Test delle preferenze luce-buio: un metodo per studiare il comportamento correlato all'ansia nel pesce zebra

0 views • 4:45 min • April 30th, 2023

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- Innanzitutto, crea un recinto su tre lati attorno all'area di test per ridurre al minimo gli stimoli esterni che possono influenzare il comportamento dei pesci. Imposta un'illuminazione diffusa dall'alto per evitare riflessi sulla superficie dell'acqua. Successivamente, riempi l'arena, che è divisa in zone scure e chiare, con l'acqua dell'habitat mantenuta a 28 gradi Celsius.

Posiziona l'arena nel recinto. Tenere la vasca dell'habitat, contenente i pesci da testare, all'esterno del recinto. Lascia che i pesci si acclimatino per ridurre il loro stress.

Ora, cattura delicatamente un pesce dalla vasca dell'habitat e mettilo nella vasca di prova. Posiziona il pesce perpendicolarmente ai lati lunghi dell'arena per evitare distorsioni verso entrambe le zone. Osservare il comportamento del pesce utilizzando un software di registrazione e ripetere il test per il resto del pesce. Misura il tempo medio trascorso da ciascun pesce nelle zone chiare e scure.

I pesci zebra tendono a trascorrere più tempo nella zona oscura quando sono ansiosi. Nel protocollo di esempio, eseguiremo un test chiaro-scuro per osservare l'effetto dell'esposizione all'etanolo sul comportamento del pesce zebra.

- Ottieni un'arena chiaro-scura di 9 centimetri e 1/2 di larghezza per 55 centimetri di lunghezza e 9 e 1/2 centimetri di profondità con un pavimento impermeabile bianco. Applicare carta impermeabile e antiriflesso bianca e nera alle pareti interne dell'arena utilizzando il velcro, con metà dell'arena coperta di bianco e metà ricoperta di nero. Riempi l'arena fino a una profondità di 5 centimetri con acqua dell'habitat a una temperatura compresa tra 25 e 28 gradi Celsius. Mantenere questa temperatura durante il test.

Riduci al minimo gli stimoli visivi esterni costruendo un recinto bianco su tre lati in cui posizionare l'arena. Assicurarsi che l'area di test abbia un'illuminazione diffusa dall'alto che non causi riflessi sulla superficie dell'acqua, ma sia sufficientemente luminosa per il software di tracciamento del movimento o la quantificazione manuale post hoc dalle immagini video. Quindi impostare i parametri di registrazione e analisi del movimento del software di tracciamento del comportamento con una durata di prova da 5 a 15 minuti, a seconda della domanda di ricerca.

Trasporta il gruppo di pesci da testare nell'area di ricerca nella vasca dell'habitat e posizionali all'esterno del recinto dell'arena. Lasciare acclimatare il pesce per 10 minuti. Cattura delicatamente un pesce del gruppo appropriato e posizionalo al centro dell'arena chiaro-scuro, rilasciando ogni pesce quando è posizionato parallelamente all'asse lungo dell'arena per evitare di inclinare il pesce verso la zona chiara o scura.

Inizia a registrare il comportamento subito dopo che l'animale è stato rilasciato. Fai attenzione a eventuali problemi software con il tracciamento del pesce o al salto o al congelamento dei pesci. Al termine della prova, rete delicatamente e rimuovi il pesce dall'arena in una vasca di contenimento o in una vasca di isolamento. Ruota l'arena di 180 gradi dopo che metà dei soggetti sono stati testati per evitare confusioni dovute a distorsioni derivanti da quale estremità dell'arena è orientata verso l'estremità aperta del recinto.

Inizia l'analisi esaminando il tempo trascorso nelle zone chiare rispetto a quelle scure. Per ogni gruppo e per ogni pesce, ottenere il tempo relativo trascorso nelle zone chiare e scure e analizzare utilizzando un test t su un campione per determinare se i gruppi preferiscono significativamente un'area rispetto all'altra. Per confrontare le preferenze, calcolare un indice di preferenza sottraendo il tempo trascorso nella zona chiara dal tempo trascorso nella zona scura e confrontare le differenze tra i gruppi utilizzando i test t. Confronta più gruppi con un'analisi unidirezionale della varianza, utilizzando il test post hoc della differenza significativa onesta di Tukey, ove necessario.

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Last updated: 25 July 2026