Approccio tecnico per l'analisi strutturale di un composto sconosciuto nel liquido orale Huoxiang Zhengqi basato sulla spettrometria di massa a trappola ionica lineare

Summary

Qui mostriamo un protocollo standard che combina alberi di spettrometria di massa a più stadi con un processo di frammentazione basato sul liquido orale Huoxiang Zhengqi.

Abstract

I composti erboristici cinesi (CHC) svolgono un ruolo insostituibile nella medicina cinese, e l'identificazione dei loro complessi componenti è stata un importante focus di ricerca negli ultimi anni. Il liquido orale Huoxiang Zhengqi è un classico medicinale brevettato cinese la cui composizione chimica richiede ulteriori indagini a livello molecolare. Gli spettrometri di massa tradizionali, come il tempo di volo e Orbitrap, forniscono tipicamente solo informazioni secondarie sulla frammentazione. Basandosi su uno spettrometro di massa a trappola ionica lineare, i composti potevano essere scomposti in modo più approfondito, ottenendo così informazioni più profonde sui frammenti. Questo articolo sviluppa una tecnica di esplorazione strutturale per composti sconosciuti nei CHC, comprendendo il pretrattamento del campione, la preparazione per cromatografia liquida a ultra-performance, la preparazione per la spettrometria di massa, i test a spettro completo, i test a spettrometria di massa secondaria, i test a spettrometria di massa multilivello e l'analisi dei risultati. I risultati rappresentativi dimostrano il processo di derivazione della struttura composta. Discutiamo i fattori che influenzano la tecnica sperimentale, come isomeri, composti poliidrossi e risoluzione degli strumenti. Basandosi sulla derivazione della struttura molecolare microscopica di composti sconosciuti tramite frammentazione di spettrometria di massa a più stadi, il metodo sperimentale consolidato è versatile ed applicabile per la caratterizzazione strutturale di piccole molecole bioattive nella medicina tradizionale cinese e il loro collegamento con meccanismi farmacologici.

Introduction

I composti erboristici cinesi (CHC), come risorse inestimabili della medicina tradizionale cinese (MTC), hanno accumulato millenni di esperienza clinica^{validata 1}. Svolgono un ruolo insostituibile nella prevenzione delle malattie, nell'intervento terapeutico e nella^{riabilitazione 2}. Attraverso il sinergismo multi-erba, i CHC trattano il corpo umano in modo olistico, operativizzando i principi fondamentali dell'olismo e della terapia basata sulla differenziazione della^{sindrome 3}. All'interno dei quadri medici contemporanei, i CHC ottengono riconoscimento globale pe....

Protocol

1. Pretrattamento del campione

1. Apri la confezione dell'HXZQ commerciale. Trasferire con precisione 0,1 mL di HXZQ in una bottiglia campione da 2 mL, poi aggiungere 0,9 mL d'acqua. Agita la soluzione finché non è ben mescolata.
2. Prepara una siringa iniezione (1 mL) e un filtro a membrana microporosa (0,22 μm). Filtra la soluzione in una nuova bottiglia da 2 mL.
   NOTA: Adottare le adeguate precauzioni personali durante le procedure sperimentali.

2. Preparazione della cromatografia liquida ultra-performante (UPLC)

1. Doppio clic sul softw....

Results

Abbiamo suggerito che tutte le informazioni m/z dovessero essere prima raccolte, e poi calcolare il valore della differenza di massa tra lo ione genitore e quello del frammento. Ho trovato il composto riportato nel database o nella letteratura, e poi ho dedotto la struttura del composto sconosciuto in modo inverso basandosi su questa struttura nota.

Tutti i composti rilevati e i relativi ioni frammenti erano presentati tramite valori m/z. Un sottoinsieme di qu.......

Discussion

La combinazione di LIT-MS e la sua tecnologia di frammentazione MSⁿ fornisce un metodo per identificare composti sconosciuti nei CHC. A differenza delle modalità MS tandem tradizionali in Orbitrap e Q-TOF MS, la trappola ionica lineare può catturare specificamente ioni bersaglio, evitando efficacemente l'interferenza degli ioni co-eluzionanti²³. Questo metodo raggiunge una precisione a livello molecolare, fornendo informazioni strutturali chimiche relat.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetonitrile	Thermo Scientific	CAS 75-05-8	Stato liquido
Acido formico	Thermo Scientific	CAS 64-18-6	Stato liquido
Liquido orale Huoxiang Zhengqi	Chongqing Taiji Industry (Group) Co., Ltd.	Codice Standard Statale dei Farmaci Z50020409	Oggetto di studio
Spettrometro di massa a trappola ionica lineare	Thermo Scientific	LTQ XL	Strumento IT-MS
Cromatografo liquido	Thermo Scientific	U3000	Strumento UPLC
Xcalibur	Thermo Scientific	Versione 2.0	Software operativo UPLC-IT-MS