Articolo metodologico

Valutazione Doppler a onda pulsata della disfunzione diastolica nel modello ZSF-1 Rat di ipertensione polmonare dovuta a malattia cardiaca sinistra

DOI:

10.3791/69341

22 maggio 2026

In questo articolo

Sommario

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Viene presentato un protocollo per la valutazione della funzione diastolica tramite ecografia Doppler in un modello preclinico di ipertensione polmonare dovuta a malattia cardiaca sinistra.

Abstract

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La disfunzione diastolica e l'insufficienza cardiaca con frazione di eiezione preservata (HFpEF) sono fattori significativi che contribuiscono all'ipertensione polmonare (HP) dovuta a malattie cardiache sinistre. La valutazione standard in vivo delle anomalie di rilassamento nei modelli preclinici include l'ecocardiografia bidimensionale (2D) con valutazione Doppler del flusso trasmettitore e del rilassamento tissutale, che è complessa, costosa e richiede attrezzature ecocardiografiche sofisticate. Qui, un prezioso metodo surrogato per valutare la disfunzione diastolica dell'HP dovuta a malattie cardiache sinistre viene dimostrato in un modello di roditore ben consolidato utilizzando l'ecografia Doppler a onde pulsate senza ecocardiografia 2D. Il pattern di flusso trasmittente diastolico viene identificato dalla finestra apicale ed è correlato con un tracciamento ECG registrato simultaneamente. Vengono raccolti gli indici della funzione diastolica e l'identificazione di questi indici è descritta in questo protocollo. Questa tecnica a basso costo e facilmente implementata identifica marcatori rilevanti di disfunzione diastolica associata a HP, malattie cardiovascolari e HFpEF. Inoltre, rileva riproducibilmente la sua progressione nel tempo, quando l'ecocardiografia 2D non è preferita o disponibile. Le principali limitazioni di questo metodo sono legate all'assenza di visualizzazione delle strutture cardiache, al potenziale di imprecisioni dovute alla dipendenza angolare del segnale Doppler, nonché all'habitus corporeo dell'animale, che può essere mitigato regolando la posizione della sonda e ottimizzandone l'allineamento con il flusso sanguigno.

Introduzione

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L'ipertensione polmonare (HP) è una malattia mortale senza cura che si caratterizza per un aumento della pressione sanguignapolmonare 1. La malattia del cuore sinistro (LHD) è di gran lunga la causa più comune di HP nel mondo ed è associata ad elevati costi e a una morbilitàsignificativa 2,3. I colpevoli cardiaci della PH-LHD includono molteplici entità diverse che causano disfunzioni sistoliche o diastoliche, come l'insufficienza cardiaca, una sindrome clinica multifaccettata che continua a essere tra le principali cause di mortalitàa livello mondiale 4. Tra i pazienti con insufficienza cardiaca, l'HFpEF rappresenta oltre la metà dei ricoveri ospedalieri basati suincidenti 4,5. La disfunzione diastolica è stata identificata come uno dei precursori più importanti e una caratteristica fondamentale nell'interazione tra HFpEF e PH dovuta a LHD (PH-LHD)6,7. A causa della mancanza di modelli preclinici adeguati che riproducano la maggior parte delle caratteristiche cliniche e subcliniche di PH e HFpEF, la comprensione dei meccanismi alla base di queste malattie èincompleta 7.

La disfunzione diastolica è un segno distintivo della PH-LHD e può essere valutata tramite ecocardiografia 2D eDoppler 8. I metodi bidimensionali e Doppler per la valutazione della funzione diastolica del ventricolo sinistro includono, tra gli altri parametri, la velocità massima dell'onda E diastolica precoce, l'onda A diastolica tarda picco, la durata della valvola mitrale A (intervallo di tempo dall'inizio dell'onda A alla fine dell'onda A a base zero), il rapporto E/A della valvola mitrale, il tempo di decelerazione dell'onda E (DT, intervallo temporale dal picco dell'onda E estrapolato alla base a velocità zero), imaging Doppler tissutale (TDI) dell'anello della valvola mitrale settale (e', parametro ecocardiografico del rilassamento tissutale dell'anello della valvola mitrale), e IVRT (tempo di rilassamento isovolumico, tempo tra la chiusura della valvola aortica e l'apertura della valvola mitrale). I marcatori ecocardiografici di rilassamento compromesso includono una combinazione di rapporto E/A ridotto o invertito nell'ambito dell'aumento e riduzione dell'onda A, IVT prolungato, tempo di decelerazione dell'onda E ridotto, indici Doppler tissutali ritardati (velocità prolungata dell'e', aumento della E/e' media del setto setto) e un valore assoluto più basso della deformazione longitudinale globale (GLS)9. Studi che confrontano misurazioni ecocardiografiche e emodinamiche invasive hanno dimostrato che le misurazioni ecocardiografiche e invasive sono comparabili e rappresentano un metodo affidabile per valutare l'emodinamicacardiaca 10. Tuttavia, l'ecocardiografia 2D è complessa, costosa e richiede attrezzature ecocardiografiche sofisticate e personale. Questi fattori rappresentano un importante limite nel seguire la progressione della malattia negli animali. Di conseguenza, i ricercatori si affidano o a due misure (inizio e fine dello studio) per gli studi longitudinali o su misurazioni singole in un disegno di studio trasversale.

Tra questi parametri della disfunzione diastolica si possono valutare E, A, E/A, durata A, DT e IVRT tramite ecocardiografia Doppler a onde pulsate, evitando la necessità di ecocardiografia 2D. In questo articolo, un protocollo per la valutazione Doppler della funzione diastolica è dimostrato nel ben consolidato modello ZSF-1 del ratto PH-LHD11. Un totale di 25 ratti maschi ZSF1 (10 geneticamente obesi e 15 geneticamente magri) sono stati seguiti longitudinalmente e valutati sonograficamente per lo sviluppo di disfunzione diastolica per sedici settimane tra le 8 e le 24 settimane di età. Gli stessi parametri ecocardiografici sono stati valutati tra le due coorti. Tutti gli animali sono stati valutati al punto di partenza (8 settimane di età). Le evidenze Doppler di disfunzione diastolica si sono manifestate a 16 settimane di età, quando sono state effettuate le misurazioni intermedie. Le misurazioni dei punti finali sono state effettuate a 24 settimane di età. Mentre il ricercatore che effettuava la raccolta dei dati non poteva essere accecato a causa dell'evidente aumento di peso nella coorte obesa, il ricercatore che effettuava l'analisi dei dati era accecato al fenotipo degli animali. Sebbene questo metodo facilmente implementabile offra una via per la valutazione longitudinale della progressione della malattia nei roditori, i limiti di questa tecnica includono la dipendenza angolare di un segnale Doppler di buona qualità, che può essere difficile da ottenere a seconda dell'allineamento della sonda e della dimensione dell'animale.

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Protocollo

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Tutte le procedure sono state condotte in conformità con l'approvazione del Comitato per la Cura e l'Uso degli Animali (ACUC) della Johns Hopkins University per il RA21M273 del protocollo. Nessun animale è stato esposto a disagio per la raccolta dei dati o per le misure di misurazione. I reagenti e le attrezzature utilizzate sono elencati nella Tabella dei Materiali.

1. Preparazione dell'attrezzatura e dell'animale

  1. Pulisci la camera anestetistica con alcol etilico al 70% e pulisci tutte le superfici.
  2. Imbotti la camera con un fasciatoio usa e getta e carta assorbente. Assicurarsi che gli orifizi di ingresso e uscita del gas non siano ostruiti.
  3. Adottare le seguenti precauzioni di sicurezza e di gestione dell'anestesia:
    1. Assicurati che la stazione anestetistica sia allestita in un'area ben ventilata.
    2. Ispeziona l'attrezzatura anestesica per eventuali perdite e malfunzionamenti.
    3. Evita di accendere il vaporizzatore finché il circuito non è collegato all'animale.
    4. Mantenere un flusso continuo di ossigeno durante tutto l'esperimento.
    5. Assicurati che il sistema di recupero sia continuo con il sistema del circuito anestetico.
    6. Occhiudere lo spazio tra il cono nasale e quello dell'animale con un pezzo di nastro adesivo per ridurre le fuoriuscite anestetiche e impedire la fuoriuscita di contaminanti nell'aria.
    7. Ridurre i flussi di gas fresco nel sistema del circuito anestetico durante la fase di mantenimento dell'anestesia. Si raccomanda l'uso della portata di gas fresco più bassa possibile.
    8. Al termine dell'esperimento, continuare a somministrare ossigeno a un flusso elevato per eliminare eventuali residui di agente anestetico e il sistema respiratorio.
  4. Apri la bombola d'ossigeno (100%) e lascia il libero flusso di ossigeno nella camera anestetistica.
  5. Apri la gabbia e metti l'animale nella camera anestetizzante.
  6. Chiudi bene la camera.
  7. Apri il vaporizzatore di isoflurano e lascia un libero flusso del 2% al 3% di isoflurano nella camera anestetizzante, miscelato con ossigeno (2 L/min).
  8. Lascia che l'animale inali la miscela di gas ossigeno-isoflurano per un massimo di 3 minuti, o fino a raggiungere una profondità adeguata di anestesia generale.
    NOTA: L'anestesia è considerata adeguata quando l'animale non risponde a stimoli non nocivi o nocivi prima dell'inizio dell'esperimento, continuando a respirare spontaneamente e senza difficoltà.

2. Ottenere un tracciamento ECG

  1. Accendi il tablet collegato al pad tracciante ECG. Seleziona RSMonitor tra le app disponibili. Accendi il pad ECG premendo il pulsante rotondo davanti.
    NOTA: Una luce verde lampeggiante indica che il pad ECG si sta accoppiando con il tablet. Una luce verde fissa indica il completamento dell'accoppia.
  2. Tocca IMPOSTAZIONI nell'angolo in basso a destra dell'interfaccia utente.
  3. Seleziona PRESET dal menu a tendina delle impostazioni sperimentali.
  4. Tocca il menu a tendina sotto Presets Salvati.
  5. Seleziona Rat CV e premi OK nell'angolo in basso a destra.
    NOTA: Il pad dovrebbe essere in modalità "Rat" per permettere la rilevazione dell'ECG tramite le zampe.
  6. Pulisci il pad ECG con alcol etilico al 70% per rimuovere eventuali residui di gel ECG.
  7. Prendi un gel per elettrodi altamente conduttivo per l'ECG e un gel per ultrasuoni ipoallergenico idrosolubile per il Doppler.
  8. Apri il flusso della miscela gassa verso il cono nasale.
  9. Posiziona l'animale anestetizzato supino sul pad ECG non invasivo, con il naso nel cono nasale di dimensioni adeguate. Imposta la potenza del vaporizzatore tra l'1,5% e il 2% (flusso di ossigeno a 1 L/min). Assicurati il libero flusso di isoflurano nel cono nasale.
  10. Chiudi il flusso di gas verso la camera anestetizzante.
  11. Applica una piccola quantità di gel elettrodico sulla superficie dorsale delle zampe anteriori usando un applicatore con punta di cotone e sul lato plantare delle zampe posteriori. Fissa le zampe con del nastro adesivo sulla superficie di contatto dell'elettrodo del pad ECG e assicurati che il gel elettrodico abbia un contatto sufficiente con il pad ECG.
    NOTA: I topi hanno bisogno di un cono nasale più piccolo rispetto ai ratti.
  12. Rimuovere i peli del petto e dell'addome dell'animale usando una crema depilante delicata per facilitare un migliore contatto con la sonda cutanea. Rimuovere eventuali residui di crema depilatrice per evitare irritazioni cutanee.
  13. Assicurarsi che la linea di base isoelettrica e la forma d'onda P-QRS-T sul tracciamento ECG siano visualizzate sul monitor del computer.
    NOTA: A seconda della frequenza cardiaca, le ampiezze P e T potrebbero non essere distinguibili dal complesso QRS, e l'onda R è l'elemento più importante per determinare la tempistica delle forme d'onda Doppler.

3. Installazione del computer

  1. Accendi il computer.
  2. Crea una cartella sul computer che identifichi l'animale e i dati di interesse. Gli istantanee scattati durante l'esperimento saranno salvati in questa cartella.
  3. Accendi il dispositivo Pulsed Doppler Transceiver sia davanti che dietro (grande scatola blu).
  4. Attiva il Processore di Segnale Doppler (piccola scatola nera).
  5. Apri l'icona della Workstation di Elaborazione del Segnale Doppler per eseguire il software.
    NOTA: Le impostazioni iniziali del sistema sono le seguenti: 10 MHz o 20 MHz nelle impostazioni di sistema, frequenza di campionamento: 125 kHz, dimensione del campione: 512, filtro passa-basso: 150 kHz, sufficiente per la maggior parte degli esperimenti.
  6. Clicca su Imposta nell'angolo in alto a sinistra.
  7. Seleziona Configurazione del sistema.
  8. Seleziona la frequenza appropriata per la sonda per l'esperimento (20 MHz per topi e ratti piccoli, 10 MHz per ratti grandi).
    NOTA: L'interfaccia ha due pannelli: uno superiore per la visualizzazione degli spettrogrammi di velocità Doppler e uno inferiore per l'ECG.
  9. Collega la sonda a 20 MHz quando stai indagando su un ratto o un topo giovane. Usa una sonda a 10 MHz per ratti anziani, più grandi o obesi. Da notare che entrambe le sonde possono essere collegate contemporaneamente, e il modulo ricetrasmettitore Doppler consente un facile passaggio tra frequenze/sonde (interruttore a smuscella frontale).
  10. Imposta le impostazioni Doppler sul modulo ricetrasmettitore:
    1. Assicurati che il trasduttore a sonda portatile sia impostato sulla presa del canale A o B.
      NOTA: La selezione del contenitore non avrà un impatto sull'acquisizione dei dati, né provocherà modifiche al software.
    2. Seleziona il canale 10/20 MHz appropriato per azionare la sonda portatile a 10/20 MHz, rispettivamente.
    3. Imposta la frequenza di ripetizione degli impulsi (PRF) a 62 kHz per un'ambiguità ottimale della portata, al fine di aumentare la velocità massima rilevabile con il Doppler PW dal volume di campione più prossimale, minimizzando l'aliasing.
    4. Imposta l'interruttore DIRECTION su TWD per visualizzare qualsiasi flusso che si avvicina alla sonda come una forma d'onda sopra la linea di base a flusso zero.
      NOTA: Qualsiasi flusso che si allontana dalla sonda sarà visualizzato come una forma d'onda al di sotto della linea di base a flusso zero.
    5. Regola la RANGE a 2,5 - 3,5 mm per i topi e 4-6 mm per i ratti, per selezionare la profondità a cui il volume del campione sarà posizionato.
      NOTA: Il cuore di un ratto si trova entro i primi 1 cm dal volto del trasduttore, mentre quello del topo si trova entro i primi 0,5 cm. La distanza viene misurata dall'interfaccia pelle-sonda fino al centro del volume del campione, e l'intervallo per rilevare il flusso trasmettitore varia in base alla dimensione, età e abituale corporea dell'animale.
    6. Imposta FILTER a 15 per uniformare l'uscita della velocità fasica su "smorzata", per evitare una sovrastima o una sottostima delle velocità e per garantire una stima ottimale delle velocità.
  11. Premi GO nell'angolo in alto a sinistra della schermata dell'interfaccia utente. Apparirà una finestra pop-up.
    1. Nella nuova finestra, inserisci le informazioni di acquisizione rilevanti (tipo di animale, genere, data di nascita, età alla data di acquisizione, peso, ecc.).
    2. Seleziona la cartella pre-creata desiderata dal menu a tendina in Directory (per creare la cartella, vedi passo 3.2) con gli identificatori di animale ed esperimento.
    3. Premi OK.
      NOTA: Il numero iniziale del file è impostato a _00.
    4. Regola la linea di base dell'ECG spostandola verso l'alto o verso il basso usando la barra della bilancia a sinistra (clic sinistro sull'asse e trascina su o giù), così che le onde R siano chiaramente visibili.
      NOTA: La linea di base può essere spostata mantenendo il cursore sul pannello ECG, cliccando con il tasto destro del mouse e muovendo il mouse avanti e indietro.

4. Esecuzione di misurazioni Doppler

  1. Applicare una piccola quantità di gel per ultrasuoni sulla regione sottosternale/epigastrica del torace e dell'addome dell'animale per facilitare la trasmissione ecografica tra la sonda e la pelle.
  2. Posiziona la sonda Doppler nella linea mediana sotto il diaframma sotto lo sterno (appena sotto e leggermente a sinistra dello xifoide), con la testa puntata verso il cefalade e verso l'orecchio sinistro dell'animale, e inizia a scansionare il flusso muovendo lentamente la sonda in un piccolo movimento circolare con raggio crescente (1mm alla volta), usando movimenti fini della mano.
  3. Mantieni sempre una pressione delicata della sonda sulla pelle sotto il diaframma.
  4. Se non viene rilevato il flusso mitrale, si regola la RANGE secondo necessità ruotando la manopola RANGE in incrementi di 0,5 mm per rilevare la forma d'onda trasmettente (Figura 1A), ripetendo il movimento circolare di scansione ad ogni giro della manopola.
    NOTA: Un flusso antegrado diastolico a forma di M apparirà sopra la linea di base zero (quando l'interruttore di direzione è impostato su "TWD" (verso)), indicando un flusso diastolico coerente con il flusso attraverso la valvola mitrale che si verifica all'apertura della valvola mitrale. Da notare che la maggior parte del flusso dovrebbe essere al di sopra della linea di base per un pattern di flusso della valvola mitrale, mentre una forma d'onda asimmetrica a V, principalmente sotto la linea di base, indica un flusso sistolico attraverso una valvola diversa, come la valvola aortica. Se si incontra una forma d'onda coerente con un flusso aortico, si sposta leggermente la punta a destra dell'animale e inclinala verso l'alto (richiede un movimento minimo di uno o due millimetri). Tutti i segnali vengono visualizzati in tempo reale. Il flusso diastolico attraverso la valvola tricuspide apparirà come una forma d'onda simile a forma di M sopra la linea di base; tuttavia, a causa di un gradiente di pressione più basso tra l'atrio destro e il ventricolo destro, le velocità di picco saranno significativamente inferiori (Figura 1B). Se si incontra una forma d'onda coerente con il flusso della valvola tricuspide, si fa scorrere la sonda leggermente verso sinistra dell'animale senza cambiarne l'angolo rispetto alla pelle.
  5. Assicurarsi che la visualizzazione simultanea della forma d'onda Doppler e dell'ECG sia sullo schermo.
    NOTA: La velocità dello sweep ECG può essere regolata a un livello confortevole cliccando sulle frecce su/giù nell'angolo in basso a destra del pannello. 4-5 battiti visibili per schermo sono ottimali.

5. Ottenimento di dati dall'ecografia Doppler

  1. Crea istantanee usando il pedale una volta identificato il flusso corretto. Questo può essere ripetuto più volte a seconda di necessario per una qualità ottimale dei dati.
    NOTA: Un'immagine ideale mostrerà una chiara definizione dei confini spettrali, nessun allargamento spettrale, nessun riempimento spettrale, nessuna visualizzazione simultanea del flusso avanti e indietro, e una visualizzazione simultanea dei flussi diastolici trasmittenti e sistolici dell'aorta. Le istantanee vengono salvate automaticamente premendo il pedale.
  2. Ferma l'acquisizione dati quando sei soddisfatto della qualità dei dati cliccando sul pulsante STOP nell'angolo in alto a destra dell'interfaccia utente. È necessario un minimo di 3 repliche di una coppia di forme d'onda ECG e Doppler per una rappresentazione affidabile delle velocità medie e dei tempi di contrazione/rilassamento.
  3. Clicca sul menu File nella barra funzione superiore.
  4. Seleziona Aperta dal menu a tendina.
  5. Seleziona il file di qualità dati più alta dalla cartella predefinita per l'analisi.
  6. Clicca su Analisi nell'angolo in alto a sinistra. Apparirà una finestra pop-up.
    1. Seleziona Passo 2: Configurazione generale
      1. Tipo di dato: Doppler
      2. Segnale: Afflusso mitrale
      3. Animale: Seleziona il modello appropriato per l'esperimento.
      4. Imposta "Tutti i nomi delle misurazioni" sotto i nomi predefiniti delle misurazioni.
  7. Vai su e clicca su Passo 5: Editor di picchi R dal menu a tendina Controllo Analisi. Seleziona Visualizza i marcatori di picco e R. Seleziona Calcolo automatico.
    NOTA: Appariranno i marcatori verdi del picco R. Allinea i marcatori verdi con la punta delle onde R. I marcatori di battuta indesiderati possono essere rimossi dal pannello posizionando il cursore sul marcatore ed eseguendo un rapido movimento in avanti a destra con il mouse, tenendo premuto il tasto destro.
  8. Clicca sul Passo 6: Editor beat dal menu a tendina Controllo Analisi. Seleziona Visualizza i marcatori di battuta e R e clicca su Seleziona tutti i battiti.
  9. Clicca su Passo 7: Editor di marcatori dal menu a tendina Controllo Analisi. Clicca su Visualizza indicatori di analisi. Seleziona il parametro desiderato per la misura sotto "Current Marker Selected".
    1. Assicurarsi che i seguenti parametri siano necessari per la completezza dei dati (Figura 1):
      1. ES: inizio anticipato. Questo è l'inizio del percorso ascendente del flusso diastolico precoce, misurato alla linea di base.
      2. EPV: velocità massima iniziale. La prima velocità di picco sopra la linea di base riflette il gradiente di pressione dell'atrio sinistro (LA) - ventricolo sinistro (LV) durante la diastole iniziale (questa è la velocità massima del flusso passivo da LA a LV dovuta al gradiente di pressione LA-LV preesistente).
      3. EEAS: fine anticipata, inizio atrial. Riflette l'equalizzazione della pressione e la cessazione del flusso tra LA e LV (diastasi).
      4. APV: velocità massima atriale. La seconda velocità di picco sopra la linea di base riflette il gradiente di pressione dell'atrio sinistro-ventricolo sinistro durante la diastole tardiva. Questa è la velocità massima del flusso sanguigno durante il "kick atriale".
      5. AE: estremità atriale. Riflette la cessazione del flusso alla fine della diastole tardiva e l'equalizzazione della pressione tra LA-LV.
      6. IVCTE: fine del tempo di contrazione isovolumica. Questo è l'intervallo di tempo tra la chiusura della valvola mitrale e l'apertura della valvola aortica all'inizio della sistole.
      7. IVRT: inizia il tempo di rilassamento isovolumico. Questo è l'intervallo di tempo tra la chiusura della valvola aortica e l'apertura della valvola mitrale all'inizio della diastole.
    2. Dopo aver effettuato le misurazioni sopra, seleziona Passo 8: Risultati delle misurazioni dal menu a tendina Controllo Analisi .
    3. Copia i dati in un file Excel cliccando su Copia i risultati nella cartellina. Salva i dati Excel.
    4. Chiudi la finestra "Controllo Analisi".
    5. Clicca su File nell'angolo in alto a sinistra e seleziona Salva. Questo salverà le misurazioni effettuate.
    6. Esci dalla workstation di elaborazione del segnale Doppler.

6. Fine dell'esperimento

  1. Spegni l'isoflurano e rimuovi il nastro dalle zampe dell'animale.
  2. Togli l'animale dal pad elettrodico.
  3. Pulisci eventuali residui di crema depilatrice e gel per elettrodi.
  4. Rimetti l'animale nella gabbia con libero accesso ad acqua e cibo.
  5. Permettere all'animale di riprendersi dall'anestesia mentre viene monitorato secondo il protocollo istituzionale.
  6. Spegni l'ossigeno.
  7. Pulisci la camera di anestetismo.

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Risultati

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Questo metodo consente una valutazione longitudinale della funzione diastolica nel PH-LHD. Per una valutazione più accurata della funzione diastolica, è necessario visualizzare i flussi antegrado e retrogrado relativi all'apertura e chiusura della valvola mitrale e aortica all'interno dello stesso ciclo cardiaco su più cicli (Figura 1). La chiusura della valvola aortica segna l'inizio della diastole, la cui fase più precoce è il rilassamento isovolumenico, c...

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Discussione

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In questo articolo, un metodo surrogato per valutare la disfunzione diastolica nella PH-LHD è dimostrato in un modello di roditore ben consolidato utilizzando l'ecografia Doppler a onda pulsata senza ecocardiografia 2D. Il pattern di flusso trasmittente diastolico viene identificato dalla finestra apicale ed è correlato con un tracciamento ECG registrato simultaneamente, che consente di determinare gli indici della funzione diastolica. Questa tecnica a basso costo identifica longitudinal...

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Dichiarazioni

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Gli autori non hanno rapporti finanziari con i produttori dei materiali utilizzati.

Ringraziamenti

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Questo lavoro è stato supportato dal Career Development Award dell'American Heart Association a MB (24CDA1267633), da un premio NHLBI R56 a JS (1R56HL169285) e da un premio NHLBI a LS (R01HL14811201).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Configurazione dell'anestesiaVetEquip Inc.901806
ComputerDell7420 Plus
Cotton fiocPuritan Medical Products Company806-WC
Crema depilatrice    Church e Dwight300725
Sonda Doppler 10 e 20MHzINDUS InstrumentsNA
Configurazione DopplerINDUS InstrumentsNA
Pad ECGINDUS InstrumentsNA
Gel per elettrodiLaboratori Parker45993
Vaporizzatore isoflurano  VetEquip Inc.911103
Gel per ultrasuoniLaboratori Parker45659
Camera di induzione anestetistica ventilataVetEquip Inc.942102

Riferimenti

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