0 visualizzazioni • 0:04 min. • April 30th, 2023
- Nelle larve di zebrafish, uno stimolo visivo può attivare i neuroni somatosensoriali e innescare una risposta di fuga. Ci sono due tipi di tali neuroni che si trovano nella larva, i neuroni del trigemino e quelli della barba di Rohon. Possiamo manipolare l'attività di questi neuroni modificandoli per esprimere canali ionici transgenici sensibili alla luce. Questo approccio è chiamato optogenetica.
Per eseguire questa tecnica, montare una larva transgenica con il lato dorsale rivolto verso l'alto in gel di agarosio e posizionarla sotto un microscopio da dissezione. Usa una lama di rasoio per staccare una porzione a forma di cuneo di agarosio intorno al tuorlo e alla coda. Riempi quest'area con acqua d'uovo. Estrarre l'agarosio dal tronco e dalla coda della larva.
Posizionare la punta di un cavo ottico vicino al tronco dove si trova il corpo cellulare del neurone di Rohon-Beard. Emette un impulso di luce laser blu. Dopo l'esposizione alla luce blu, i canali ionici transgenici sensibili alla luce nella membrana del neurone si aprono, consentendo agli ioni di entrare, innescando un potenziale d'azione che suscita la risposta di fuga. Registra il comportamento della larva utilizzando
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