Saggio della risposta fotomotoria: un metodo per misurare la risposta comportamentale delle larve di pesce zebra a un improvviso cambiamento nelle condizioni di illuminazione

- Per iniziare, trasferisci 10 embrioni di zebrafish, con l'aiuto di una pipetta di trasferimento, in un becher riempito con 20 millilitri di acqua. Ora, fai crescere gli embrioni a 28 gradi Celsius, sotto l'appropriato ciclo di luce e buio richiesto per un esperimento. Quindi, trasferisci le larve in piastre a pozzetti. Assicurati che ogni pozzetto contenga una larva per dare abbastanza spazio per nuotare.

Ora riempi completamente ogni pozzo con acqua. Posizionare la piastra del pozzetto nella camera di registrazione comportamentale e tracciare il movimento larvale utilizzando il software di tracciamento video. Le larve mostrano un aumento del movimento al buio e una diminuzione del movimento alla luce quando esposte a un ciclo anormale di luce e buio a causa dell'aumento dei livelli di stress. Calcolando la differenza tra la distanza media percorsa durante l'ultimo minuto di un periodo iniziale e il primo minuto del periodo successivo ci dice la risposta fotomotoria del pesce.

In questo protocollo, esamineremo la risposta fotomotoria in larve di zebrafish e minnow fathead esposte alla caffeina. Per prima cosa, posizionare la piastra a pozzetti contenente il pesce sperimentale nel