Rimozione meccanica della membrana di Corion e Vitellina: un metodo per preparare gli ovociti di Drosophila per l'osservazione diretta

- Inizia con ovociti maturi da ovaie fisse in una soluzione salina. Gli ovociti maturi portano gusci d'uovo costituiti da un corion esterno e da una membrana vitellina interna.

Per rimuovere meccanicamente il corion e la membrana vitellina, posizionare gli ovociti tra le parti smerigliate di due vetrini pretrattati. Muovi il vetrino superiore con movimenti rettilinei avanti e indietro per creare un attrito che fa rotolare gli ovociti.

Ora, sposta il vetrino superiore con una leggera angolazione per far rotolare gli ovociti in un'altra direzione. Evitando movimenti circolari, aumentare questo angolo con incrementi brevi fino a quando la guida superiore non si sposta perpendicolarmente alla guida inferiore. Questo movimento rimuove meccanicamente i corioni e le membrane vitelline, consentendo l'accesso di sonde o coloranti nell'ovocita.

Gli ovociti senza corioni appariranno lunghi e sottili e quelli senza membrane vitelline avranno estremità appuntite. Per separare gli ovociti eliminati dai detriti circostanti, trasferire la miscela del campione in una provetta e lasciare che gli ovociti si depositino sul fondo mentre i detriti galleggiano in alto e possono essere rimossi.

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