Co-coltura di cellule BC: coltura di cellule di cancro al seno con frammenti ossei per studiare la proliferazione delle cellule tumorali

0 visualizzazioni • 3:19 min. • April 30th, 2023

Inizia inserendo un pezzo di cera ossea in due piastre di coltura cellulare etichettate come test e controllo. Pipettare una quantità adeguata di cellule di cancro al seno che esprimono bioluminescenza al centro di ciascuna piastra e incubare le piastre per una durata specifica per facilitare l'adesione delle cellule. Posizionare un piccolo espiantante osseo sulla cera ossea nella piastra di prova e fissarlo applicando pressione.

Versare lentamente un terreno di coltura cellulare con siero fetale bovino, un integratore per la crescita, su ciascun lato della piastra per immergere l'espiante e incubare a 37 gradi Celsius per una durata specifica. Il tessuto osseo nella piastra di prova rilascia fattori solubili, come le citochine e la chinasi SRC, che attirano le cellule del cancro al seno, provocandone la migrazione. Aggiungere un substrato a ciascuna piastra e posizionare le piastre su una camera di imaging a bioluminescenza.

La cellula tumorale che esprime la proteina bioluminescente ossida il substrato ed emette luce. Quantifica la proliferazione misurando i fotoni totali emessi da ciascuna cellula utilizzando il software. Le cellule tumorali nella piastra di prova dovrebbero pro

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