Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
התחל על ידי הנחת צד גחוני עכבר מורדם על מיטה כירורגית ואבטחת הגפיים של החיה. באמצעות מספריים, לחתוך לאורך קו האמצע דרך כלוב הצלעות עד בלוטות הרוק. מניחים קצה פיפטה מתחת לקנה הנשימה כדי לרומם ולבודד אותו. סובב את המיטה הכירורגית ב-180 מעלות. הכנס מחט מזרק המכיל כתם דיו הודו לתוך קנה הנשימה ולהזריק את הדיו לתוך הריאות עד שאתה מרגיש התנגדות.
תאים סרטניים מפרישים כמות גדולה של חומצה לקטית המייצרת מטען שלילי חזק על פני התא. כאשר תאים אלה מוכתמים בדיו הודו, כתם חומצי, משטח התא להדוף את הכתם ולהישאר מוכתם.
השתמש במספריים כדי לחתוך את קנה הנשימה ולהחליק זוג פינצטה מתחת לריאות. תוציא בעדינות את הריאות מגופה של החיה. לשטוף את הריאות במים ולהעביר אותם לתוך בקבוקון המכיל את הפתרון של Fekete כדי להסיר כתם עודף ולתקן את הרקמה במכסה המנוע אדים. גושי הגידול נראים לבנים על רקע כהה.
בפרוטוקול הבא, נבצע את טכניקת אינפלציית הדיו בהודו כדי לאמת גרורות בריאות.
כדי לאמת את גרורות הגידול העיקרי לריאה, יש למקם תחילה את העכבר בתנוחת העל-חושית על לוח פוליסטירן ולאבטח את הרגליים כדי להבטיח גישה ללא הפרעה לקנה הנשימה. לרסס את העכבר עם 70% אתנול. לאחר מכן, השתמש בזוג מספריים כדי לבצע חתך לאורך קו האמצע של הבטן האמצעית של העכבר דרך כלוב הצלעות ועד לכיוון בלוטות הרוק. זהה את קנה הנשימה. לאחר מכן, להשתמש מלקחיים כדי להסיר את הרקמות שמסביב.
לאחר מכן, מחזיק קצה פיפטה ביד אחת, להשחיל את הקצה מתחת לקנה הנשימה בעדינות להרים את הרקמה למעלה והרחק מהגוף. שמירה על קנה הנשימה מוגבה, לסובב את פלטפורמת ניתוח 180 מעלות. לאחר מכן, הכנס מזרק פקעת 27-מד חצי סמ"ק לתוך קנה הנשימה ולנפח לחלוטין את הריאות עם דיו הודו עד התנגדות חזקה מורגשת.
לאחר מכן, באמצעות זוג מספריים, לחתוך את קנה הנשימה. מחזיק את העכבר במקום עם מלקחיים אחד, להכניס מלקחיים אחרים מתחת לריאות ולמשוך את אונות הריאה מתוך העכבר. שוטפים את הריאות לזמן קצר ב מים ומעבירים את הרקמה למכסה אדים. לאחר מכן, מניחים את הריאות בבקבוקון זכוכית המכיל 3 מיליליטר של הפתרון של Fekete, מכסה את הבקבוקון כדי למנוע את הפתרון להתאדות. לאחר מספר דקות, מעבירים את הריאות לצלחת פטרי וסופרים את מספר גושי הגידול הבודדים, הלבנים והמטהטיים.
