Iniezione ortotopica nel cuscinetto adiposo mammario: stabilire il cancro al seno nei topi

Innanzitutto, stabilire la linea cellulare di carcinoma mammario desiderata in coltura. Il giorno prima dell'operazione, radere l'addome del topo e utilizzare una crema depilatoria per rimuovere il pelo ed esporre i capezzoli inguinali. Il giorno dell'operazione, raccogliere le cellule, anestetizzare il topo e confermare la mancanza di risposta al pizzicamento delle dita dei piedi. Usando una pinzetta, pizzica la pelle intorno al capezzolo per creare un tunnel sollevato.

Quindi, con la siringa delle cellule raccolte, forare la pelle. L'ago dovrebbe seguire il tunnel fino a quando la punta non si avvicina al capezzolo. Sposta delicatamente la punta dell'ago verso l'alto nel cuscinetto adiposo mammario, appena sotto il capezzolo. Rimuovere le pinzette per formare una tenda di pelle con l'ago e poi iniettare lentamente le cellule.

Infine, ritrarre la siringa, facendo attenzione a non disturbare la protuberanza rotonda che circonda il capezzolo. Le cellule iniettate e i successivi tumori esprimono luciferasi e possono essere monitorati utilizzando l'imaging bioluminescente. Nel protocollo di esempio, mostreremo l'instaurazione del carcinoma mammario ortotopico murino. Il giorno prima del