Conservazione dei tessuti con paraffina fissata in formalina (FFPE): un metodo per studiare la morfologia dei tessuti

- Per prima cosa, posizionare una fetta di tessuto su una carta da filtro imbevuta di PBS per prevenire il restringimento o il rigonfiamento delle cellule bilanciando l'osmolarità. Trasferire il tessuto in una cassetta istosanitaria. Chiudere e posizionare la cassetta in formalina neutra tamponata, soluzione NBF. L'NBF contiene formaldeide che si lega a gruppi amminici di aminoacidi e previene la formazione di acido formico che pigmenta il tessuto. Lasciare la cassetta per una notte a bassa temperatura, che impedisce la degradazione dell'acido nucleico e fissa il tessuto. Disidratare il tessuto con più lavaggi di alcol.

Metterlo nella paraffina liquida e premerlo fino al fondo dello stampo. Rimuovere il peso e posizionare la parte inferiore della cassetta istografica sul fazzoletto. Versare la paraffina liquida sul gruppo. Lasciare solidificare la configurazione su una piastra fredda. La paraffina è insolubile in acqua e, dopo essere entrata nel tessuto disidratato, si indurisce e aiuta nel sezionamento. Trasferisci il blocco di tessuto su un microtomo. Tagliare e raccogliere sezioni sottili del tessuto su un vetrino. Se la sezione è troppo spessa, l'ossigeno e gli altri nutrienti