano alcune somiglianze con la malattia umana43. Questi risultati forniscono prove del quadro della malattia parodontale, come il ruolo dei biofilm, la risposta immunitaria e le interazioni con le condizioni sistemiche44,45.
I modelli.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano che non vi sono conflitti di interesse in merito alla pubblicazione di questo articolo.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato finanziato in parte dal Consiglio per la Scienza e la Tecnologia dello Stato del Messico (COMECYT) numero di sovvenzione [FICDTEM-2021-072] e dal Programma di sostegno per i progetti di ricerca e l'innovazione tecnologica (PAPIIT)-UNAM, numero di sovvenzione [IN-217021]. Ringraziamo il programma di specializzazione in Endoperiodontología, FES Iztacala, UNAM per le strutture fornite per realizzare questo video e Rosalba Yañez Ortiz, DDS, per il suo supporto nella realizzazione di questo video. Alcune figure sono state create con il programma Biorender (Contratto numero ME282NWCI1).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Soluzione di NaCl allo 0,9% | PiSA | Risciacquo mascelle | |
| Sutura in nylon 6-0 | Atramat, Internacional Farmacé utica | PE1946-N | Posizionamento legatura |
| Amscope 3.7 programma per fotocamera digitale | Amscope | x64, 4.11.21973.20230107 | per la raccolta dei dati |
| Sigma– Aldrich | E5134 | Decalcificazione | |
| Forbici fini | generiche | Per tagliare la sutura in nylon 6-0 | |
| Pinze per tessuti fini | generiche | Sutura in nylon 6-0 | |
| Garza | generica | Per mantenere la temperatura corporea | |
| GraphPad Prism | GraphPad Prism | Versione 8.3.0 | Analisi dei dati |
| Ipromellosa | generica | Lubrificante per gli occhi | |
| Acqua iniettabile | Pisa | Diluizione della soluzione anestetica | |
| Ketamina | Anesket, Pisa | Anesthetic | |
| Micro provette per centrifuga | Cellpro | 801501 | Per contenere i tessuti durante la decalcificazione |
| Micropori | 3M | 1533 | Per fissare il mouse |
| microscopio fotocamera digitale | Amscope | Istologia MU1603 | |
| Microtubi | Axygen | MCT-150-C | Conservare la diluizione dell'anestetico |
| Microscopio ottico | Istologia UNICO | Serie G380 | |
| Elastici orhodontici | TP Orthodintics, Inc | blu | Per tenere il muso aperto |
| Soluzione di paraformaldeide | Sigma– Aldrich | 158127 | Fissazione dei tessuti |
| Paraplast | Istologia | Leica 39601006 | |
| Microscopio operatorio | Carl Zeiss GmbH Berlino | 6-0 sutura in nylon | |
| Siringhe da insulina ultra fini 6 mm U-100, 0,3 mL | BD | 326385 | Per iniettare la soluzione anestetica |
| Elastici universali | generico Per mantenere il muso aperto | ||
| Piano di lavoro generico | Base in legno per sostenere i topi | ||
| Xilazina | Porcina, Pisa | Preanestetico |
Riferimenti
- Nazir, M., et al. Global prevalence of periodontal disease and lack of its surveillance. Sci World J. 2020 (1), 2146160(2020).
- Tonetti, M. S., Jepsen, S., Jin, L., Otomo-Corgel, J. Impact of the global burde....
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Ristampe e permessi
