Gascromatografia con rivelatore a ionizzazione di fiamma

Gas Chromatography (GC) with Flame-Ionization Detection

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Analytical Chemistry

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Gas Chromatography (GC) with Flame-Ionization Detection

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09:22 min

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August 24, 2015

Overview

Fonte: Laboratorio del Dr.B. Jill Venton – Università della Virginia

La gascromatografia (GC) viene utilizzata per separare e rilevare composti di piccolo peso molecolare nella fase gassosa. Il campione è un gas o un liquido che viene vaporizzato nella porta di iniezione. Tipicamente, i composti analizzati sono meno di 1.000 Da, perché è difficile vaporizzare composti più grandi. GC è popolare per il monitoraggio ambientale e le applicazioni industriali perché è molto affidabile e può essere eseguito quasi continuamente. GC è tipicamente utilizzato in applicazioni in cui vengono rilevate piccole molecole volatili e con soluzioni non acquose. La cromatografia liquida è più popolare per le misurazioni in campioni acquosi e può essere utilizzata per studiare molecole più grandi, perché le molecole non hanno bisogno di vaporizzare. GC è favorito per le molecole non polari mentre LC è più comune per separare gli analiti polari.

La fase mobile per la gascromatografia è un gas vettore, tipicamente elio a causa del suo basso peso molecolare e del suo essere chimicamente inerte. Viene applicata la pressione e la fase mobile sposta l’analita attraverso la colonna. La separazione avviene utilizzando una colonna rivestita con una fase stazionaria. Le colonne capillari tubolari aperte sono le colonne più popolari e hanno la fase stazionaria rivestita sulle pareti del capillare. Le fasi stazionarie sono spesso derivate del polidimetilsilossano, con il 5-10% dei gruppi funzionalizzati per sintonizzare la separazione. I gruppi funzionali tipici sono i gruppi fenile, cianopropile o trifluoropropilico. Le colonne capillari sono solitamente lunghe 5-50 m. Le colonne più strette hanno una risoluzione più elevata ma richiedono pressioni più elevate. Le colonne imballate possono essere utilizzate anche dove la fase stazionaria è rivestita su perle imballate nella colonna. Le colonne imballate sono più corte, 1-5 m. I capillari tubolari aperti sono generalmente preferiti perché consentono maggiori efficienze, analisi più veloci e hanno capacità più elevate.

Il rilevamento della ionizzazione di fiamma (FID) è un buon rivelatore generale per composti organici in GC che rileva la quantità di carbonio in un campione. Dopo la colonna, i campioni vengono bruciati in una fiamma calda idrogeno-aria. Gli ioni carbonio sono prodotti dalla combustione. Mentre l’efficienza complessiva del processo è bassa (solo 1 su 10⁵ ioni carbonio produce uno ione nella fiamma) la quantità totale di ioni è direttamente proporzionale alla quantità di carbonio nel campione. Gli elettrodi sono usati per misurare la corrente dagli ioni. Il FID è un rilevatore distruttivo, poiché l’intero campione è pirolizzato. Il FID non è influenzato da gas e acqua non combustibili.

Principles

L’equilibrio per la gascromatografia è la partizione e i componenti del campione si divideranno(cioè distribuiranno) tra le due fasi: la fase stazionaria e la fase mobile. I composti che hanno una maggiore affinità per la fase stazionaria trascorrono più tempo nella colonna e quindi eluiscono più tardi e hanno un tempo di ritenzione più lungo (t_R) rispetto ai campioni che hanno una maggiore affinità per la fase mobile. L’affinità per la fase stazionaria è guidata principalmente dalle interazioni intermolecolari e la polarità della fase stazionaria può essere scelta per massimizzare le interazioni e quindi la separazione. I picchi ideali sono distribuzioni gaussiane e simmetriche, a causa della natura casuale delle interazioni analitiche con la colonna. Le caratteristiche di picco asimmetriche, come il fronting o lo tailing del picco, possono essere dovute al sovraccarico della colonna, ai problemi di iniezione o alla presenza di gruppi funzionali adsorbiti come gli acidi carbossilici.

In GC, la temperatura viene regolata per cambiare l’equilibrio e quindi i tempi di eluizione. Le separazioni in GC si basano sulla volatilità perché le sostanze con punto di ebollizione più elevato possono condensarsi su una colonna se la temperatura è bassa, quindi non vengono eluite o richiedono molto tempo per eluire. Le separazioni isotermiche vengono eseguite a una temperatura o le separazioni a gradiente vengono eseguite dove la temperatura viene incrementata durante la separazione. Le rampe di temperatura consentono di separare i composti a basso e alto punto di ebollizione nella stessa separazione.

La lettura prodotta da GC è un cromatogramma che dà il segnale nel tempo. I picchi sono osservati per ogni composto nel campione. Per ogni picco, è possibile calcolare un’altezza di picco e un’area di picco. L’area di picco viene generalmente utilizzata per creare curve di calibrazione e per calcolare le concentrazioni di campioni in incognite. Il numero di piastre teoriche (N) viene calcolato da ciascun picco per fornire una misura dell’efficienza della colonna. Un’equazione pratica per misurare N è N=16(t_R/W)² dove t_R è il tempo di ritenzione dell’analita e W è la larghezza del fondo del picco. N viene utilizzato per confrontare le separazioni su colonne diverse.

Il rivelatore a ionizzazione di fiamma è sensibile alla massa. Pertanto, la quantità di segnale è proporzionale alla massa di carbonio nel campione, non al numero di moli. I composti con più carbonio danno segnali maggiori. La combustione del carbonio produce ioni che vengono rilevati come corrente. FID è uno dei rivelatori generali più sensibili per GC con un limite di rilevamento nell’intervallo del picogramma. La risposta è lineare su sette ordini di grandezza, dandogli un ampio intervallo lineare.

Procedure

1. Inizializzazione del CG

Accendere il gas e l’aria di trasporto dell’elio e regolare i manometri sullo strumento.
Accendere il forno a colonna ad alta temperatura (in genere 250 °C o superiore) per cuocere nella colonna. Non superare la temperatura massima della colonna. Questo rimuoverà eventuali contaminanti. Lasciare cuocere per almeno 30 minuti prima di eseguire un campione.

2. Creazione di un file di metodi

Nel software che controlla lo strumento, inserire tutti i valori desiderati per un file di metodi. Innanzitutto, imposta le impostazioni del autocampionatore. Impostare il numero di risciacqui pre-esecuzione, risciacqui post-esecuzione e risciacqui con campione. Questi risciacqui puliscono la colonna tra diversi campioni.
La quantità iniettata è in genere di 1 μL. Di solito viene impostato un rapporto di divisione perché l’iniezione di tutto un campione potrebbe sovraccaricare la colonna. Se il rapporto di divisione è 100:1, ciò significa che per ogni 1 parte che viene iniettata nello strumento 100 parti vanno sprecate.
Immettere i parametri della fase mobile. La portata è controllata dalla pressione impostata. Portate più elevate portano a separazioni più rapide, ma c’è meno tempo per l’analita di interagire con la colonna.
Immettere la programmazione della temperatura. Per una corsa isotermica, inserire la temperatura della separazione e quindi un tempo per la separazione. Per un’eluizione del gradiente, immettere la temperatura iniziale e il tempo di attesa, la temperatura finale e il tempo di attesa e la velocità di rampa in °C/min. Viene inoltre impostato un tempo di equilibrio che consente alla colonna di raffreddare la temperatura originale tra una corsa e l’altra.
Immettere i parametri del rilevatore. Verranno inserite una temperatura e una frequenza di campionamento del rilevatore. Il rivelatore deve avere sempre una temperatura superiore alla temperatura della colonna in modo che nessun analita si condensi sul rivelatore.
Salvare il file dei metodi. Potrebbe anche essere necessario scaricare i parametri in modo che vengano letti dal GC.

3. Raccolta dei dati delle CG

Accendere l’idrogeno gassoso e assicurarsi che il manometro sia impostato correttamente. Accendi la fiamma del FID.
Sul rack dell’autocampionatore, riempire il flaconcino di lavaggio con solvente di lavaggio, come acetonitrile o metanolo. Assicurarsi che il flaconcino di scarico sia vuoto.
Preparare il campione. Se c’è qualche possibilità di particolato nel campione, filtrare il campione. Poiché a volte si possono vedere residui di plastica con GC, utilizzare solo siringhe di vetro e flaconcini di vetro per preparare il campione.
Riempire il flaconcino almeno a metà strada con il campione in modo che la siringa autocampionatore sia assicurata per raccogliere il campione. I flaconcini dell’autocampionatore sono in genere di 2 ml, ma se il volume del campione è limitato, sono disponibili inserti del flaconcino per ridurre il volume del campione necessario.
Caricare il flaconcino o i flaconcini campione nel rack dell’autocampionatore. Tieni traccia della posizione in cui si trova ogni campione.
Prima dell’esecuzione, azzerare la linea di base del registratore grafico sul software del computer.
I file possono essere raccolti come singola esecuzione o utilizzando una tabella batch per più esecuzioni. Assicurarsi di specificare il numero di flaconcino corretto per il campione. Premi il pulsante “start” e crea un file.
I dati vengono in genere analizzati con un programma software. I parametri che possono essere misurati includono il tempo di ritenzione, l’altezza del picco, l’area del picco e il numero di piastre teoriche.

4. Risultati: Analisi GC di campioni di caffè

In questo esempio, l’analisi GC-FID è stata eseguita per la caffeina e l’acido palmitico, due composti presenti nel caffè. La caffeina è meno polare dell’acido palmitico, che ha una lunga coda di alcano a catena. Pertanto, la caffeina viene trattenuta meno ed eluisce prima sulla colonna non polare del 95% di dimetilpolisilossano e del 5% di fenil-arilene (Figura 1).
Dal cromatogramma è possibile calcolare le aree di picco. Le aree di picco sono proporzionali alla massa di carbonio che passa attraverso il rivelatore e possono essere utilizzate per effettuare una curva di calibrazione della risposta dello strumento rispetto alla concentrazione. Per la Figura 1,l’area di picco è 27.315 per la caffeina e 18.852 per l’acido palmitico.
Una misura dell’efficienza della colonna è N, il numero di piastre teoriche. N può essere calcolato dal cromatogramma per ogni picco. Per la Figura 1,N è 283.000 per la caffeina e 261.000 per l’acido palmitico.
La Figura 2 mostra l’effetto della temperatura sulle separazioni isotermiche. Due separazioni sono sovrapposte dello stesso campione di caffeina e acido palmitico. Il primo è a 180 °C e il secondo a 200 °C. I tempi di ritenzione sono molto più piccoli per la maggiore temperatura.

Figura 1. Analisi GC-FID di campioni di caffeina e acido palmitico. Lo standard di caffeina 5 mM eluisce per primo, seguito dal campione di acido palmitico da 1 mM. La rampa di temperatura era di 0,1 minuti a 150 °C seguita da una rampa a 10 °C/min a 220 °C dove la temperatura veniva mantenuta per 5 minuti.

Figura 2. Analisi GC-FID delle corse isotermiche di un campione di caffè tostato scuro. Un confronto tra GC-FID funziona a 180 °C e 200 °C per un campione di caffè tostato scuro. I picchi si eluiscono molto più velocemente con la temperatura di 200 °C.

La gascromatografia, o GC, è una tecnica che viene utilizzata per separare, rilevare e quantificare piccoli composti volatili nella fase gassosa.

In GC, i campioni liquidi vengono vaporizzati, quindi trasportati da un gas inerte attraverso una colonna lunga e sottile. Gli analiti vengono separati in base alla loro affinità chimica con un rivestimento all’interno della colonna.

Poiché GC richiede che gli analeti siano vaporizzati in fase gassosa, lo strumento è ideale per sostanze chimiche volatili e non polari di massa inferiore a 1.000 dalton. Per molecole più grandi, acquose o polari difficili da vaporizzare, la cromatografia liquida è un’alternativa utile. Questo video introdurrà le basi della gascromatografia e illustrerà i passaggi necessari per analizzare le specie chimiche in un campione di miscela non acquosa utilizzando un gascromatografo.

Lo strumento GC ha cinque componenti essenziali. In primo luogo, viene utilizzata una porta di iniezione per introdurre il campione nello strumento. Successivamente, una camera di riscaldamento vaporizza il campione e lo mescola con un gas inerte. Il gas inerte, come l’elio o l’azoto, trasporta il campione vaporizzato attraverso il sistema. Combinati, il gas vettore e il campione costituiscono la fase mobile. Successivamente, la fase mobile entra nella colonna riscaldata, separando gli analliti mentre fluiscono. Infine, un rilevatore registra i gas mentre escono dalla colonna, o eluiscono, e invia i dati a un computer per l’analisi. Il componente più critico dello strumento è la colonna. La colonna è un capillare con una matrice di fase stazionaria che ricopre le pareti interne. In alternativa, le colonne possono essere imballate con perle rivestite a matrice. La fase stazionaria è solitamente il polidimetilsilossano modificato, che è ideale per risolvere molecole non polari. Le sue proprietà di separazione sono raffinate aggiungendo gruppi fenilici, cianopropilici o trifluoropropilici al 5-10%.

Gli analiti con bassa affinità chimica per la fase stazionaria si muovono rapidamente attraverso la colonna, mentre le molecole con alta affinità vengono rallentate mentre assorbono le pareti della colonna. Il periodo di tempo che un composto trascorre all’interno della colonna è chiamato tempo di ritenzione, o R_t, e consente di identificare i composti. Il rilevatore si trova all’estremità della colonna e registra i gas mentre eluiscono. Il rilevamento della ionizzazione di fiamma, o FID, è ampiamente utilizzato perché rileva gli ioni carbonio, permettendogli di rilevare praticamente qualsiasi composto organico. Nel FID, gli analiti bruciano in una fiamma idrogeno-aria mentre escono dalla colonna, producendo ioni carbonio che inducono una corrente negli elettrodi vicini. La corrente è direttamente proporzionale alla massa di carbonio, quindi è possibile determinare la concentrazione del composto. Il risultato finale è un cromatogramma, che è un grafico del segnale FID rispetto al tempo, che mostra ogni componente eluito mentre escono dalla colonna. Idealmente, ogni picco avrà una forma simmetrica e gaussiana. Le caratteristiche asimmetriche, come il peak tailing e il peak fronting, possono essere dovute a sovraccarico, problemi di iniezione o presenza di gruppi funzionali che si attaccano alla colonna, come gli acidi carbossilici.

Ora che i principi della gascromatografia sono stati discussi, diamo un’occhiata a come eseguire e analizzare un’analisi gascromatografica in laboratorio.

Prima di eseguire un esperimento, accendere il serbatoio del gas elio. Apri il software sul computer, quindi cuoci la colonna per rimuovere eventuali potenziali contaminanti. Impostare il forno ad una temperatura elevata, in genere 250 °C o superiore, e cuocere la colonna per almeno 30 minuti.

Quindi, regolare le impostazioni dell’autocampionatore. Impostare il numero di risciacqui pre e post-esecuzione per pulire la colonna tra i campioni.

Utilizzare un volume di campionamento di 1 μL e impostare l’impostazione del rapporto di divisione per programmare lo strumento in modo che accetti solo una frazione dell’ingresso. Regolare la portata del gas di trasporto e utilizzare le impostazioni stabilite o tentativi ed errori per trovare la pressione ideale.

Ora inserisci le impostazioni di temperatura per l’esperimento. Per una corsa isotermica, inserire la temperatura e il tempo per la separazione. In alternativa, per un gradiente di temperatura, immettere la temperatura iniziale e il tempo di attesa, la temperatura finale e il tempo di attesa e la velocità di rampa in °C al minuto.

Impostare il tempo di raffreddamento della colonna tra le esecuzioni per una pendenza o una corsa isotermica.

Infine, impostare la frequenza di campionamento e la temperatura del rilevatore. Il rilevatore deve essere sempre più caldo della colonna per evitare la condensa. Dopo aver programmato tutte le impostazioni, salvare il file dei metodi.

Attivare il rilevatore aprendo la valvola del serbatoio dell’idrogeno e accendere la fiamma del FID. Lo strumento è ora pronto per l’analisi del campione.

Per eseguire il campione sul GC, riempire prima una fiala con un solvente di lavaggio, come acetonitrile o metanolo. Preparare il campione, avendo la certezza di utilizzare siringhe di vetro e flaconcini di vetro poiché i residui di plastica possono contaminare il GC.

Ora aggiungi il campione preparato a una fiala con una pipetta. Riempire almeno a metà strada, in modo che la siringa dell’autocampionatore sia completamente sommersa. Quindi, caricare le fiale di lavaggio e campionamento nel rack dell’autocampionatore. Prima di eseguire il campione, azzerare la linea di base del cromatogramma sul software del computer. I dati possono essere raccolti come singola esecuzione o utilizzando una tabella batch per più esecuzioni. Premere “start” per eseguire l’esempio.

In questo esempio, i livelli di caffeina e acido palmitico nel caffè sono stati analizzati utilizzando GC con FID. La caffeina è più piccola e meno polare, quindi è meno attratta dalla colonna e si eluisce per prima. L’acido palmitico, che ha una lunga coda a catena alcano, eluisce in seguito a causa di una maggiore affinità con la fase stazionaria.

Poiché le dimensioni di picco sono proporzionali alla massa di carbonio, la concentrazione di ciascun componente può essere determinata dalla rispettiva area di picco sul cromatografo e confrontata con gli standard di concentrazione nota.

È stato anche esplorato l’effetto della temperatura della colonna. A 200 °C, i campioni si muovevano attraverso la colonna due volte più velocemente del campione a 180 °C. Si noti che mentre le altezze dei picchi cambiano, l’area sotto la curva rimane costante.

Gc è una tecnica importante per l’analisi chimica ed è ampiamente utilizzata in applicazioni scientifiche, commerciali e industriali.

A causa della semplicità del GC, i chimici lo usano abitualmente per monitorare le reazioni chimiche e la purezza del prodotto. Le reazioni possono essere campionate nel tempo per mostrare la formazione del prodotto e l’esaurimento dei reagenti. Il cromatografo rivela le concentrazioni del prodotto e anche la presenza di prodotti non intenzionali o collaterali.

GC è comunemente usato in tandem con la spettrometria di massa, chiamata GS-MS, per identificare in modo inequivocabile le sostanze chimiche nei campioni o nell’aria. La spettrometria di massa, o MS, separa le molecole in base al loro rapporto massa-carica e consente la determinazione delle identità composte. GC-MS è uno strumento potente, poiché GC separa prima miscele complesse in singoli componenti e MS fornisce informazioni precise sulla massa e identità chimica.

Gc è abitualmente utilizzato nel monitoraggio dell’aria per rilevare composti organici volatili, o COV, che possono derivare da inquinamento ambientale, pesticidi ed esplosivi. GC può essere utilizzato per tracciare e identificare i COV sia all’interno per l’analisi dello spazio di testa che all’esterno, per la salute, la sicurezza e la sicurezza.

Hai appena visto l’introduzione di JoVE alla gascromatografia con FID. Ora dovresti comprendere i principi di base della gascromatografia e del rilevamento FID.

Grazie per l’attenzione!

Applications and Summary

GC è utilizzato per una varietà di applicazioni industriali. Ad esempio, viene utilizzato per testare la purezza di un prodotto chimico sintetizzato. GC è anche popolare nelle applicazioni ambientali. GC viene utilizzato per rilevare pesticidi, idrocarburi poliaromatici e ftalati. La maggior parte delle applicazioni di qualità dell’aria utilizza GC-FID per monitorare gli inquinanti ambientali. GC viene anche utilizzato per l’analisi dello spazio di testa, in cui vengono raccolti e misurati i volatili evaporati da un liquido. Questo è utile per l’industria cosmetica e alimentare e delle bevande. GC viene utilizzato anche per applicazioni forensi, come il rilevamento di droghe d’abuso o esplosivi. Inoltre, GC è utile nell’industria petrolifera per misurare gli idrocarburi. Le ampie applicazioni rendono GC un miliardo di dollari all’anno mercato mondiale.

La Figura 3 mostra un esempio di come GC potrebbe essere utilizzato nell’industria alimentare. La figura 3 mostra un cromatografo di vaniglia artificiale (nero) e vaniglia reale (rosso). GC può essere utilizzato per identificare il campione reale, che contiene un grande picco per la vanillina ma non contiene un secondo picco per l’etilvanillina.

Figura 3. Cromatogramma GC-FID di campioni di vaniglia. Sia l’imitazione che la vera vaniglia mostrano grandi picchi a 4,7 minuti a causa della vanillina, il componente principale della vaniglia. Tuttavia, l’imitazione della vaniglia ha anche un grande picco a 5,3 minuti, che è dovuto all’etilvanillina, un composto non presente in grandi quantità nella vera vaniglia.

Transcript

Gas Chromatography, or GC, is a technique that is used to separate, detect, and quantify small volatile compounds in the gas phase.

In GC, liquid samples are vaporized, then carried by an inert gas through a long, thin column. Analytes are separated based on their chemical affinity with a coating on the inside of the column.

Because GC requires that analytes are vaporized to the gas phase, the instrument is ideally suited for volatile, nonpolar chemicals less than 1,000 daltons in mass. For larger, aqueous, or polar molecules that are difficult to vaporize, liquid chromatography is a useful alternative. This video will introduce the basics of gas chromatography, and illustrate the steps required to analyze the chemical species in a non-aqueous mixture sample using a gas chromatograph.

The GC instrument has five essential components. First, an injection port is used to introduce the sample into the instrument. Next, a heating chamber vaporizes the sample and mixes it with an inert gas. The inert gas, such as helium or nitrogen, carries the vaporized sample through the system. Combined, the carrier gas and sample make up the mobile phase. Next, the mobile phase enters the heated column, separating the analytes as they flow through. Lastly, a detector records the gases as they exit the column, or elute, and sends data to a computer for analysis. The most critical component of the instrument is the column. The column is a capillary with a stationary phase matrix coating the inner walls. Alternatively, columns can be packed with matrix-coated beads. The stationary phase is usually modified polydimethylsiloxane, which is ideal for resolving nonpolar molecules. Its separation properties are refined by adding 5–10% phenyl, cyanopropyl, or trifluoropropyl groups.

Analytes with low chemical affinity for the stationary phase move quickly through the column, while molecules with high affinity are slowed as they adsorb to the column walls.The length of time a compound spends inside the column is called its retention time, or Rt, and allows compounds to be identified. The detector sits at the end of the column and records gases as they elute. Flame-ionization detection, or FID, is widely used because it senses carbon ions, allowing it to detect virtually any organic compound. In FID, analytes combust in a hydrogen-air flame as they exit the column, producing carbon ions that induce a current in nearby electrodes. The current is directly proportional to the carbon mass, thus, the concentration of the compound can be determined. The final result is a chromatogram, which is a plot of FID signal vs time, showing each eluted component as they exit the column. Ideally, each peak will have a symmetrical, Gaussian shape. Asymmetrical features, such as peak tailing and peak fronting, can be due to overloading, injection problems, or the presence of functional groups that stick to the column, such as carboxylic acids.

Now that the principles of gas chromatography have been discussed, let’s take a look at how to carry out and analyze a gas chromatography analysis in the laboratory.

Before running an experiment, turn on the helium gas tank. Open the software on the computer, then bake out the column to remove any potential contaminants. Set the oven to a high temperature, typically 250 °C or above, and bake the column for at least 30 min.

Next, adjust the autosampler settings. Set the number of pre- and post-run rinses to clean the column between samples.

Use a sample volume of 1 μL and set the split ratio setting to program the instrument to accept only a fraction of the input. Adjust the flow rate of the carrier gas, and use established settings or trial and error to find the ideal pressure.

Now enter the temperature settings for the experiment. For an isothermal run, enter the temperature and the time for the separation. Alternatively, for a temperature gradient, enter the starting temperature and hold time, the ending temperature and hold time, and the ramp speed in °C per min.

Set the time for the column to cool between runs for either a gradient or isothermal run.

Finally, set the sampling rate and the detector temperature. The detector must always be hotter than the column to prevent condensation. After all the settings are programmed, save the methods file.

Activate the detector by opening the hydrogen tank valve and ignite the flame of the FID. The instrument is now ready for sample analysis.

To run the sample on the GC, first fill a vial with a wash solvent, such as acetonitrile or methanol. Prepare the sample, being certain to use glass syringes and glass vials as plastic residues can contaminate the GC.

Now add the prepared sample to a vial with a pipette. Fill at least half way, so that the autosampler syringe will be fully submerged. Then, load the wash and sample vials into the autosampler rack. Before running the sample, zero the baseline of the chromatogram on the computer software. Data can be collected either as a single run or using a batch table for multiple runs. Press “start” to run the sample.

In this example, caffeine and palmitic acid levels in coffee were analyzed using GC with FID. Caffeine is smaller and less polar, so it is less attracted to the column, and elutes first. Palmitic acid, which has a long alkane chain tail, elutes later due to a higher affinity with the stationary phase.

Because peak dimensions are proportional to carbon mass, the concentration of each component can be determined from its respective peak area on the chromatograph and compared to standards of known concentration.

The effect of column temperature was also explored. At 200 °C, samples moved through the column twice as fast as the sample run at 180 °C. Note that while peak heights change, the area under the curve remains constant.

GC is an important technique for chemical analysis, and is widely used in scientific, commercial, and industrial applications.

Due to the simplicity of GC, chemists routinely use it to monitor chemical reactions and product purity. Reactions can be sampled over time to show product formation and reactant depletion. The chromatograph reveals product concentrations and also the presence of unintended or side products.

GC is commonly used in tandem with mass spectrometry, called GS-MS, to unambiguously identify chemicals in samples or air. Mass spectrometry, or MS, separates molecules based on their mass to charge ratio, and enables the determination of compound identities. GC-MS is a powerful tool, as GC first separates complex mixtures into individual components, and MS gives precise mass information and chemical identity.

GC is routinely used in air monitoring to detect volatile organic compounds, or VOCs, which may arise from environmental pollution, pesticides and explosives. GC can be used to track and identify VOCs both indoors for headspace analysis and outdoors, for health, safety, and security.

You’ve just watched JoVE’s introduction to gas chromatography with FID. You should now understand the basic principles of gas chromatography and FID detection.

Thanks for watching!