Terreno condizionato dall'organo: terreno di generazione da cellule d'organo prelevate per studi sul cancro metastatico

Alcuni organi producono fattori solubili e diventano siti preferenziali per le metastasi del cancro al seno. Un terreno condizionato preparato da queste cellule di organi prelevati può aiutare a identificare e studiare tali fattori.

Inizia posizionando un organo prelevato, come un fegato, in una provetta contenente PBS freddo e capovolgendo la provetta su e giù per rimuovere il sangue residuo dell'organo. Mettere l'organo in una capsula di Petri. E usando un bisturi, taglia l'organo in piccoli pezzi.

Risospendere questi pezzi in una provetta contenente un mezzo basale integrato con un antibiotico per supportare la crescita cellulare e prevenire la contaminazione. A questo punto, versare la sospensione cellulare in una piastra di coltura e incubare a 37 gradi Celsius con un apporto continuo di anidride carbonica per la durata richiesta.

Durante l'incubazione, queste cellule rilasciano metaboliti, fattori di crescita, proteine della matrice extracellulare nel terreno. Quindi, trasferire la sospensione cellulare in una provetta da centrifuga e aggiungere un terreno fresco per diluirla. Centrifugare la provetta e filtrare il surnatante, che è il mezzo condizionato, in una provetta nuov