Name: Induzione chirurgica di Idrope endolinfatico da Obliterazione del dotto endolinfatico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-01-22T16:52:00.000+00:00
Duration: 11 min 49 s
Description: Impara la tecnica chirurgica per ostruire il dotto endolinfatico nei porcellini d'India. Questo metodo induce idrope endolinfatico, modello fondamentale per studiare la malattia di Menière e le patologie dell'orecchio interno.

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Questo lavoro è stato sostenuto in parte da un finanziamento della American Society otologico di CAM e da una sovvenzione dalla sentenza University Hospitals Medical Center a KNA e CAM. Vorremmo ringraziare Jeff Churney a Focus Medical Group, Inc. (Hinckley, OH) per averci fornito una fotocamera microscopio. Servizi di produzione video per gentile concessione di marketing creativo Fusion, Inc. (Valdosta, GA) Ringraziamo Jonathan Frankel e Alex Levitt a CWRU per i loro commenti durante la preparazione del video.

Parte 1: Anestesia e preparazione per la chirurgia <ol><li> Un adulto, di sesso femminile Duncan-Hartley cavia da Charles River International Laboratories, Inc. (Wilmington, MA) è anestetizzato con ketamina 60 mg / kg e xilazina 12 mg / kg per via intramuscolare. </li><li> Lubrificante petrolio viene applicato agli occhi per proteggere l'animale da lesione corneale a causa di essiccazione. </li><li> L'animale è rasata dalla cima della testa alle spalle e tra le orecchie. </li><li> L'area rasata viene preparato in maniera sterile prima con 7,5% di iodio-povidone seguita del 70% di alcool etilico. </li><li> L'animale viene posto su un tavolo operatorio con coperta riscaldamento e su una piattaforma che eleva la testa e si flette il collo. La testa dell'animale è diretta dal chirurgo. Flessione del collo adeguata è necessaria per esporre adeguatamente la cresta occipitale. </li><li> L'animale è avvolta in un modo sterile. </li></ol> 2 parti: Incisione ed esposizione dell'occipite ossea <ol><li> Bupivacaina epinefrina più (Marcaine) 0,25% è applicato lungo il sito di incisione prospettico (linea mediana incisione cutanea dorsale lungo la cresta occipitale). Questo provoca vasocostrizione locale, limitando sanguinamento, e fornisce duraturo analgesia post-operatoria dopo che l'animale si sveglia. </li><li> Incisione cutanea mediana dorsale è fatta sul cuoio capelluto lungo all'occipite. <img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1: incisione cutanea è fatta lungo la linea mediana dorsale, come mostrato sopra. </li><li> Per ottenere un'adeguata esposizione, la pelle è retratto lateralmente mettendo un hemostat piccola curva su entrambi i lati dell'incisione. </li><li> Una incisione orizzontale è fatto lungo il muscolo del collo per esporre all'occipite ossea. In questa fase l'animale può contrazione, nonostante l'anestesia adeguata a causa di resezione del nervo grande occipitale. Transezione midollo spinale è un pericolo con incisione orizzontale nella regione suboccipitale. Questa complicanza può essere evitata facendo in modo che l'osso sottostante è sempre sentito sotto il bisturi. </li><li> Con la muscolatura suboccipitale incise fino all'osso, un hemostat terzo è usata per ritrarre il bordo superiore del muscolo. Questo hemostat è tenuto in posizione da l'assistente chirurgico. </li><li> Un ascensore Lempert periostale viene utilizzato per esporre l'articolazione temporo-occipitale sutura. </li></ol> Parte 3: Foratura temporo-occipitale sutura <ol><li> Al momento dell'esposizione della sutura temporo-occipitale (Figura 2), un trapano otologica con 1,5 millimetri diamante radica è usato per esercitarsi inferio-lateralmente alla sutura. </li><li> Sotto la tabella esterna del cranio, la consistenza spugnosa del diploë (L'osso spugnoso intervenendo tra i tavoli del cranio) diventerà visibile. Una volta che il diploë è stato perforato via, la tabella interna del cranio appare, insieme a una tonalità tenue blu che è il seno sigmoideo. </li><li> I margini del seno sigmoideo sono definiti senza penetrare la nave. </li><li> Una volta che l'osso sovrastante il seno sigmoideo è stato sufficientemente assottigliato, più alto ingrandimento viene utilizzata e un pick rettilineo viene utilizzato per rimuovere con attenzione l'osso sovrastante il seno sigmoideo. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2 L'area da forare in parte si sovrappone la sutura temporo-occipitale. Parte 4: ostruzione del dotto <ol><li> Il seno sigmoideo scheletrato è retratto medialmente a rivelare l'opercolo. </li><li> Un mm 0,5 diamante radica viene utilizzato per perforare l'opercolo mediale e nel sacco endolinfatico e condotto. </li><li> Il dotto endolinfatico è poi ricco di cera ossea con un pick diritto. </li><li> Il difetto del cranio viene poi rinforzata con Gelfoam (Pfizer, New York, NY). </li><li> 4-0 Polysorb (United States Surgical, Norwalk, CT) sutura è utilizzato per portare il muscolo insieme. Vi è poi una transizione senza soluzione di continuità ad una tecnica di sutura sottocutanea per chiudere l'incisione cutanea. Con questa chiusura non è necessario rimuovere punti di sutura dopo e non vi è alcun rischio che l'animale artiglio sul sito e tirare fuori una sutura. </li></ol> Parte 5: assistenza post-operatoria La cavia viene messa in un incubatore per mantenere la temperatura corporea e controllati ogni 30 minuti fino a quando sveglio e in grado di mantenere una posizione sternale. L'animale è ispezionato per determinare il tasso di respirazione e il colore del corpo. Questo centro usa enrofloxacina (0,2 ml a 22,7 mg / ml, per via sottocutanea) e la buprenorfina (0,05 ml a 0.3mg/mL, per via sottocutanea) per la profilassi post-operatoria l'infezione e il controllo del dolore, rispettivamente. Analgesico è somministrato una volta al giorno dell'intervento e due volte in giornata post-operatoria uno e due. Sebbene gli antibiotici non sono necessari per su asettichergery, cinque giorni, due volte al giorno di corso la profilassi antibiotica può essere givenonce post-operatoria di tre giorni. Complicanze e gestione <ol><li> Depressione respiratoria Il chirurgo deve sempre essere consapevoli della respirazione degli animali s. Se la respirazione rallenta o si ferma, interrompere l'intervento chirurgico e ispezionare visivamente il movimento del torace. Se l'animale è in difficoltà respiratoria o respiro affannoso, controllare che la bocca e le vie aeree non sono occluse. </li><li> Sigma penetrazione Gelfoam Usa e la compressione del seno con la punta di aspirazione fino a quando il sanguinamento è fermato. </li><li> Penetrazione durale coprire il difetto con Gelfoam. </li><li> Danno vestibolare Non praticare più di 1 mm lateralmente al seno sigmoideo. In questo modo rischi di ferire il canale semicircolare posteriore, tali da inficiare tutti i dati per la cavia. </li></ol>

<ol><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> Am J Otolaryngol. 10, 61-66 (1989).</li>
<li>Kimura, R., Schuknecht, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membranous+hydrops+in+the+inner+ear+of+the+guinea+pig+after+obliteration+of+the+endolymphatic+sac%5BTitle%5D)+AND+%22Pract+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Membranous hydrops in the inner ear of the guinea pig after obliteration of the endolymphatic sac.</a> Pract Otolaryngol. , (1965).</li>
</ol>

Gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti secondo le linee guida e regolamenti stabiliti dalla cura degli animali e del Comitato Istituzionale Usa presso la Case Western Reserve University.

Nelle settimane successive ostruzione chirurgica del dotto endolinfatico, il soggetto animale esperienze fluttuante perdita uditiva neurosensoriale misurata come risposta evocati uditivi del tronco encefalico. Un campione di risposta uditivi del tronco encefalico (ABR), la registrazione è mostrata in Figura 3. L'orecchio sinistro serve come controllo non operati. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1728/1728fig4.jpg"><img border="0" src="/files/ftp_upload/1728/1728fig3tmb.jpg" alt="FIgure 3" data-altupda...

induzione chirurgica di idrope endolinfatico da obliterazione del dotto endolinfatico

Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct

Induzione chirurgica del idrope endolinfatico (ELH) nella cavia da obliterazione e ostruzione del dotto endolinfatico è ben accettato modello animale della malattia e un importante correlazione per le malattie umane di Meniere. Nel 1965, Robert Kimura e Harold Schuknecht descrisse per primo un approccio intradurale per ostruzione del dotto endolinfatico (Kimura, 1965). Anche se efficace, questa tecnica, che richiede la penetrazione del rivestimento di protezione del cervello, sostenute a livello indesiderabili di morbilità e mortalità nei soggetti animali. Di conseguenza, Andrews e Bohmer sviluppato un approccio extradurale, che produce prevedibile un minor numero di complicanze associate del sistema nervoso centrale (SNC) penetrazione. (Andrews e Bohmer 1989) L&#39;approccio extradurale qui descritto richiede prima una incisione sulla linea mediana nella regione dell&#39;occipite per esporre lo strato muscolare sottostante. Operiamo solo sul lato destro. Dopo la ritrattazione appropriato del tessuto sovrastante, una incisione orizzontale è fatto nella muscolatura del occipite diritto di esporre il diritto temporo-occipitale linea di sutura. L&#39;osso immediatamente inferio-laterali la linea di sutura (Fig. 1) viene poi forato con un trapano otologica fino a quando il seno sigmoideo diventa visibile. Retrazione mediale del seno sigmoideo rivela l&#39;opercolo del condotto endolinfatico, che ospita il sacco endolinfatico. Foratura mediale per l&#39;opercolo nell&#39;area del sacco endolinfatico rivela il dotto endolinfatico, che viene poi confezionato con cera osseo di produrre l&#39;ostruzione e, in definitiva ELH. Nelle settimane successive, l&#39;animale sarà dimostrare la progressiva perdita dell&#39;udito e fluttuante evidenza istologica di ELH.

Questo video mostra come per ostacolare chirurgicamente condotto endolinfatico la cavia di produrre idrope endolinfatico.

Induzione chirurgica di Idrope endolinfatico da Obliterazione del dotto endolinfatico

L'induzione chirurgica dell'idrope endolinfatica (ELH) nella cavia, mediante obliterazione e ostruzione del dotto endolinfatico, è un modello animale ampiamente accettato...

Ciao, mi chiamo Chris Edden. Sono un ricercatore presso la Case Western Reserve University, nel Dipartimento di Otorinolaringoiatria e Chirurgia della Testa e del Collo. Oggi illustrerò il blocco chirurgico del dotto endolinfatico nel criceto, procedura che induce un'idrosi endolinfatica e viene utilizzata per modellare numerose patologie auricolari correlate a malattie.L'idrope linfatica è un rigonfiamento del compartimento endolinfatico della coclea ed è un importante marcatore istologico della malattia di Ménière. Qui si osserva un'immagine trasversale di una coclea normale con due compartimenti perilinfatici, la scala timpanica e la scala vestibolare, e una scala media non dilatata, che è continua con il dotto endolinfatico. Nelle settimane successive all'intervento chirurgico, la scala media diventa dilatata come indicato in questa immagine, e la membrana di Reissner risulta distesa. Gli animali sviluppano inoltre una perdita udittiva fluttuante progressiva nell'orecchio operato.Come in molte malattie dell'orecchio, l'induzione chirurgica di idrosi nel criceto della Guinea è stata il modello animale di riferimento per la malattia umana di Ménière sin dalla sua prima descrizione nel 1965 da parte di Robert Kor e Harold Schneck. Sebbene inizialmente la procedura fosse eseguita mediante un approccio più invasivo intradurale, il nostro centro preferisce un approccio extradurale poiché comporta una minore morbilità e mortalità per l'animale. Di seguito viene descritta la strumentazione, la cura dell'animale e l'approccio chirurgico necessari per eseguire in modo efficace e umano questa procedura piuttosto complessa.Per prima cosa, descriverò i materiali chirurgici necessari. L'animale è un criceto femmina adulto, razza Duncan Hartley, albino, proveniente da Charles River International Laboratories Incorporated. Per la preparazione della sala e l'allestimento sterile, saranno necessari abiti chirurgici sterili, un microscopio operatorio con copertura sterile e Mars, un telo chirurgico fenestrato di piccole dimensioni, un tappetino riscaldante intraoperatorio e un apparecchio per aspirazione.Un numero cinque, aspirazione, un numero 40 di soluzione salina sterile per aspirazione, un bacile in acciaio inossidabile e un supporto per la testa. Per l'anestesia, serviranno chetamina 60 milligrammi per chilogrammo e xilazina 12 milligrammi per chilogrammo preoperatoriamente. Sarà necessario un lubrificante oftalmico a base di petrolio, un rasoio elettrico, Betadine e alcol etilico al 70%. Intraoperatoriamente, serviranno 0,6 millilitri di marcaina allo 0,25%, un bisturi sicurezza monouso numero 11, tre pinze emostatiche curve, un elevatore periosteo di Lieber, punte chirurgiche WEX, un trapano otologico, una fresa diamantata da 1,5 millimetri e una fresa diamantata da 0,5 millimetri.Una curetta per osso a punta dritta, una siringa da 10 cc, cera per osso, gel schiuma, sutura assorbibile quattro-zero con ago tagliente P-13, pinze adinin, pinza portaago con ganasce a diamante e forbici per sutura. Per le cure post-operatorie, sarà necessaria una gabbia pulita con pad riscaldante. Zero virgola due millilitri di enrofloxacina a 22,7 milligrammi per millilitro.0,05 millilitri di buprenorfina 0,3 milligrammi per millilitro. Anestetizzare innanzitutto il porcellino d'India con ketamina 60 milligrammi per chilogrammo e xilazina 12 milligrammi per chilogrammo per via intramuscolare. Questo regime consente da 60 a 90 minuti di anestesia senza depressione respiratoria, tempo generalmente sufficiente per eseguire questa procedura.Dopo aver anestetizzato l'animale, viene applicato un lubrificante a base di petrolio sugli occhi. Successivamente, la parte posteriore della testa viene rasata con un rasoio elettrico, dalla regione toracica superiore fino alla sommit&agrave; del capo. Quindi la zona viene preparata con Betadine, seguito da alcol.Ora l'animale è pronto per l'intervento chirurgico. Mi chiamo dott. Cliff McGillion. Sono professore di Otorinolaringoiatria e Chirurgia della Testa e del Collo presso le Case Western Reserve University Hospitals di Cleveland e direttore dell'Otologia e della Neurotologia.Ciò di cui voglio parlarvi oggi è la tecnica chirurgica per indurre l'idrosi endolinfatica nel criceto dorato. Procediamo in modo extrorale ed esponiamo il seno sigmoideo e, appena anteriormente e lateralmente al seno sigmoideo, individuiamo l'orifizio del sistema endolinfatico. Rimuoviamo il materiale del dotto e quello della sacca ed effettivamente fresiamo il dotto sotto visione diretta.La parte più importante, secondo me, della procedura è la dissezione del seno sigmoideo e poi quella mediale, con la visualizzazione diretta dell'ostio del dotto endolinfatico. Una volta preparato il sito chirurgico, l'animale viene trasferito in sala operatoria e posizionato su un supporto per la testa. Il collo viene flesso per ottenere un'esposizione adeguata della cresta occipitale e viene ricoperto in modo sterile per garantire la salute e la sicurezza dell'animale.Osservare la stessa tecnica sterile che sarebbe richiesta per un paziente umano al fine di mantenere una temperatura corporea adeguata durante l'intervento; assicurarsi che un tappetino riscaldante sia posizionato sotto la superficie operatoria prima del primo taglio chirurgico. Viene iniettato un segnale attorno al sito chirurgico. L'intervento chirurgico inizia praticando un'incisione cutanea mediana dorsale sul cuoio capelluto lungo l'occipite per ottenere un'esposizione adeguata; quindi si pratica la retrazione della cute posizionando una pinza emostatica su ciascun lato dell'incisione. La cauterizzazione elettrica non sarà necessaria poiché il criceto presenta un meccanismo emostatico robusto.Successivamente, viene eseguita un'incisione orizzontale lungo il muscolo del collo. Per esporre l'occipite osseo, un'incisione ben posizionata può immediatamente esporre la linea della sutura temporale-occipitale, come mostrato qui. Il taglio del nervo occipitale maggiore, che si trova comunemente al di sotto del muscolo, può provocare un fremito nell'animale.Nonostante un'adeguata anestesia durante il taglio del muscolo, è importante percepire l'osso al di sotto della lama. In caso contrario, l'incisione potrebbe essere troppo bassa, con il rischio di sezione del midollo spinale una volta attraversato il muscolo del collo. Un terzo emostatico viene utilizzato per afferrare la porzione superiore dell'incisione ed è mantenuto in posizione dall'assistente chirurgico.La dissezione ottusa viene utilizzata per esporre l'osso occipitale. Ricordare di rimanere sempre sul lato destro della cresta occipitale esterna e che l'orecchio sinistro funge da controllo. In questo modello, un sollevatore periosteo A lumper viene quindi utilizzato per ulteriormente esporre il cranio ed evidenziare la cresta occipitale esterna e la linea della sutura occipitotemporale. La foratura con una fresa diamantata da 1,5 millimetri inizia appena al di sotto della linea della sutura.L'obiettivo è esporre la fossa auricolare posteriore e il seno sigmoideo. Tutto il trapanamento deve rimanere sulla linea di separazione temporale-occipitale o in posizione inferiore in ogni momento. Mantenere un tubo da aspirazione numero cinque per aspirare il sangue.Chiedere anche a un assistente di mantenere il campo irrigato con soluzione salina sterile, goccia a goccia da una siringa da 10 cc. La perforazione provocherà un certo sanguinamento dal midollo, ma la fresa diamantata può essere utilizzata per arrestare i vasi sanguinanti a una profondità di circa un millimetro.Apparirà una linea blu tenue. Questa è la seno sigmoideo. Fermati semplicemente qui.Il tuo un laterale rispetto al seno sigmoideo. Può essere trovata una protuberanza del dotto endolinfatico. È importante definire i margini del seno sigmoideo senza penetrarlo.Una volta che l'osso sovrastante è diventato sufficientemente sottile, la perforazione viene interrotta e l'aspirazione viene modificata a un numero 40. Si utilizza anche un ingrandimento maggiore. Un picchetto dritto viene usato per rimuovere delicatamente l'osso sovrastante.Il seno sigmoideo viene delicatamente retratto medialmente, esponendo l'opercolo, che potrebbe non essere chiaramente visibile poiché spesso è oscurato dal sangue. Ora il seno sigmoideo, completamente dissezionato, viene delicatamente retratto medialmente, esponendo l'opercolo. La scarpatura viene ora fresata con una punta di piccole dimensioni da 0,5, distruggendo il sacco endolinfatico e portando infine al dotto endolinfatico.Il dotto è visibile come un'ellisse scura all'interno della bianchezza dell'osso circostante. Viene praticato un foro di circa un millimetro nel dotto, prima che venga occluso con cera per ossa. La cera per ossa viene inserita nel dotto utilizzando della spugna di gelatina.Questa occlusione del dotto linfatico endolinfatico indurrà idrope linfatica endolinfatica; si utilizza un filo di sutura Poly Shorb 4.0 per avvicinare il muscolo. Successivamente, si passa senza interruzioni a una tecnica di sutura sottocutanea per l'incisione cutanea. Con questa chiusura, non è necessario rimuovere le suture in un secondo momento, e non sussiste il rischio che l'animale gratti il sito o estragga una sutura o una graffetta.Dopo l'intervento, il criceto della Guinea viene collocato in un'incubatrice per mantenere la temperatura corporea, con controlli ogni 30 minuti finché non si sveglia. L'animale viene esaminato per valutare la frequenza respiratoria e il colore del corpo. Questo centro utilizza l'antibiotico a spettro ampio inin e buprenorfina per le complicanze dolorose.Come per qualsiasi intervento chirurgico, esistono dei rischi per il soggetto. Di seguito illustrerò alcune possibili complicanze intraoperatorie e come evitarle. Depressione respiratoria: il chirurgo deve prestare sempre attenzione alla respirazione dell'animale, nel caso in cui questa si arresti o rallenti.Interrompere l'intervento chirurgico e ispezionare visivamente la presenza di movimenti toracici. Se l'animale è in apnea, verificare che la bocca e le vie aeree non siano ostruite. Per la penetrazione del seno sigmoideo, utilizzare schiuma gelatinosa e compressione insieme alla punta di aspirazione fino a quando il sanguinamento non si arresta.Coprire la penetrazione durale con schiuma gelatinosa; evitare di scavare più di un millimetro lateralmente al seno sigmoideo, altrimenti si potrebbe danneggiare il canale semicircolare posteriore, invalidando così tutti i dati relativi a quel particolare criceto della Guinea. L'occlusione chirurgica del dotto endolinfatico nel criceto della Guinea è un intervento chirurgico tecnico e complesso, ma con strumenti adeguati, istruzioni appropriate e una conoscenza approfondita dell'anatomia interessata, può essere eseguito in modo sia umano per l'animale sia utile come modello della malattia di Ménière umana.

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