Iniezione intramuscolare (IM): Somministrazione di composto nel muscolo dorsale di un pesce zebra adulto

- Trasferisci un pesce anestetizzato con tricaina su una spugna bagnata con il lato dorsale rivolto verso l'alto. Metti la spugna che trasporta il pesce al microscopio. Posizionare un ago per microiniezione a un angolo di 45 gradi rispetto all'asse del corpo vicino al muscolo dorsale.

Successivamente, individua il punto davanti alla pinna dorsale che non è coperto da squame dove puoi inserire l'ago senza applicare grande forza. Quindi inserire delicatamente l'ago e iniettare lentamente il composto di interesse insieme a un pennarello come il rosso fenolo nel muscolo.

Se il composto di interesse contiene materiale genetico, elettroporare le cellule posizionando elettrodi su entrambi i lati del sito di iniezione e somministrando la corrente. La corrente rende le cellule muscolari permeabili e in grado di assorbire in modo efficiente il materiale genetico. Dopo la procedura, trasferire immediatamente il pesce in una vasca di recupero. Nel seguente protocollo, eseguiremo un'iniezione intramuscolare su un pesce zebra adulto per somministrare un vaccino a DNA contro la micobatteriosi.

Per mantenere il pesce in una posizione fissa durante l'iniezione, utilizzare un pezzo di spugna con una