Name: Trapianto ortotopico aortica: un modello di ratto per studiare lo sviluppo di vasculopatia cronica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-04T17:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: Impara il trapianto ortotopico aortico nel ratto per studiare la vasculopatia cronica da trapianto. Questo modello PVG-CI permette di analizzare la formazione del neointima e i meccanismi del rigetto.

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Gli autori ringraziano Christiane Pahrmann per il suo lavoro istologico. Finanziamento Sonja Schrepfer ha ricevuto un assegno di ricerca dalla Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 e SCHR992/4-1).]

I ratti del peso di circa 250-300g sono acquistati da Charles River (Sandhofer Weg 7, D-97633 Sulzfeld). I trapianti sono eseguiti utilizzando ratti PVG come donatori, e ratti ACI come destinatari. I ratti sono alloggiati in condizioni convenzionali, alimentati standard di ratto chow e libidum ad acqua. Tutti gli strumenti chirurgici vengono sterilizzati prima dell&#39;uso. Donatore preparazione: Anestetizzare ratto con isoflurano (2,5-3%) con una camera di induzione. <ol><li> Radersi i capelli addominale e toracica e posizionare il ratto sulla sua schiena e posizionare una maschera sul suo naso e la bocca per mantenere l&#39;anestesia. </li><li> Disinfettare la zona addominale e toracica utilizzando ampiamente Provo-Iodio, utilizzare prossimi 80% di etanolo, ripetere questa operazione tre volte. </li><li> Controllare riflessi pizzicare i piedi posteriori per essere sicuri che il topo è sufficiente anesthesized. </li><li> Exsanguinate il ratto aprendo l&#39;addome e il taglio un buco in aorta addominale. </li><li> Aprire delicatamente il torace per trovare l&#39;aorta toracica discendente. </li><li> Sezionare l&#39;aorta toracica dai tessuti circostanti come il grasso, nervi e l&#39;esofago. </li><li> Prelevare un pezzo 1,5 centimetri dell&#39;aorta con un couter, senza danni ai tessuti dell&#39;aorta. </li><li> Profumato l&#39;innesto aortico accuratamente con acqua fredda soluzione salina sterile e conservare l&#39;innesto a 4 ° C. </li></ol> Destinatario: Anestetizzare ratto con isoflurano (2,5-3%) con una camera di induzione. La temperatura corporea è mantenuta durante la procedura chirurgica. <ol><li> Shave zona addominale e applicare una pomata oculare per evitare che gli occhi si secchi durante l&#39;anestesia. </li><li> Posizionare il topo sul dorso e posto una maschera sul suo naso e la bocca per mantenere l&#39;anestesia. </li><li> Disinfettare la zona addominale utilizzando Provo-Iodio, utilizzare prossimi 80% di etanolo, ripetere questa operazione tre volte. </li><li> Controllare riflessi pizzicare i piedi posteriori per essere sicuri che il topo è sufficiente anesthesized. </li><li> Eseguire una incisione addominale mediana che separa la pelle ei muscoli in due fasi per aprire l&#39;addome. </li><li> Posto l&#39;intestino in un guanto salina riscaldata idratata in polvere libera. Piegare il guanto intorno l&#39;intestino per prevenire la perdita di umidità. </li><li> Rimuovere il tessuto adiposo che copre l&#39;aorta addominale. </li><li> Sezionare l&#39;aorta formano la regione infrarenale alla biforcazione, attenzione a non causare danni sui rami dei vasi. </li><li> Se necessario legare i rami dell&#39;aorta. </li><li> In primo luogo usare una pinza microchirurgica da parte infrarenale dell&#39;aorta sezionato per fermare il flusso di sangue. </li><li> Successivamente, inserire un secondo morsetto vicino alla biforcazione dell&#39;aorta. </li><li> Ora che il flusso di sangue si arresta, rimuovere un breve segmento di aorta. </li><li> Prendere l&#39;innesto aortico donatore, che è stato conservato in soluzione salina sterile allo 0,9% sul ghiaccio, per accorciare la lunghezza adeguata e posizionarlo nella fessura. </li><li> Collegare l&#39;aorta donatore al ricevente aorta, eseguendo punti di sutura in esecuzione utilizzando 8-0 prolene sutura (Ethicon, Norderstedt, Germania). Inizia con il cranio end-to-end anastomosi. </li><li> Quando il distale end-to-end anastomosi è finito, aprire con cautela il morsetto distale. </li><li> Quando non c&#39;è sanguinamento dopo l&#39;apertura del morsetto distale, aprire con cautela la pinza del cranio. In caso di sanguinamento in suture, chiudere il morsetto di nuovo, individuare il sanguinamento e fermare l&#39;emorragia utilizzando un unico punto. </li><li> Ci dovrebbe essere un impulso visibile alla fine distale dell&#39;aorta. </li><li> Avanti spostare l&#39;intestino nuovamente dentro l&#39;addome. </li><li> Lavare l&#39;addome preriscaldata con soluzione salina sterile. </li><li> Chiudere lo strato muscolare della parete addominale con suture 6-0 prolene esecuzione (Ethicon, Norderstedt, Germania). </li><li> Utilizzare 5-0 prolene (Ethicon, Norderstedt) in esecuzione suture per chiudere la pelle. </li><li> Mentre il topo è ancora in anestesia, iniettare 4-5mg/kg Carprofen per via sottocutanea. </li><li> Per fornire l&#39;analgesia sufficiente per questo tipo di procedura, metamizol viene aggiunto all&#39;acqua potabile (Metamizol 50 mg per 100 ml) di farmaci antidolorifici per 3 giorni post-trapianto. </li></ol>

<ol><li>Deuse, T., Hoyt, G., Koyanagi, T., Robbins, R. C., Schrepfer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+and+Inhibition+But+Not+Reversion+of+Chronic+Allograft+Vasculopathy+by+FK778%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prevention and Inhibition But Not Reversion of Chronic Allograft Vasculopathy by FK778.</a> Transplantation. 85, 870-877 (2008).</li>
<li>Mennander, A., Tiisala, S., Halttunen, J., Yilmaz, S., Paavonen, T., Hayry, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+rejection+in+rat+allografts.+An+experimental+model+for+transplant+arteriosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Chronic rejection in rat allografts. An experimental model for transplant arteriosclerosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 11, 671-680 (1991).</li>
<li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 57, 225-225 (1969).</li>
<li>Poston, R. S., Billingham, M., Hoyt, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin+reverses+chronic+graft+vascular+disease+in+a+novel+cardiac+allograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Rapamycin reverses chronic graft vascular disease in a novel cardiac allograft model.</a> Circulation. 100, 67-100 (1999).</li>
<li>Schrepfer, S., Deuse, T., Koch-Nolte, F., Krieger, T., Haddad, M., Schäfer, H., Pelletier, M. P., Robbins, R. C., Reichenspurner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FK778+in+Experimental+Xenotransplantation%3A+A+Detailed+Analysis+of+Drug+Efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">FK778 in Experimental Xenotransplantation: A Detailed Analysis of Drug Efficacy.</a> J Heart Lung Transplant. 26, 70-77 (2007).</li>
</ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Per vari motivi abbiamo trovato il modello di trapianto ortotopico aortica un modo più preciso per studiare lo sviluppo di TVP rispetto al modello eterotopico trapianto di cuore: Per quanto riguarda la tecnica chirurgica, il modello di trapianto aortica rappresenta un metodo facilmente realizzabile, che richiede esclusivamente la realizzazione di end-to-end-anastomosi, mentre il modello eterotopico trapianto di cuore può essere considerato una sfida più complesso e soggetto ad errori abilità del chirurgo s , che ...

<table><tbody><tr><td>Microscopio chirurgico (ingrandimento 25x)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Depilatore</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Provo-Iodio</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina allo 0,9% fredda con ghiaccio</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina sterile allo 0,9% preriscaldata</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Unguento oftalmico</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Guanto</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forbici microchirurgiche</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pinze</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Morsetti</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Filetto 8-0 (prolene)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Filetto 6-0 (prolene)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Filetto 5-0 (prolene)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Carprofene</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metamizolo</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cotton fioc</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

trapianto ortotopico aortica: un modello di ratto per studiare lo sviluppo di vasculopatia cronica

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Modelli di ricerca di rigetto cronico sono essenziali per studiare i processi fisiopatologici pathobiological e durante lo sviluppo di vasculopatia trapianto (TVP). Il modello animale comunemente utilizzati per gli studi cardiovascolari rigetto cronico è il modello eterotopico trapianto di cuore eseguito in roditori di laboratorio. Questo modello è ampiamente utilizzato negli esperimenti dal Ono e Lindsey (3) ha pubblicato la propria tecnica. Per analizzare i risultati nei vasi sanguigni, il cuore deve essere sezionato e tutte le navi devono essere misurate. Un altro metodo per indagare il rigetto cronico nel interrogativi cardiovascolare è il modello di trapianto aortica (1, 2). Nel modello di trapianto ortotopico aortica, l&#39;aorta può essere facilmente valutati istologicamente (2). Il modello PVG-to-ACI è particolarmente utile per gli studi CAV, dal rigetto acuto vascolare non è uno dei principali fattori di confondimento e ciclosporina A (CsA) il trattamento non impedisce lo sviluppo della CAV, simile a quello che troviamo in ambito clinico (4 ). A7-giorni di CsA è richiesto in questo modello per prevenire il rigetto acuto e di raggiungere sopravvivenza a lungo termine con lo sviluppo di TVP. Questo modello può essere utilizzato anche per studiare rigetto cellulare acuto e necrosi dei media nei modelli xenogeniche (5).

Questo video dimostra il modello di trapianto ortotopico aortica come un semplice modello per studiare lo sviluppo di vasculopatia trapianto (TVP) nei ratti.

Trapianto ortotopico aortica: un modello di ratto per studiare lo sviluppo di vasculopatia cronica

I modelli di ricerca sul rigetto cronico sono essenziali per indagare i processi patobiologici e patofisiologici durante lo sviluppo del trapianto...

L'obiettivo generale di questa procedura è stabilire un modello accurato e un metodo facilmente realizzabile per studiare lo sviluppo della vasculopatia da trapianto. Questo viene ottenuto utilizzando la combinazione di ceppi PVG e CI. Il secondo passaggio della procedura consiste nel prelevare l'aorta del donatore.Il terzo passaggio della procedura consiste nel preparare il ricevente. L'ultimo passaggio della procedura è l'anastomosi dell'aorta del donatore con l'aorta del ricevente. Alla fine, è possibile ottenere risultati che mostrano la formazione di neo-intima mediante istopatologia.Ciao, sono Sonya Schwefel, professoressa di immunologia dei trapianti presso il Thet Eye Lab del Centro Cardiaco Universitario di Amburgo, Germania. E io sono Manish Duboff, anch'io del TS Eye Lab.Il mio laboratorio si interessa di immunologia dei trapianti. In questo video vi presenteremo il modello di trapianto aortico ortotopico, un modello semplice e valido per studiare lo sviluppo della vasculopatia da trapianto nei topi. Utilizziamo questa procedura nel nostro laboratorio per indagare il rigetto cronico nelle patologie cardiovascolari.Nel modello di trapianto ortotopico dell'aorta, l'aorta p

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Descriviamo una tecnica in cui viene trapiantato una sezione dell'aorta addominale di un topo ortotopicamente a appena sotto le arterie renali di un destinatario allogenici o singenici. Questa tecnica può essere utile in studi in cui si considera il trapianto di grandi arterie di dimensioni uniformi vantaggiosa.

Aortica trapianto ortotopico in Mouse per lo studio della malattia vascolare

Descriviamo un protocollo per l'innesto di interposizione aortica nei topi. L'obiettivo del protocollo è quello di fornire un modello con cui studiare i processi patologici e le strategie terapeutiche rilevanti per le reazioni alloimmuni nelle arterie e le conseguenti modificazioni arteriose che contribuiscono al fallimento del trapianto d'organo.

Modello murino della alloimmune indotta Rifiuto vascolare e trapianto Arteriosclerosi

Inserimento del catetere in poliuretano nel lumen aortico e legatura del suturare dell'aorta indurre ipossia cronica dovuto il hypoperfusion del vasorum adventitial. Questo articolo descrive un nuovo modello animale di aneurysm aortico addominale (AAA) con caratteristiche simili a quelle di AAA in esseri umani.

Creazione di un modello del roditore del Aneurysm aortico addominale bloccando Adventitial Vasa Vasorum perfusione

Qui, presentiamo un protocollo di trapianto aortico eterotopico nei topi utilizzando la tecnica del bracciale non-suture in un modello di murino cervicale. Questo modello può essere utilizzato per studiare la patologia sottostante della vasculopatia allotrapianto cronica (CAV) e può aiutare a valutare nuovi agenti terapeutici al fine di prevenirne la formazione.

Modello di trapianto aortico cervicale murine utilizzando una tecnica di manette non sutura modificata

Descriviamo un modello di trapianto di cuore addominale eterotopico nei ratti, implicando modifiche delle strategie attuali, che portano a un approccio chirurgico semplificato. Inoltre, descriviamo un nuovo modello di rigetto mediante iniezione in-ear di cellule muscolari cardiache vitali, consentendo ulteriori analisi immunologiche dei trapianti nei ratti.

Un modello immunologico per il trapianto di cellule cardiache e cardiache cardiache cardiache cardiache cardiache cardiache

Questo documento presenta un protocollo di trapianto di lembi osteomiocutaneo eterotopico parziale nei ratti e i suoi potenziali risultati nel follow-up a medio termine.

Modello di trapianto parziale di arti posteriori eterotopiche nei ratti

Questo protocollo descrive un metodo semplice ed efficiente per il trapianto di foglietti valvolari aortici sotto la capsula renale per consentire lo studio dell'alloreattività delle valvole cardiache.

Un modello semplificato per il trapianto di valvole cardiache eterotopiche nei roditori

Dimostriamo come stabilire un modello murino di impianto della radice polmonare nell'aorta discendente per simulare la procedura di Ross. Questo modello consente la valutazione a medio/lungo termine del rimodellamento dell'autotrapianto polmonare in posizione sistemica, rappresentando la base dello sviluppo di strategie terapeutiche per favorirne l'adattamento.

Un modello di roditore dell'operazione di Ross: impianto di innesto di arteria polmonare singenica in una posizione sistemica

Il modello di trapianto renale ortotopico di ratto contribuisce a studiare il meccanismo di rigetto dell'allotrapianto renale. Il modello attuale aumenta la sopravvivenza dei riceventi senza interferenze con l'afflusso di sangue e il reflusso venoso della parte inferiore del corpo utilizzando un'anastomosi end-to-end dell'impianto renale e un metodo "tunnel" end-to-side di anastomosi uretere-vescica.

Un modello di trapianto renale ortotopico di ratto per il rigetto dell'allotrapianto renale

Questo studio dimostra una tecnica di trapianto di cuore addominale eterotopico riproducibile nei ratti che i principianti possono imparare ed eseguire. Inoltre, un nuovo modello di rigurgito aortico nei ratti viene generato eseguendo un trapianto di cuore addominale eterotopico e danneggiando la valvola aortica del donatore utilizzando un filo guida dopo la raccolta.

Trapianto di cuore addominale eterotopico modificato e un nuovo modello di rigurgito aortico nei ratti

Questo lavoro presenta un modello animale di fibrosi indotta da transizione endoteliale a mesenchimale, come si vede nei difetti cardiaci congeniti come la stenosi aortica critica o la sindrome del cuore sinistro ipoplasico, che consente una valutazione istologica dettagliata del tessuto, l'identificazione delle vie di segnalazione regolatorie e la verifica delle opzioni di trattamento.

Un modello di trapianto di cuore di ratto eterotopico neonatale per lo studio della transizione da endoteliale a mesenchimale

Impara il trapianto ortotopico aortico nel ratto per studiare la vasculopatia cronica da trapianto. Questo modello PVG-CI permette di analizzare la formazione del neointima e i meccanismi del rigetto.

Trapianto ortotopico aortica: un modello di ratto per studiare lo sviluppo di vasculopatia cronica

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