Studi genetici di proteine ​​umane di riparazione del DNA Utilizzando lievito come sistema modello

I plasmidi WRN vengono digeriti con la cellula endonucleasica di restrizione uno e MLU e i frammenti vengono purificati da un gel. Questi vettori di espressione digeriti con i frammenti di WN della cellula uno in MLU e in quelli di WN vengono poi legati nei siti di cellula uno e MLU uno del vettore di lievito. Il plasmide multi copia contiene anche un marcatore TRP uno selezionabile.

I costrutti W Rrn vengono trasformati in lievito seguendo protocolli standard e i trasformanti vengono selezionati su terreni di glucosio completi sintetici privi di triptofano. I singoli trasformanti vengono quindi striati su un terreno di glucosio sintetico completo privo di triptofano e le piastre vengono incubate dalla piastra master. Per analizzare il ripristino del fenotipo a crescita lenta in SGS trasformato in WRN, uno dei tre principali trasformanti di doppio ceppo mutante viene striato su piastre contenenti glucosio o galattosio.