Elettrofisiologia del Patch Clamp a cellula intera: un metodo per studiare le proprietà elettriche dei neuroni

- Iniziare posizionando su un tavolino da microscopio una camera di registrazione contenente un campione in una soluzione da bagno, la cui composizione corrisponde all'ambiente extracellulare fisiologico o al citoplasma. Far avanzare la micropipetta di registrazione, una pipetta contenente un elettrodo d'argento immerso in una soluzione elettrolitica, che imita le condizioni intracellulari, verso il neurone applicando una pressione positiva, e fare contatto con la membrana cellulare.

Passare delicatamente dalla pressione positiva a quella negativa per formare una tenuta ermetica tra la membrana e la pipetta. Impostare un potenziale di mantenimento sull'amplificatore per mantenere la cella a una tensione costante. Quindi rompere la membrana cellulare all'interno della micropipetta applicando l'aspirazione.

Una volta che la membrana cellulare si rompe, il potenziale di tenuta provoca il flusso di ioni attraverso canali ionici voltaggio-dipendenti, creando un potenziale di membrana, che viene registrato dall'elettrodo di registrazione. Registrare immediatamente il potenziale di membrana. L'elettrodo di registrazione trasmette il segnale all'amplificatore di retroazione, che sottrae il