Saggio sullo xenotrapianto di pesce zebra: un metodo per valutare l'efficacia antitumorale delle terapie sulla tumorigenicità nel pesce zebra in vivo

- Per prima cosa, metti le uova in una piastra di Petri e aggiungi la soluzione di Danieleau per mantenere le uova appena raccolte. Aggiungere fenil tiourea per inibire la pigmentazione e incubare per alcuni giorni. Dopo l'incubazione, dechorionate gli embrioni usando una pinza affilata e lasciali crescere ulteriormente.

Quindi, seminare il numero desiderato di cellule tumorali in una fiaschetta di coltura e incubare durante la notte. Ora aggiungi composti antitumorali e incuba ulteriormente. Dopo l'incubazione, aggiungere un colorante fluorescente per il tracciamento delle cellule, che si legherà alla membrana cellulare e colorerà le cellule.

Successivamente, aggiungere la tripsina per la dissociazione cellulare e diluire le cellule nella soluzione di rosso fenolo PBS prima della procedura per valutare il pH. Montare embrioni di zebrafish anestetizzati su una piastra di agar. Ora carica il microcapillare con la sospensione di cellule tumorali e iniettala nel sacco vitellino degli embrioni.

Trasferire gli embrioni su piastre di coltura contenenti la soluzione di Danieau e incubare ulteriormente. Successivamente, trasferire alcuni embrioni su un vetrino e aggiungere metilcellulosa p