zPDX-Analisi dell'invasività: studio del comportamento invasivo delle cellule tumorali metastatiche negli xenotrapianti di embrioni di zebrafish

Gli xenotrapianti di embrioni di zebrafish sono utili nello studio dell'invasione delle cellule tumorali. Preparare modelli di xenotrapianto iniettando cellule tumorali metastatiche marcate in fluorescenza e cellule non cancerose nello spazio perivitellino di due embrioni transgenici. Lo spazio perivitellino è uno spazio tra il periderma dell'embrione e il sacco vitellino. Lascia che gli embrioni crescano per il periodo desiderato.

Durante questo periodo, le cellule tumorali metastatiche si dividono in modo aggressivo nel sito di iniezione, mentre le cellule non cancerose rimangono stabili. Dopo l'incubazione, utilizzare una pipetta pasteur per trasferire gli embrioni in una capsula di sospensione con fondo di vetro. Rimuovere l'acqua d'uovo in eccesso e posizionare gli embrioni nella posizione desiderata per l'imaging. Tieni un vetrino coprioggetti sopra il piatto e posizionalo sotto un microscopio a campo chiaro.

Acquisisci immagini e analizza il comportamento invasivo di entrambi i tipi di cellule. Le cellule tumorali metastatiche tendono a invadere i vasi sanguigni dal sito di iniezione. Si muovono lungo la circolazione e poi invadono il tessuto circostante per proliferare. Al contrario, le cellule non cancerose rimangono nel sito di iniezione. Nel protocollo di esempio, inietteremo cellule di cancro al seno nello spazio perivitellino e nel dotto di Cuvier in modelli di xenotrapianto di zebrafish per studiare le metastasi.

Per visualizzare le metastasi, con una pipetta Pasteur, trasferire l'embrione di pesce zebra iniettato in una capsula di polistirene con fondo di vetro e rimuovere l'acqua d'uovo in eccesso. Visualizzare l'intero corpo dell'embrione con un microscopio confocale impostato a basso ingrandimento per ottenere un modello generale di disseminazione delle cellule tumorali.

Utilizzare un laser a 488 nanometri per visualizzare la vascolarizzazione dell'embrione di zebrafish e un laser a 543 nanometri per visualizzare le cellule tumorali impiantate etichettate con un marcatore fluorescente rosso. Successivamente, scansiona l'embrione in otto-dieci passaggi per acquisire un'immagine di alta qualità.

• Zebrafish Embryo Xenografts - A research tool used to study cancer cell invasion.
• Perivitelline Space - A niche between the zebrafish embryo periderm and the yolk sac.
• Metastatic Cancer Cells - Malignant cells that can spread aggressively and invade lots areas .
• Non-cancerous Cells - Stable cells that do not invade or proliferate like cancer cells.
• Invasiveness - The capacity of cancer cells to infiltrate healthy tissues.

• Define the concept of Zebrafish Embryo Xenografts - These are used for studying cancer invasion (e.g., invasiveness).
• Outline the Perivitelline Space - It serves as the injection site for xenografts (e.g., perivitelline space zebrafish).
• Describe Metastatic Cancer Cells and their aggressive division and invasion traits.
• Connect to Experiment - The injected metastatic and non-cancerous cells in embryos facilitate the investigation of cellular behaviors.

• What is Zebrafish Embryo Xenografts and how it aids in studying cell invasiveness?
• What is the role of Perivitelline Space in these xenograft models?
• What difference in behavior can be expected between Metastatic Cancer Cells and Non-cancerous Cells?

• Practical Applications - Xenografts help in understanding cancer cell behaviors (e.g., invasiveness).
• Industry Impact - Such studies can guide developments in healthcare and cancer research.
• Societal Importance - Findings may result in better cancer treatments (e.g., combating malignancy).
• Scientific Advances -The methodology aids in real-time tracking of cell actions.